缺血修饰白蛋白测1

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1、缺血修饰白蛋白测定试剂的基本知识必须理解的基础知识缺血修饰白蛋白测定试剂盒组成及使用；什么是缺血修饰白蛋白；什么是白蛋白-钴结合试验；白蛋白-钴结合试验与缺血修饰白蛋白的内在联系；缺血修饰白蛋白与心肌缺血的内在联系以及心肌缺血与急性冠状动脉综合征的相互关系；缺血修饰白蛋白测定试剂盒缺血修饰白蛋白测定试剂是用于急性心肌缺血辅助诊断的体外诊断试剂，能够在各种全自动、半自动生化分析仪上使用，为液体双试剂，由长沙颐康科技开发有限公司生产；缺血修饰白蛋白的英文：IschemiaModifierdAlbumin,简

2、称IMA；液体双试剂的组成：R1：Co2+、缓冲液、稳定剂等R2：DTT、缓冲液、稳定剂等缺血修饰白蛋白（IMA）的概念血清白蛋白（HSA）氨基末端序列为人类所特有,是过渡金属包括铜、钴和镍离子主要的结合位点,组织缺血时释放的产物使循环血液中的部分HSA氨基末端结合位点改变,与金属离子结合能力下降,这部分发生了改变的HSA就称为IMA。IMA在血液中浓度升高就提示发生了组织缺血。缺血修饰白蛋白（IMA）的形成机制冠状动脉缺血时IMA产生的确切机制尚不清楚,各种观点尚有矛盾,但已定位在HSA氨基末端N-天

3、门冬氨酸(Asp)-丙氨酸(Ala)-组氨酸(His)-赖氨酸(Lys)序列的变化上。当冠脉局部血液和氧供减少,组织细胞进行无氧代谢,代谢产物乳酸堆积,导致酸中毒,局部微环境pH值下降,致使Cu2+从循环蛋白的结合位点释放,在还原剂作用下转化为Cu1+,Cu1+与氧反应生成超氧自由基,后者岐化为过氧化氢(H2O2)和氧。H2O2可通过Fenton反应形成羟自由基,羟自由基损害HSA,使N基末段序列的2～4个氨基酸发生N乙酰化或缺失,转化为IMA。IMA的检测方法IMA测定方法：比色测定法IMA检测是以心

4、肌缺血可引起HSA的N末端发生变化及其与Co(LL)结合迅速减少为前提,采用白蛋白-钴结合实验测定白蛋白与外源性Co(LL)结合的能力间接测定IMA含量，所以叫白蛋白结合钴试验（ACB试验），ACB试验已通过了美国国家药品和食品管理局认证，这是FDA自1994年批准肌钙蛋白的测定试验之后，首次批准的一个用来评价心肌缺血的生化试验项目。试剂盒全世界目前有两个生产厂家：美国局部缺血技术公司（IschemiaTechnoiogies,Denver,Colorado,USA）长沙颐康科技有限公司IMA的检测原理

5、正常白蛋白以活性形式存在,加入钴试剂后,Co2+与白蛋白N-末端结合,溶液中存在的游离Co2+浓度较低;而心肌缺血患者血清标本中含有较多的IMA,加入同等量的钴试剂后,由于IMA与Co2+的结合能力降低,溶液中存在较高浓度的游离Co2+,加入二巯基苏糖醇(DTT)试剂后可与游离Co2+产生络合反应,生成红褐色产物，在470nm处测定吸光度大小,其吸光度与Co2+浓度成正比，吸光度高者表示血清中存在较多的IMA。与标准品进行比较，即可计算出样本中ACB的值。IMA检测标本采集与处理受检者的准备：病人空腹1

6、2h，不饮酒24h后采集血样;如果病人服用抗凝血药物，血液在30分钟内不能凝固，结果解释应慎重。血清应通过物理方法尽快与血细胞分离。推荐时间最长不要超过2小时;静脉采血：除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。标本处理：血样采集后，应在室温下凝集后离心分离血清，血清样本应不溶血。测试必须在血液提取后2.5小时内完成；如果测试不能在2.5小时内完成，必须立即

7、在-20℃或更低温度下冷冻血清（分离凝块和红细胞），从血液提取到冷冻的时间应在1小时以内；解冻冻结的样品需在2～8℃或室温下进行，通过低速涡流混匀器或轻轻颠倒充分混合，测试必须在样品解冻后1.5小时内获得，不得含有EDTA、枸橼酸钠等鳌合剂的抗凝剂试剂与校准血清的稳定性原包装试剂储存在2～8℃至标签所示失效日期。试剂开瓶后，在仪器中至少可保存30天。试剂储存在18～22℃稳定28天，试剂应避免污染。试剂颜色为澄清透明液体，当试剂出现沉淀或絮状物时，按照试剂失效处理。校准血清在2～8℃储存至标签所示失效日

8、期，复溶后-20℃保存，可稳定一个月，只可冻融一次，避免反复冻融。IMA的特性及应用心血管疾病是威胁人类健康与生命的头号杀手，它具有高发病率、高致残率、高死亡率及较高的治疗费用等特点。最近的流行病学资料显示，我国现有高血压患者达1.6亿，高血脂人数达1.6亿，约有400万心力衰竭病人，平均每12秒就有一人死于心血管疾病，心血管疾病已逐渐成为我国城乡居民的第一位死因。知识的逻辑联系心血管疾病是威胁人类健康与生命的头号杀手，它具有高发病率、高致