微生物实验习题.doc

《微生物实验习题.doc》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、兽医微生物学实验复习题1、兽医微生物实验室注意事项是什么？答：①防止病原微生物的散布；②防火；③节约；④标记；⑤记录；⑥安全；⑦清洁与秩序2、观察细菌常用什么显微镜？它主要有哪几部分组成？答：光学显微镜光学部分:目镜、物镜、反光镜、聚光器；机械部分：镜座、镜臂、镜筒、粗调节器、细调节器。3、油镜用毕后，为什么必须把油镜擦净？答：油镜的原理是通过香柏油的光路折射能更加清晰的观察微生物，油具有粘附性，且不溶于水，所以，在观察完后，香柏油会粘附在镜头上，不擦去的话，风干后镜头就变得模糊不清，甚至报废了，又因为是油所以简单的用擦镜纸擦拭是

2、擦不干净的，二甲苯属于有机溶剂，4、用过多的二甲苯或酒精乙醚混合液擦拭镜油有什么危害？答：过多的二甲苯或酒精乙醚混合液容易脱胶，使油镜脱落。5、使用油镜时用什么作为物镜与玻片间的介质，有几种？答：可用与玻璃的折光系数相近的油类，有7种，如柏木油。6、观察细菌时显微镜的操作步骤是什么？主意事项是什么？答：将显微镜物镜镜头转为油镜对好光线（开高集光器，开大光圈，调好反光镜）使亮度最强在载物台上放上载玻片，并在玻片上放一滴香柏油将标本移至载物台正中转动粗准焦螺旋，使油镜浸入油滴中左眼由目镜注视镜内，慢慢地转动细准焦螺旋，直至物像清晰为止

3、注意事项：1.调节粗准焦螺旋的时候要慢2.观察完后要用二甲苯擦拭油镜7、微生物绘图要求有哪些？答：①绘出一个视野，圆形。②细菌大小比例合理，必须标明名称。③标名显微镜的放大倍数，标明菌名。④绘图一律用铅笔。8、制备细菌染色标本片时应注意哪些事项？答：①干燥好的抹片固定时，使抹面向上，以其背面在酒精灯外焰上如钟摆样来回拖动过数次，略作加热，但不能太热，以不烫手为度进行固定。9、涂片固定的意义何在？固定时应注意什么问题？有哪些固定方法？答：意义：涂片固定可将涂片上的细菌杀死，使之固定而不会到处漂移，并且死菌比活菌更容易着色，为后面染色

4、做准备。注意：若用火焰固定时，抹面向上，以其背面在酒精灯外焰上如钟摆样来回拖动过数次，略作加热，但不能太热。固定方法：火焰固定和化学固定。10、细菌染色的原理是什么？答：细菌的等电点较低，约在pH2～5之间，故在中性、碱性或弱碱性溶液中，菌体蛋白质电离后带负电荷，易与带正电荷的碱性染料如龙胆紫及碱性复红等结合，使细菌被染成紫色或红色。11、试述细菌革兰氏染色法的步骤及结果。革兰氏染色的原理是什么？答：原理：G＋菌：细胞壁厚，肽聚糖网状分子形成一种透性障，当乙醇脱色时，肽聚糖脱水而孔障缩小，故保留结晶紫-碘复合物在细胞膜上。呈蓝紫色

5、。Gˉ菌：肽聚糖层薄，交联松散，乙醇脱色不能使其结构收缩，其脂含量高,乙醇将脂溶解，缝隙加大，结晶紫-碘复合物溶出细胞壁，沙黄复染后呈红色。步骤：①加草酸铵结晶紫染色液1-2min，水洗；②加革兰氏稀碘液1-3min，水洗；③加95%酒精脱色0.5min，水洗；④10倍稀释石碳酸复红液复染10-30s，水洗；⑤吸干或自然干燥，镜检结果：革兰氏阳性菌呈蓝紫色，革兰氏阴性菌呈红色。12、什么是培养基？试述制备培养基的原则和要求。（实验指导书19页）答：培养基用人工方法将多种物质按照各类微生物生长的需要而合成的一种混合营养基质，一般用于

6、分离和培养细菌。①原则和要求：选择适合细菌生长的温度；②选择适合细菌生长的环境；③应纯化④接种量少⑤选择适合细菌生长的培养基；⑥按无菌操作13、试述普通肉汤培养基的制备方法及其用途。答：①按以下剂量称各种试剂置于铝锅中：牛肉膏5g蛋白胨10g氯化钠5g磷酸氢二钾1g蒸馏水1000ml②上述成分加热溶解后，以氢氧化钠溶液调整酸碱度至ph7.4~7.6③将肉汤分装于试管中，塞上棉塞，用包装纸包扎好待灭菌④将培养基置于高压蒸气锅内，121°C灭菌15~30min。用途：①用作细菌的液体培养②检查细菌的发育状况，以及形成的沉淀物、菌膜、菌

7、环等③制作固体培养基的基础14、试述普通琼脂培养基的制备方法及其用途。答：①普通肉汤500ml琼脂10g②加热煮沸，待琼脂完全融化后，将ph调至7.4~7.6，再加热煮沸20min③分装，包扎④灭菌121°C，15~30min。用途：①细菌的分离培养，纯培养②观察菌落形状及保存菌种③制作特殊培养基的基础15、什么是灭菌？有哪些方法？高压蒸汽灭菌为什么要将灭菌锅的冷空气排净尽？灭菌完毕后什么情况下才可以打开锅盖取灭菌物品？答：灭菌：杀灭物体上所有微生物。包括杀灭细菌芽孢，霉菌孢子在内的全部病原微生物和非病原微生物。灭菌方法：①物理消

8、毒法:干热灭菌法：火焰、热空气、红外线灭菌；湿热灭菌法：煮沸、较低温度杀灭液态食品中的微生物、流通蒸汽，高压蒸气锅；辐射灭菌法：可见光线、紫外线等。②化学消毒法:酒精等.原因：排除灭菌器内原有的冷空气,为了防止高压锅内存在的冷空气时,虽压强达到规定