标准曲线的绘制.pdf

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1、实验一染料吸光度—浓度标准工作曲线的绘制（选做）一、实验目的掌握分光光度计的使用方法，学会染料吸收光谱曲线的测定和未知染液浓度的测定，加深对染色泽和吸收光谱关系的认识。二、实验原理测定染料在溶液中或纤维上的含量的方法有多种，本实验介绍用分光光度计法测定染料在溶液中的浓度。采用分光光度法测定染料浓度的基本理论是基于朗白---比耳定理。该定理指出，有色溶液对一束平行单色光的吸光度与溶液的浓度和液层厚度之积成正比。其数学表达式为：A＝KbC其中：K－吸光系数或消光系数，表示纯物质浓度为１g/l液层厚度为１cm时的吸光度，K值是各

2、种染料在一定波长下的特征常数b－有色溶液的液层厚度C－有色溶液的浓度A－吸光度在一定波长和一定液层厚度条件下，吸光度与稀溶液的浓度成正比，吸光度Ａ也可用光密度D或消光E表示。根据吸光度A与浓度C之间的直线关系，将待测溶液的吸光度A2与已知浓度为C１R该物质吸光度A1比较，即可求出待溶液的浓度C2，这就是比色定量分析的理论基础C１/A１=C2/A2或C2=C１/A１×A2三、主要实验材料、化学品和仪器1、化学品：活性红X-3B10g/l、Na2CO3、Na2SO42、仪器：722型分光光度计四、实验步骤1、吸收光谱曲线的测定

3、（用活性红X-3B）1、1标准溶液的配制用10ml的移液管移取浓度为1g/l的染料溶液10ml,置于100ml容量瓶中#并稀释至刻度。将上述染料溶液分别按1ml,3ml,5ml,10ml,15ml,转移到另外1#－525ml容量瓶中并稀释至刻度，摇匀，待测其吸光度。1、2吸收光谱曲线的测定#取3染液在波长范围为380nm~730nm内测定吸光度并从光谱吸收曲线中找出λmax。2、混合染料浓度的测定2、1绘制标准曲线：#当染料的最大吸收波长λmax确定后在最大吸收的波长下分别测定１－#5的已知浓度染液的吸光度，然后以染液浓度

4、为横座标，以吸光度为纵座标，制作标准曲线。2、2测定未知浓渡的染液：在测定同一染料的未知浓度时以其λmax处测得的吸光度，在标准曲线上查得对应的染液浓度。五、注意事项1、实验时使用水作溶剂，空白溶液也用自来水2、实验时一律使用B=1CM的比色皿，此时A=KC六、试验结果与讨论根据所做图线分析染料浓度与吸光度之间呈什么关系。若染料相对应浓度发生变化，是否影响它们两者之间的关系。