长安金柑和滑皮金柑果皮显微观察及精油组分分析.pdf

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1、34中国南方果树2014年第43卷第1期长安金柑和滑皮金柑果皮显微观察及精油组分分析潘腾飞，欧智涛，黄桂香，周翡云，何新华(1广西大学农学院园艺系，南宁，530004；2安徽大生农业科技发展有限公司)摘要：以产于广西的滑皮金柑(滑皮金弹)和长安金柑(融安金柑)幼果和成熟果为试材，采用石蜡切片、扫描电子显微镜显微等技术，对不同发育阶段幼果果皮解剖结构及成熟果皮表皮特征进行观察，统计成熟果实果皮油胞数，并通过气相色谱一质谱联用仪对成熟果皮精油组分进行分析。结果表明，滑皮金柑和融安金柑油胞形成的时间和数量存在明显差异；从两个品种成熟果实果皮精油中共确定了41个组分，萜烯类化

2、合物为主要组分，两个品种均以柠檬烯含量最高；融安金柑果皮精油含量是滑皮金柑的近7倍，滑皮金柑果皮精油组分则更为丰富。关键词：长安金柑；滑皮金柑；油胞；精油；广西中图分类号：S666．1文献标识码：A文章编号：1007-1431(2014)01—0034—04柑桔精油作为一类混合物，主要存在于果皮油5个方位，样品置于保鲜袋内，带回实验室待测。胞之中。柑桔果皮油胞又称分泌腔，其起源和形成1．2果实油胞显微观察幼果：将保存于7O乙方式目前尚有较大争议_1]。柑桔精油组分在不同醇中的幼果取出，经7O～100乙醇梯度脱水，品种和栽培条件下有所差异，总体上以萜烯类化合TO型生物制

3、片透明剂透明处理，包埋后使用Leica物、酯类化合物和醛类化合物等含量最为丰富，含量RM2255石蜡切片机连续切片，厚度为8～12m，最多的化合物为柠檬烯l_3]。目前对柑桔精油组分切片置4O℃恒温干燥后，T0脱蜡，番红一固绿对染分析与鉴定的方法主要包括气相色谱法(Gc)、气相法染色，加拿大树胶封片，LeicaDM-4000正置荧光色谱一质谱联用法(0Ms)以及气相色谱／傅里叶变显微镜观察、拍照。换红外光谱联用法(GC／FTIR)等，其中以GC-MS成熟果：取成熟果实果皮用2．5戊二醛固定，法使用最为普遍l6。]。由于金柑果实带皮食用，因经7O～100乙醇梯度脱水，干

4、燥，RMC-Eiko离此，果皮精油含量及组分直接影响果实的风味。长子镀膜机真空离子镀金，使用HitachiS-3400N扫描安金柑(融安金柑、融安金桔、阳朔金柑)和滑皮金柑电子显微镜(SEM)观察、拍照。(滑皮金弹)是广西金柑主要鲜食品种l_8]。本试验对1．3成熟果实油胞数目统计随机抽取两个品种滑皮金柑和融安金柑果皮油胞形态、形成时期及果成熟果实各lO个，并在每个果实上任意选择果皮1皮精油含量和组分进行了比较分析，以期为金柑果cm2区域统计油胞数。实深加工及品种评价等提供参考。1．4成熟果实果皮精油提取与组分分析参考2010年版《中国药典》挥发油测定方法_g]。取果

5、皮1材料与方法80g匀浆，加入蒸馏水500mL，添加NaC13g，利用1．1果实样品采集滑皮金柑和融安金柑不同发精油测定仪提取装置蒸馏120分钟获得精油粗提育阶段的幼果样品采集自广西大学农学院实验基地品。在粗提品中加入适量无水NaS04，置于一6年生树，成熟果实样品采集自广西融安县黄金村820℃冰箱过夜，使用有机相微孑L滤膜过滤后获得精年生树。幼果样品于开花前3天起，每隔1天采样油精提品。使用Agilent7890A-5975C气相色谱一质1次，连续3O天，样品置10~20倍体积的卡诺液中谱联用仪(GC-MS)对两个金柑品种果皮精油组分抽真空，固定24小时后，转入7O

6、乙醇中保存待进行分析。色谱柱采用HP-5MS(30m×0．25用。成熟果实随机采集自树势健壮树体东南西北中mmX0．25m)。载气为氦(纯度99．995)，流速收稿日期：2013—09—17；修回日期：2013—1O一28基金项目：广西大学科研基金资助项目(XBZ120751)资助。作者简介：潘腾飞(1988一)，男，硕士研究生，研究方向为果树生物技术与种质改良。E-mail：pestsss@foxmail．com通信作者：黄桂香(1966一)，女，教授，硕士生导师，从事果树种质资源与遗传育种研究E-mail：hguixiang@163．com36中国南方果树2014

7、年第43卷第1期两个品种的果皮精油组分均以萜烯类化合物为主，并且以柠檬烯含量最高(见表1)。表1滑皮金柑和融安金柑果皮精油已鉴定组分柑，由此推测，滑皮金柑形成油胞的细胞凋亡时期晚3讨论于融安金柑，且凋亡细胞范围不及融安金柑。据观果皮油胞数和形态的差异是滑皮金柑和融安金察，滑皮金柑和融安金柑果皮油胞均是在表皮下部柑较明显的表观差异。Chen等m认为，裂溶生是与基本分生组织或薄壁组织相接触的初生分生组织柑桔果皮油胞的形成方式，细胞程序性死亡参与了中形成，这与Bennici等_】1_在甜橙和柠檬品种上观这一过程。滑皮金柑果皮油胞出现时期晚于融安金察到的现象