不同发芽条件对蚕豆植酸酶活性的影响.pdf

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1、2012年10月中国粮油学报Vo1．27．No．10第27卷第l0期JournaloftheChineseCerealsandOilsAssociationOct．20l2不同发芽条件对蚕豆植酸酶活性的影响罗羽洧解卫华马娟郁志芸(金陵科技学院园艺学院’，南京210038)(环境保护部南京环境科学研究所，南京210042)摘要以蚕豆为试材，研究发芽过程中植酸酶在蚕豆不同部位的变化和性质。发芽蚕豆不同部位植酸酶活性呈现先高后低的变化趋势，子叶植酸酶在发芽第6天达最高值。超声波处理对发芽蚕豆胚根、子叶和胚芽植酸酶活性有一定促进作用，其中以15rain超声波处理对胚根和胚芽

2、植酸酶活性影响最大，5min处理、10min处理和15min处理均对子叶植酸酶活性有显著影响。在发芽过程中不同光照对蚕豆进行处理，不论胚根、子叶还是胚芽，黑暗处理植酸酶活性高于光照处理。核酸抑制剂放线菌素(Act—D)和蛋白质抑制剂环已酰胺(CHM)对发芽蚕豆胚根、子叶和胚芽中的植酸酶活性有一定影响，其中以CHM的抑制效果最为明显。关键词蚕豆发芽植酸酶中图分类号：TS275．4文献标识码：A文章编号：1003—0174(2012)10—0032—06植酸酶，又称肌醇六磷酸水解酶，广泛存在于动长短有关。但超声波和光照处理对发芽蚕豆植物组织和微生物¨j。目前分离的植酸酶

3、主要有植酸酶活性影响目前没有报道。关于植酸酶的来两种：3一植酸酶和6一植酸酶，前者主要存于动物和源，报道的说法不一。研究表明，植酸酶存在于豆科微生物；后者主要存于植物组织J。籽粒本身，在发芽过程中被激活发挥作用；另外也蚕豆发芽过程中，植酸酶降解植酸盐，释放出来有研究表明，籽粒本身不存在植酸酶，豆类作物在发的无机磷、磷酸肌醇和其他金属离子可供蚕豆生长芽过程中，植酸酶来源于从头合成_2；还有学者认为所用。蚕豆中的植酸磷占总磷含量的80％，无植酸酶有两种来源。本研究分析了不同发芽条件机磷在蚕豆发芽过程中起着重要作用，细胞膜合成，对蚕豆植酸酶活性的影响，同时就蚕豆在发芽过程

4、DNA和RNA合成都需要无机磷的参与J。植酸或中植酸酶的来源做一初步的探讨，为更好利用蚕豆植酸盐降解生成的三磷酸肌醇是重要的第2信使，营养价值奠定基础。它感应外部环境各种刺激来调节蚕豆的生理反应J。同时，植酸盐还结合很多金属离子，如Mg¨、1材料与方法ca“等，这些离子在蚕豆发芽过程中也起着重要的1．1供试材料生化作用。如Mg¨、Ca是很多种蛋白酶的激活剂，蚕豆品种为启豆2号，2010年购于南京种业有同时ca¨还是生物体内重要的第2信使，这些金属限公司。离子只有从植酸盐中释放出来才能发挥作用。1．2试验仪器植酸酶在蚕豆萌发过程中对自身营养成分利用起到JA2003型电

5、子天平：上海精密科学仪器有限公重要作用，因此蚕豆植酸酶活性的高低，对蚕豆发芽司；磁力搅拌器：上海司乐仪器厂；WH一3微型旋涡有重要的意义¨。混合仪：上海沪西分析仪器厂；HH一6型数显恒温水蚕豆植酸酶活性受到多种外界因素影响，如温浴锅：常州国华电器有限公司；SK5200LH型超声波度、pH、发芽时间等。这些因素对植酸酶活性的影响清洗器：上海一恒科学仪器有限公司；UV一2802型先前已有很多报道l1，如植酸酶的最适温度为紫外可见分光光度计：尤尼柯(上海)仪器有限公司。50—55℃，最佳pH5．5，植酸酶活性大小与发芽时间1．3发芽试验和样品处理基金项目：江苏省高校自然科

6、学基金(11KJD210001)，金陵科技学院博士科研启动基金(jit—b一201205)选择均匀一致的蚕豆种子用0．5％次氯酸钠消收稿日期：2012—01—02毒25rain，再用去离子水反复冲洗2次。然后放入作者简介：罗羽洧，男，1978年出生，副教授，博士，园艺产品贮藏与加工表面皿中以25℃水浸泡24h，在25℃条件下发芽第27卷第l0期罗羽洧等不同发芽条件对蚕豆植酸酶活性的影响338d。每24h取样一次，把蚕豆的胚根、子叶、胚芽和比发芽前4天要高。胚轴剥开，放在聚乙烯袋中分别保存，然后放置于一18℃冰箱中待测。每天换水、换气2次。每个试＼验材料设置3个重复。

7、j＼1．4植酸酶活性的测定蜒龌分别称取5．000g发芽蚕豆样品，研磨后放入4：四个100mL烧杯中(4个重复)，加入50mL冷却的醋酸缓冲液，用磁力搅拌器搅拌60min，然后过滤，定012345678容至100mL，得到植酸酶粗酶液，置于冰箱中低温保发芽时间／d存备用。取4支已标号的10mL刻度试管，其中1图1植酸酶活性在胚根中含量的变化管作空白对照，其他3管为反应管。在4支刻度试管从图2的结果可以看出，子叶中植酸酶活性大于中分别加入3．000mL植酸钠溶液，置于37℃水浴胚根中的活性(P<0．01)。子叶在刚开始发芽的时就锅预热5min，然后以相同时间间隔(间