从SAGE文库筛选的家蚕正反交F1代3个差异基因的组织表达分析.pdf

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1、5cience譬衅l霍盟口譬■2013，39(4)：0674—0679ISSN0257—4799；CN32—1115／SE—mail：CYKE@chinajourna1．net．CH从SAGE文库筛选的家蚕正反交F。代3个差异基因的组织表达分析周前凯张彩霞王华魏广兵李娟刘腾金鑫徐世清司马杨虎(苏州大学基础医学与生物科学学院，江苏苏州215123；山东农业大学林学院，山东泰安271018)摘要家蚕许多数量遗传性状在品种的正反交之间存在明显差异，研究产生性状差异的分子机制对于家蚕育种具有重要指导意义。基于家蚕品种75新与7532正反交F代同性别间的SAGE文库，比较、筛选出与

2、家蚕抗逆性相关的3个表达差异显著基因——线粒体硫氧还蛋白2(TRx2)基因、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)基因、抗菌肽(AMPs)基因。在幼虫5龄期设置高温(34℃)饲养环境，利用竞争性半定量RT．PCR方法检测3个差异基因在75新与7532的正反交F，代幼虫脂肪体、中肠和丝腺组织中的转录水平。TRx2基因和GPx基因在正反交F代雌、雄幼虫的3个组织中均有表达，其中：TRx2基因在反交F。代雌、雄幼虫3个组织的转录水平总体上略高于正交F代，表达趋势为先升高后降低，至5龄第6天的表达最高；GPx基因在正反交F，代雌性幼虫3个组织的转录水平在整个5龄期无明显差异，但雄性幼虫中该

3、基因的转录水平在5龄第3天和第6天以反交F代雄性幼虫略高，推测其抗氧化性能高于正交F代雄性幼虫。AMPs基因在正反交F代幼虫脂肪体中的转录水平最高，且正反交之间、雌雄之间无明显差异，推测该基因在脂肪体中的高水平表达对维持家蚕在高温环境下的体内稳态环境起重要作用。关键词家蚕；正反交F代；差异表达基因；高温中图分类号$882；Q785文献标识码A文章编号0257—4799(2013)04—0674—06AnExpressionalAnalysisonThreeDivergentGenesinF1Genera-tionofBombyxmoriReciprocalCrossesb

4、ySAGELibraryScreeningZHOUQian—KaiZHANGCai．XiaWANGHua’WEIGuang—Bing’LIJuanLIUTengJINXin’XUShi-QingSlMAYang．Hu’(SchoolofBiology＆BasicMedicalSconces，SoochowUniversity，SuzhouJ~ngsu215123，China；CollegeofForestryShandongAgriculturalUniversity，TaianShandeng271018，China)AbstractManygeneticquantit

5、ativecharactershaveobviousdifferencesbetweenreciprocalcrossesofcertainsilkwormfBombyxmori)varieties．ElucidationofmolecularmechanismcausingsuchdifferencesIsofgreatimportanceinsilk—wormbreeding．BasedonthesamesexSAGEcomparativelibraryforF1generationofreciprocalcrossesofsilkwormva—riety75xina

6、nd7532，wescreenedandobtainedthreesignificantlydifferentandadaptabilityrelatedgenes，namelymite—chondrialthioredoxin2(TRx2)gene，glutathioneperoxidase(GPx)geneandantibacterialpeptides(AMPs)gene．Duringthe5thlarvalinstar，hightemperature(34。c)wascreatedforsilkwormrearingandcompetitivesemiquanti

7、tativeRT—PCRwasemployedtodetectthetranscriptionlevelsofthesethreegenesinfatbody，midgutandsilkglandoftheFlarvaeof75xinand7532reciprocalcrosses．TheresultsdisplayedthatTRx2geneandGPxgenewereboth收稿日期：2013—02—04接受日期：2013—03—13资助项目：现代农业产业技术体系专项(No．CARS-22)。expressedinthel