电泳技术的现状和发展

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1、中华检验医学杂志>??2年3月第>L卷第M期D017KN$*A()，&(".(:*(+>??2，O/%>L，P/QM·>J4··述评·电泳技术的现状和发展沈霞早期的电泳技术是由瑞典!""#$%$大学物理化学系&’()*(+,教授提出了荷电的胶体颗粒在电场中移动的现象称其为电泳（(%(-.+/"0/+(#1#）。于2345年，由6+7(81#(%19#教授———诺贝尔奖金获得者，利用此电泳现象，发明了最早期的界面电泳（:/’17,*/97)$+;），用于蛋白质分离的研究，开创了电泳技术的新纪元。此后，各种电泳技术及仪器相继问世，先进的电泳仪和电泳技术的不断

2、发展，使它在生物化学实验技术中占重要地位，按电泳的原理有三种形式的电泳分离系统：原则上按电泳的原理来分，即移动界面电泳（:/’17,*/97)$+;(%(-.+/"0/+(#1#）、区带电泳（

3、价值也各有差异。固体支持介质可分为两类：一类是滤纸、醋酸纤维素薄膜、硅胶、矾土、纤维素等；另一类是淀粉、琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶。由于它们具微细的多孔网状结构，故除能产生电泳作用外，还有分子筛效应，小分子会比大分子跑得快而使分辨率提高。它的最大优点是几乎不吸附蛋白质，因此电泳无拖尾的现象。低浓度的琼脂糖电泳相当于自由界面电泳，蛋白质在电场中可自由穿透，阻力小，分离清晰，透明度高，能透过>??@5??7:波长的光线，故电泳结束后无须进行“透明”，可减少操作步骤及由此引起的实验误差，又因底板无色泽，也提高了对着色区带的检测敏感性，为此第一类支持介质现已被第二类

4、支持介质所替代。稳态电泳或称置换电泳的特点是分子颗粒的电泳迁移在一定时间后达到稳态，如等电聚焦和等速电泳。区带电泳是临床检验领域中应用最广泛的技术，有重要临床意义，尤其是结合了其他新技术，更扩大了其应用范围，提高了检测技术，现对该技术的现状与发展作一评述。一、正确解释电泳结果，有助于临床疾病判断的参考新鲜血清经电泳后可精确地描绘出患者蛋白质的全貌，一般常见的是白蛋白降低，某个球蛋白区域升高，提示不同的临床意义。如急性炎症时，可见!2，!>区百分率升高；肾病综合征、慢性肾小球肾炎时呈现白蛋白下降，!>球蛋白升高，"球蛋白也升高；缺铁性贫血时可由于转铁蛋白的

5、升高而呈现"区带增高，而慢性肝病或肝硬变呈现白蛋白显著降低，#球蛋白升高>@4倍，示免疫球蛋白多克隆增高，甚至可见融合的"=#桥连现象，还可在#区呈现细而密的寡克隆区带；对单一克隆浆细胞异常增殖所产生的无抗体活性的均一的免疫球蛋白称A蛋白（:/7/-%/7$%"+/.(17）的检测，血清蛋白电泳是其首选的实验诊断方法。可在电泳区带的!>@#区呈现致密而深染，高度集中的蛋白克隆增生区带，称其为A蛋白区带，扫描后形成高而狭窄的单株峰，若此峰在#区其峰高与峰底宽之比B>C2，且由于正常免疫球蛋白合成限制造成背景染色浅。由A蛋白所导致的一组疾病如：多发性骨髓瘤、

6、巨球蛋白血症、重链病、游离轻链病、半分子病、良性单株丙球血症和双A蛋白血症等，目前这类疾病已不属罕见。血清蛋白电泳对这类疾病的早期诊断，疗效观察和预后判断均有十分重要的意义。二、电泳技术与免疫技术相结合，大大扩大了其临床应用的范围让电流来加速抗原与抗体的扩散并规定其运行方向，从而加快了沉淀反应的速度。免疫电泳技术的种类很多，如：对流免疫电泳（DEFG）、火箭免疫电泳（HEF）、电免疫扩散（FEI）。在原有的几种免疫电泳方法的基础上，又不断地派生出一些新的技术，如：免疫电泳（EFG）技术，23J3年6%"(+与K/07#/7推荐免疫固定电泳万方数据作者单位

7、：>???3>上海第二医科大学附属新华医院检验科·:’K·中华检验医学杂志:**$年%月第:K卷第)期=92MN6@O(P/，;PQRP,OPB:**$，S40:K，T4E)（!"#）是一种包括琼脂糖凝胶蛋白电泳和免疫沉淀两个过程的操作，是免疫沉淀反应的一种混合技术，检测标本可以是血清、尿、脑脊液或其他体液。$%&’年血清免疫固定电泳（!"）技术再次被推荐，用于(蛋白的分型。血清蛋白质在琼脂糖凝胶介质上经电泳分离后，应用固定剂和各型免疫球蛋白及其轻链抗血清，加于凝胶表面的泳道上，经孵育让固定剂和抗血清在凝胶内渗透并扩散后，若有对应的抗原存在，则在适当位置

8、形成抗原抗体复合物并沉淀下来。电泳凝胶在洗脱液中漂洗，以除去未结合的蛋白质，仅保