年高中生物专题植物的组织培养技术精品学案新人教版选修(精品).doc

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1、专题3植物的组织培养技术第9课时菊花的组织培养【目标导航】1.了解植物组织培养技术在生产中的应用和MS固体培养基的配方。2.熟悉植物组织培养的基木过程和影响植物组织培养的因素。3.理解细胞分化的概念及离体植物细胞的脱分化和再分化。知识清单•一、基础知识1.植物组织培养的基木过稈⑴细胞全能性的表达：的植物组织或细胞，在一定的、和«_的作用下，发育成完桀植株的过程。(2)细胞分化：在植物的过程屮，细胞在、和上都会出现的差异，形成这些差异的过程叫做细胞分化。(3)植物纽织培养的基本过程牛长离体的植物器官、组织

2、或细胞(又叫)愈伤组织胚状体、丛芽等—新个体%1愈伤组织的特点：细胞,是_群的呈的薄壁细胞。%1脱分化(去分化):由的植物纟R织或细胞产生的过程。%1再分化：由重新分化成根或芽等器官的过程。(4)条件：的植物组织或细胞，在一定的、和其他外界条件的作用下就可能表现出全能性，发冇成完整植株。离体的植物纽•织或细胞叫做02.影响植物组织培养的因素(1)培养材料的煤响：不同的植物组织，培养的难易程度。对于同一种植物材料，材料的、等也会影响实验结果。因此菊花的纟H织培养，一般选择的茎部的侧枝。(2)营养物质的影响

3、：常用的培养基，主要成分包括、、以及蔗糖等。其屮和提供植物细胞所必需的无机盐；提供碳源，维持细胞渗透压。(3)植物激素的影响：MS培养基常需添加植物激素。其屮和是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素，这两种激素的、以及等，都会影响实验结果。下表是关于两种植物激素在组织培养过程屮的作用。使用顺序或用量比实验结果先使用生长索，后使用细胞分裂索有利于，但细胞先使用细胞分裂素，后使用生长素细胞同时使用分化频率生长素用量/细胞分裂素用暈，比值高有利于的分化、抑制的形成生长素用最/细胞分裂素用最，比值低有利于的

4、分化、抑制的形成生长素用量/细胞分裂素用量，比值适中促进的形成(4)环境因素的影响：、、等条件也能影响植物组织培养。二、植物组织培养的操作流程1.制备MS固体培养基：将各种营养成分按比例配制成o利用母液配制菊花组织培养所需要的培养基，菊花的组织培养比较容易，因此可以不加激素，而如果是其他植物的组织培养，则要配制成二种培养基，即、和o配制菊花的组织培养的培养基时先将称好的琼脂加入800mL蒸镭水中，加热使熔化；然后加入30g,加入一定量的,充分混匀后加蒸镭水定容至1000mL,调节；最后分装到锥形瓶屮，每

5、瓶分装50mb或100mL。用包在纱布中的棉塞封严瓶I丨，外面包一层牛皮纸。将配制好的培养基放入锅，在121°C下灭菌15min02.外植物体消毒：选取生长旺盛的菊花的嫩枝，先用清水洗净，再用体积分数为浸泡6〜7s后，立即取出并用无菌水清洗，取出后吸干水分再放入质量分数为屮浸泡1〜2min0取岀后，在无菌水中至少清洗3次，漂净消毒液。3.接种：在超净工作台上铺上无菌滤纸，将已消毒的菊花茎段切成小段(长0・5~L0cm),迅速接种到培养基上。插入时应注意方向，使嫩茎的形态学下端接触培养基，不要。毎瓶接种6

6、〜8块嫩茎。接种后，将锥形瓶的瓶口在酒精灯火焰上转动灼烧一遍，将封口膜重新扎好，贴上标签，做好记录。4•培养：接种后的锥形瓶放在屮培养。培养温度应控制在18〜22°C,并且每□用口光灯光照12h,并定期进行,保持适宜的和o5.移栽：当小苗长到5〜6cm,基部形成根原基的时候，即可进行移栽。试管苗是在无菌、充分营养供给、适宜的光照和温度以及100%相对湿度环境屮生长的。刚岀瓶的试管苗对外界环境不太适应。将试管苗培养瓶的瓶口敞开一半，放置在20〜25°C的遮阴环境屮，适应7〜14d。若试管苗不萎蔦、有新生长

7、的趋势，便可将试管苗取出，小心洗净粘在根上的培养基，植入盛有等材料的花盆屮，浇足水分，罩上带孔的報料薄膜，将花盆放置在20〜25°C的阴凉处3〜5d。待幼苗长出新叶时，揭去報料薄膜，再过7〜10d,幼苗即可移栽到土壤里。6.栽培：将幼苗移载后，每天观察并记录幼菌生长情况，适时浇水、施肥，育至开花。提醍(1)植物组织培养一定要采用无菌技术。(2)实验选材是实验成功的关键。对点训练•知识点一植物组织培养的基木过稈及影响因索1•请冋答下列有关植物组织培养的儿个问题。（1）离体植物组织和细胞培养常用的一种培养基

8、是,其主要成分屮的大量元素有，培养基屮常用的两种植物激素是和,两者使用时的、、等，都会影响实验的结果。（2）下图表示植物组织培养的部分过程：离体的器官、组织或细胞①过稈是,②过程是,A是o（3）组织培养过程中还需要维持一定的外界条件，一是要有适宜的,二是2.下列关于影响植物组织培养因素的说法，正确的是（）A.不同植物组织培养的难易稈度不同，同一种植物材料培养的难易程度相同B.在植物组织培养中，培养基屮必须添加植物激素C.植物激素屮，生长素和