鱼类鳃霉病检疫技术规.doc

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1、鱼鳃霉病检疫技术规范1范围本标准规定了鱼鳃霉病(fishbranchiomycosis)的检样质量要求、检疫方法、非鱼鳃霉病的判定和无害化处理。本标准适用于鱼鳃霉病的检疫。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。DB43/221-2004水生动物检疫规程，中华人民共和国进出境动植物检疫法。3检样质量要求每批次取被检病鱼5～7尾，材料新鲜无污染，

2、病变具有代表性。4检疫方法4.1群体检查4.1.1现场检查仔细检查全群鱼的健康状况，有否异常表征，如发现被检鱼类不摄食，呼吸困难，游动缓慢，尤其是草鱼、青鱼、鳙鱼、鲮鱼等严重患病，病鱼在几天内大批死亡，但无明显的外部症状，可作疑似鱼类鳃霉病对待，进一步诊断。4.1.2流行病学调查如发现疑似鱼鳃霉病，应进行鱼鳃霉病流行病学调查。见附录A。4.2解剖检查对经4.1检疫为疑似鱼鳃霉病的患病鱼进行抽样解剖检查，根据下述病变之一，可初步判断为鱼类鳃霉病：a.鱼鳃黏液多，鳃上有出血、淤血或缺血的斑点，呈现花鳃。b.病重时鱼高度贫血，整个鳃呈青灰色或苍白色。4.3显微镜检查取经4.1

3、、4.2检疫为疑似鱼类鳃霉病患病鱼鳃组织制作压片镜检，若发现鳃丝血管内有大量菌丝（通常其内有较多孢子）寄生，即可确诊为鱼鳃霉病。目前，国内发现的鳃霉有下述两种类型。4.3.1血鳃霉（B.sanquinis）寄生在草鱼、青鱼等鳃上的鳃霉，菌丝体比较粗直而少弯曲，通常是单枝延长生长，分枝很少，仅在鳃丝血管、软骨内生长，不向鳃外组织伸展；菌丝直径为8～36μm，孢子较大，直径为7.4～9.6μm，平均为8μm。54.3.2穿移鳃霉（B.demigrans）寄生在青鱼、鳙鱼、鲮、鲫鱼及黄颡鱼等鳃上的鳃霉，菌丝常弯曲成网状，较细而壁厚，分枝特别多，分枝沿着鳃丝血管或穿入软骨生长，

4、纵横交错，充满鳃丝和鳃小片。菌丝直径为6.6～21.6μm，孢子的直径为4.8～9.0μm，平均６.６μm。5鱼鳃霉菌的分离培养与形态观察见附录B。6非鱼鳃霉病的判定鱼群经检疫临床无异常，池塘养殖水质清洁；或发现疑似病例，经流行病学调查、解剖检查、显微镜检查等综合性判断，证明不是鱼鳃霉病，应作非鱼鳃霉病的群体对待。7无害化处理凡判定为鱼鳃霉病的病死鱼和运装器具，必须作无害化处理。7.1发病养殖水体用百万分之一的漂白粉消毒；禁止发病鱼群异地（塘）转移或上市；装鱼的器具用百万分之十的漂白粉浸泡１５min消毒；7.2病死鱼用锅炉焚烧，或加盖生石灰后深埋处理。7.3从境外引进的

5、鱼类，须暂养15天，确定无鳃霉菌寄生，方可引进饲养。5附录A（规范性附录）鱼鳃霉病的流行病学调查内容流行病学情况判断与诊断疫区划分根据水产养殖病害监测结果，确定产地是否疫区。如果产地是鱼鳃霉病疫区，患病鱼出现典型鳃霉病症状，鳃霉病的可能性大；如果是非疫区,鱼鳃霉病的可能性相对要小。流行地区我国南方省份。北方省份发生鱼鳃霉病的可能性相对要小。流行季节5～10月流行，尤以5～7月为发病高峰期1～4月和11～12月发生鱼鳃霉病的可能性小。活动及发病死亡情况病鱼不摄食，呼吸困难，游动缓慢，常在几天内大批死亡，但无明显的外部症状。病鱼不摄食，呼吸困难，游动缓慢，常在1～2天内大批

6、死亡，但体表无明显的出血、腐烂等症状，可初步判断为鱼鳃霉病。水质池塘水质恶化，含有大量的有机质时易发病。对池塘水质进行分析和观察，如果含有大量的有机质或恶化现象，可初步判断为鱼鳃霉病。如果池塘水质好，鱼类患鳃霉病的可能性小。鱼病防治消毒药物治疗效果不佳，灌注清水可减轻发病。患病鱼出现典型鳃霉病症状，多次使用消毒药物防治，病情不见好转，但池塘灌注清水后病情减轻，可初步判断为鱼鳃霉病。患病鱼种类草鱼、青鱼、鳙鱼、鲮鱼、鲢鱼、鲫鱼、银鲴、黄颡鱼等。草鱼、青鱼、鳙鱼、鲮鱼等易感，其中鲮鱼苗最为敏感，如这些鱼出现上述流行病学，可初步判断为鱼鳃霉病。5附录B（技术性附录）鱼鳃霉菌的

7、分离培养与形态观察B1鳃霉菌培养基（沙保劳氏琼脂培养基）沙保劳氏琼脂培养基配方如下：葡萄糖（或麦芽糖）40g蛋白胨10g琼脂35g去离子水1000ml在高压下溶化，过滤，15磅高压灭菌15min。B2鳃霉菌的分离与纯化用灭菌镊子取少许鳃丝，在培养皿中剪碎，均匀涂布于沙保劳氏琼脂培养基上。28℃培养3～7天，如生长出霉菌，则进一步分离纯化，备用。将分离纯化的霉菌，可采取下列方法进行培养和观察。a点植培养法用来观察霉菌菌落的培养特征。用接种针从斜面培养基上蘸极少量孢子，点植于平板培养基上适当的位置，例如成三角形的三点。然后将培养皿倒置，于28