正构烷烃降解菌的筛选及降解过程中的变化特征.pdf

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1、公开－分类号：密级：ＵＤ。——单位代码：■＾ｓＳｎｉ＇｜－―＇Ｗｍ＾；评腸獻ｉｐ＇＂？１；！？ｆｒｆｆ；龄城画Ｉ｜＊，．＾谓＾，ｓ；透吗誦誦ｉ瓦本ＩＥＥｆｆｒ；；；；；；；；：：１ｈ：：追如ｄ：麵＾！造诲１１慰粒：［Ｊ福§￡论文题正构炼炫降解菌的筛选及降解过璋中的変化特征目：＇＂１－学号．１３０７１００５００２ｔ，滕菲Ｊ＾：作者生物学学科名称：＾２０１６年０１月朋日沈阳大学硕士学位论

2、文论文题目：正构烷烃降解菌的筛选及降解过程中的变化特征作者：_________________________滕菲杨雪莲副教授沈阳大学指导教师：单位：协助指导教师：单位：单位：论文答辩日期：2016年01月08日学位授予单位：沈阳大学AMaster’sThesisinBicrobiologyScreeningofn-alkanes-degratingstrainsandthevariationcharacteristicsintheprocessofdegradationCandidate:TengFei

3、Supervisor：AssociatedProfessorYangXuelianCollegeofLifeScienceandBiologyEngineeringShenyangUniversityJanuary8,2016I独创性说明本人郑重声明：所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加标注和致谢的地方夕ｈ，论文中不包含其他人已经发表或撰写的研巧成果，也不包含为获得沈阳大学或其他教育机构的学位或证书所使用过的材料一。与我同工作的同志对

4、本研究所做的任何贡献均己在论文中做了明确的说明并表示了谢意。签名：日親巧ｌｌ）小參＿＿关于论文使用授权的说明本人完全了解沈阳大学有关保留、使用学位论文的规定，目Ｐ：学校有权保留送交论文的复印件，允许论文被查阅和借阅；学校可Ｗ公布论文的全部或部分内容。，可采用影印、缩印或其他复制手段保存论文（保密的论文在解密后此规定）－签名、》；為啤导师签名：日期：：｝〇ｌｌ（１摘要本研究利用辽河油田石油污染土壤筛选分离正十六烷降解菌，并对所分离菌株进行理化性质分析及分类鉴定，同时

5、监测其对正十六烷的代谢活性。利用模拟土壤的泥浆体系的正十六烷降解实验验证功能菌株对土壤污染环境的适应性。通过辽河油田油井周边石油污染土壤的微生物及电动修复实验，观测污染土壤修复过程中目标降解菌及微生物整体群落的生长及代谢活性变化特征，由此明确目标降解菌在有机污染土壤修复中的应用价值。研究的主要结论包括：（1）以辽河油田石油污染土壤为菌源，以正十六烷为唯一碳源，筛选分离出3株具有较强的正十六烷代谢功能的降解菌，分别记为T1、T2和T5，依据菌落的生长形态及16srDNA测序分析确定T1、T5为铜绿假单胞菌(

6、Pseudomonasaeruginosa)，T2为鞘氨醇菌（Spingopyxisterrae）。摇瓶培养的正交实验确定混合菌株在温度30℃，pH为7，C:N:P为100:10:2，盐度为1.5%的溶液体系中获得对正十六烷的最佳降解效果。（2）土壤模拟（泥浆）体系中的正十六烷降解实验表明，前述筛选所得正十六烷功能降解菌具有较好的正十六烷降解特性，微生物处理30天，正十六烷降解率达到29.3%。试验初期，T2(Spingopyxisterrae)细菌数量丰度较高，中期替换为T1与T5(Pseudomona

7、saeruginosa)的数量增多，各菌株数量的变化结合正十六烷降解率的变化特征，反映了多菌株组合应用所产生的共代谢优势。DGGE群落组成分析表明，各降解菌株在直流弱电场条件下均具有一定程度的-1电场耐受性，但适应速率存在差异。弱场强梯度（1.2V·cm）刺激功能降解菌的代谢活性，电动-微生物处理30天，正十六烷降解率达到65.10%，较微生物处理降解率提高35.80%，表现出电动与微生物的协同降解作用。（3）辽河油田石油污染场地土壤修复实验表明，功能降解菌对辽河油田石油组分中饱和烷烃的降解作用效果明显，

8、处理48天后降解率达到37.58%。直流弱电场的施用进一步提高正十六烷的降解能力，处理48天后降解率达到61.97%，较单独微生物处理降解率提高24.39%。土壤脱氢酶（DHA）活性分I析表明，微生物组（BIO）及电动-微生物（EK-BIO）组中DHA活性远高于电动（EK）组，反映了功能降解菌具有较好的污染物代谢活性。相关性分析表明，施加功能降解菌的土壤脱氢酶活性与烷烃的降解速率呈现显著的正相关性。EK-BIO处理中脱氢酶的活