2019届高考生物一轮复习第40讲微生物的培养与应用培优学案.doc

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1、第40讲微生物的培养与应用［考纲明细］1.微生物的分离和培养2.某种微生物数量的测定3.培养基对微生物的选择作用4.利用微生物发酵來生产特定的产物以及微生物在其他方面的应用板块一知识•自主梳理一、微生物的实验室培养1・培养基(1)概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质。(2)营养成分：水、蜒、氮遞、无机盐四类营养物质，另外还需要满足微生物生长对世、特殊营养物质以及氧气的要求。(3)培养基的分类①按物理状态分类培养基种类特点用途液体培养基不加凝固剂工业生产半固体培养基加凝固剂(如琼

2、脂)观察微生物的运动、分类鉴定固体培养基V加凝固剂(如琼脂)微生物分离、鉴定，活菌计数，菌种保藏②按功能分类种类制备方法原理用途举例依据某些微选择培养基培养基中加入某些化学物质生物对某些物质的特殊需求或抗性从众多微鉴别培养基而设计生物中分墨所需的微生物加入青霉龛分离得到酵母菌和霉菌培养基中加入某种指示剂或化学药品产生特定的颜色或其他变化鉴别不同种类的微生物用伊红一美蓝培养基鉴别大肠杆菌2.无菌技术条件结果常用方法应用范围消毒较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部的部分对人体有害的微生物煮沸消毒法日常用品巴

3、氏消毒法不耐高温的液体化学药剂消毒法用酒精擦拭双手，用氯气消毒水源条件结果常用方法应用范围灼烧灭菌法接种工具强烈的理化因素杀死物体内外所有的微干热灭菌法生物，包括芽抱和抱子高压蒸汽灭菌法玻璃器皿、金属工具培养基及容器的灭菌3.纯化大肠杆菌及菌种的保藏(1)制备牛肉膏蛋白腺固体培养基%1步骤：计算一称量一溶化一灭菌一倒平板。%1倒平板的过程a.在火焰旁右手拿锥形瓶，左手拔出棉塞。b.右手拿锥形瓶，使锥形瓶的瓶口迅速通过火焰。c.左手将培养皿打开一条缝隙，右手将培养基倒入培养皿，左手立刻盖上培养皿的皿盖。d.待平

4、板冷却凝固后，将平板倒过来放置,使皿盖在下、1111底在上。(2)纯化大肠杆菌B%1平板划线法(图中A)：通过接种环在琼脂固体培养基表而连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。%1稀释涂布平板法(图中B)：将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表血,进行培养。当稀释倍数足够高时，即可获得单个细菌形成的菌落。(3)菌种的保藏%1对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏法。%1对于需要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏法。二、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数1.筛选菌

5、株(1)自然界中目的菌株筛选的依据：根据它对牛存环境的要求,到相应的环境中去寻找。(2)实验室中微生物筛选的原理：人为提供有利于冃的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时抑制或阻止其他微生物生长。(3)选择培养基：允许特定种类的微生物生长，同时抑制和阻止其他种类微生物生长的培养基。1.统计菌落数目(1)常用方法：稀释涂布平板法。(2)统计依据当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个适菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。(3)活菌计算方法:每克样

6、品中的菌株数=(C^V)XM［其中C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL),M代表稀释倍数］。(4)其他方法：还可利用显微镜直接计数。2.设置对照设置对照的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响,提高实验结果的翌信度,例如为了排除培养基被杂菌污染的可能性，需以未接种细菌的培养基培养作为空白对4.实验设计项目内容实验原理%1能合成蜃的细菌才能分解尿素%1配制以壘案为唯一氮源的培养基，能够生长的细菌就是能分解尿素的细菌实验流程土壤取样(富含有机质)f配制土壤溶液

7、和制备培养基f样品梯度稀释f涂布平板与培养f菌落观察%1方法：在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂培养分解尿素的细菌鉴定%1原理：细菌分解尿素的反应中，细菌合成的脉酶将尿素分解成了氫，其会使培养基的碱性增强，pH升高三、分解纤维素的微生物的分离1.纤维索酶(1)纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括G酶、G酶和葡萄糖昔酶三种组分。C1酶葡萄糖昔酶(2)作用：纤维素纤维二糖壬竺丄也葡萄糖。Cx酶2.纤维素分解菌的筛选(1)方法：刚果红染色法。纤维素分解菌刚果红11纤维素酶-,⑵原理宙维素J—红色复合物►红

8、色消失，出现透明圈。(3)培养基：以纤维素为唯一碳源的选择培养基。(4)实验流程土壤取样:富含纤维素的环境选择培养:用选择培养基培养9以增加纤维素分解菌的浓度梯度稀释：制备系列稀释液涂布平板:将样品涂布到鉴別纤维素分解菌的培养基上挑选产生透明圈的菌落♦深入思考1.配制培养基时平板冷凝后，为什么要将平板倒置？提示平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，