猪伪狂犬病的净化条件.pdf

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1、■　主题策划猪伪狂犬病的净化条件●伪狂犬病基因缺失疫苗：1.自然弱毒疫苗(缺失部分gE基因)2.基因工程缺失疫苗(双缺失：TK、gE)●鉴别诊断技术：gE-ELISA区分疫苗免疫动物和野毒感染动物。嘉宾：郭万柱（四川农业大学动物生物技术中心主任）苗免疫接种是防制和控制乃至根自然弱毒疫苗是通过非猪源细胞或同时又保持其较强的免疫原性，而其中缺疫除伪狂犬病的根本措施。早期的鸡胚的反复传代，或在某些诱(突)变剂的失的基因主要是伪狂犬病毒的毒力基因猪伪狂犬疫苗大多为弱毒苗和灭活苗，弱存在下，用高于通常的培养温度在细胞培胸苷激酶(TK)，蛋白激酶(PK)，核苷还原毒苗和灭活苗在预防控制伪狂犬病方面

2、养物上反复继代获得，其基因组的内部存酶(RR)和脱氧尿苷三磷酸激酶(dUTPase)虽然能起一定的作用，但是弱毒苗不能防在着多处的点突变以及一些基因的缺失，基因以及一些具有免疫原性的糖蛋白gG、止病毒在动物体内的复制和排出，即存在它是一种天然的基因缺失疫苗。在20世纪gE、gC、gD基因等。目前据此已成功构建了着毒力返强和散毒的危险；而灭活苗虽然60年代后，许多国家用不同的方法培育了以缺失主要毒力基因-TK基因为代表的安全性较好，但其免疫效率却较低，免疫不少伪狂犬病弱毒疫苗株，其中应用较为单基因缺失疫苗、双基因缺失和多基因缺时用量较大、有时还可能导致注射部位肿广泛的主要是匈牙利的Bar

3、tha株、罗马尼失疫苗。胀，出现过敏反应。因此，随着对伪狂犬病亚的Bucharest株和BUK株等。3.1伪狂犬病毒TK-单基因缺失疫苗病毒分子生物学研究的不断深入，基因工Bartha弱毒株疫苗基因组中主要毒力伪狂犬病毒的TK基因是主要的毒力程疫苗的研制成为新的热点，先后有多株基因TK没有缺失，因此与其它毒株相比，基因，对其进行缺失便成为TK单基因缺失基因缺失疫苗问世，使最终根除伪狂犬病还存在着一定的毒力。疫苗。这种TK缺失的疫苗与以前在有致突成为可能。在美国和欧盟等国家已明确规Bucharest株用鸡胚培养后制成的冻变剂存在下在细胞上筛选到的弱毒疫苗定仅能使用伪狂犬病gE-基因缺失疫

4、苗。干苗，仅适用于9日龄以上的仔猪和妊娠2有一个最显著的特点，就是不存在毒力返现将几种伪狂犬病疫苗的制备与使用特月龄的母猪，因其US区存在gE基因的缺强，因而更加安全。点介绍如下。失，与强毒株相比其毒力已大大减弱，对该毒株于1986年被美国批准为上市妊娠母猪和仔猪都有一定的免疫作用。的第一个基因工程疫苗。1灭活疫苗值得注意的是自然弱毒疫苗虽然有在国内四川农业大学生物技术中心，将分离的伪狂犬病病毒强毒用BHK-着较强的免疫效果，但因其主要毒力基因率先系统地对PRV的分子生物学进行了研21细胞或IBRS-2传代细胞培养，当病毒的(TK)没有缺失，未经充分致弱或过度致弱究，并在国内首次构建了

5、PRVFa株TK基因增殖滴度达到要求时收获病毒，灭活后加的疫苗株不仅不能诱导满意的免疫保护缺失疫苗株，并对其免疫原性和保护力等入油乳剂而制成灭活苗。灭活疫苗安全性反应，而且其毒力有很大返强的可能性，进行了研究。好，不存在潜伏感染的问题，因而在各养还有可能引起疾病及免疫抑制；弱毒疫苗3.2伪狂犬病毒双基因缺失疫苗猪场，尤其是种猪场以及未污染的养猪场还可建立潜伏感染，并存在散毒的可能，伪狂犬病毒双基因缺失疫苗是在TK得到广泛使用。灭活苗虽然安全，但由于在部分接种猪血清中虽然存在中和抗体，缺失疫苗的基础上发展起来的，它比仅有抗原成分含量不高和主要抗原决定簇丢但其排毒期却可持续数年。因此许多国

6、家TK单基因缺失的疫苗更优越。由于TK基因失，且由于不能给免疫系统提供内源性蛋已禁止使用弱毒疫苗，取而代之的则是以属于酶蛋白基因，在体内不能产生其相应白抗原，而不能诱生细胞毒T细胞反应缺失TK基因的基因缺失疫苗。的抗体，因此原来的TK单基因缺失株只能（CTL），少量接种往往不能诱生足够的免采用核酸杂交，限制性内切酶指纹图谱，疫反应，因而具有免疫效力不佳、接种剂3基因缺失疫苗空斑放射自显影同野毒株相区别。若要用量大的缺点，常常需要多次重复接种，给伪狂犬病毒基因缺失疫苗的研制始血清学方法区别开免疫接种猪与自然感防疫工作带来麻烦。于八十年代初期，即是利用基因工程技术染猪，就必须缺失相应的糖蛋

7、白基因。据在PRV基因组中插入或缺失一段序列致使此，伪狂犬病毒双基因缺失疫苗株除了在2自然弱毒疫苗PRV的某些基因不能表达，从而致弱PRV，TK基因引入了1个缺失外，在编码非必需202005.04主题策划　■糖蛋白的基因内引入了1个新的缺失，或口的同类疫苗，免疫效果相近，但在抗潜染病将成为现实。但值得注意的是，伪狂再插入1个报告基因，这样得到的突变株伏感染方面效果更独特；成本大大低于进犬病毒属于潜伏感染力很高的病毒，因此就不能产生被缺失的糖蛋白