Al2O3纳米颗粒对梨形四膜虫细胞毒性机理研究【优秀毕业设计】

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1、2011届宁波大学本科毕业论文——Al2O3纳米颗粒对梨形四膜虫细胞毒性机理研究本科毕业设计(20__届)Al2O3纳米颗粒对梨形四膜虫细胞毒性机理研究2011届宁波大学本科毕业论文——Al2O3纳米颗粒对梨形四膜虫细胞毒性机理研究目录摘要1ABSTRACT11 引言22 实验材料和方法32.1 实验样品、试剂及仪器32.1.1 样品32.1.2 试剂及材料32.1.3 仪器及设备42.2 实验方法42.2.1 纳米颗粒悬液的制备及梨形四膜虫染毒的处理42.2.2 酶活性的测定52.2.3 总RNA的提取52

2、.2.4 OneStepRT-PCR反应52.3 数据处理73 结果与讨论73.1 Al2O3纳米颗粒对梨形四膜虫生长繁殖的影响73.1.1 Al2O3纳米颗粒对细胞生长的影响73.1.2 Al2O3纳米颗粒对梨形四膜虫传代代数的影响83.1.3 Al2O3纳米颗粒对梨形四膜虫传代时间的影响83.2 Al2O3纳米颗粒对梨形四膜虫酶活性的影响93.2.1 Al2O3纳米颗粒对梨形四膜虫乙酰胆碱酯酶(TChE)活性的影响93.2.2 Al2O3纳米颗粒对梨形四膜虫琥珀酸脱氢酶(SDH)活性的影响93.3 Al2

3、O3纳米颗粒对基因表达的影响103.3.1 18SrRNA基因的表达水平103.3.2 Al2O3纳米颗粒对MDR1表达的影响113.3.2 Al2O3纳米颗粒对HSP70表达的影响124 讨论134.1 Al2O3纳米颗粒对梨形四膜虫生长繁殖的影响134.2 Al2O3纳米颗粒对梨形四膜虫酶活性的影响134.3 Al2O3纳米颗粒对HSP70和MDR1基因表达的影响135 结论14致谢14参考文献15摘要:本实验采用模式生物梨形四膜虫为研究对象,探讨Al2O3纳米颗粒对生物细胞的毒性。分别研究了纳米Al2O

4、3对梨形四膜虫生长繁殖、乙酰胆碱酯酶(Truecholineesterase,TChE)活性、琥珀酸脱氢酶(Succinatedehydrogenase,SDH)活性以及对热激蛋白70(HSP70)和多药耐药(MDR1)基因的表达活性的影响。结果表明:(1)Al2O3纳米颗粒对梨形四膜虫的生长繁殖具有显著的抑制作用,并延长了传代时间,减少了繁殖代数;(2)Al2O3纳米颗粒对梨形四膜虫TChE的活力表现为中低浓度(10mg·L-1与100mg·L-1)激活,高浓度(500mg·L-1)抑制的趋势,而对SDH的

5、活力具有抑制作用,浓度越高作用越明显,尤其在500mg·L-1浓度下抑制作用极显著(p<0.01);(3)Al2O3纳米颗粒对梨形四膜虫HSP70及MDR1基因表达均有显著作用,HSP70表现为低浓度抑制、高浓度诱导,而MDR1表现为低浓度诱导、高浓度抑制。通过本实验结果可知,Al2O3纳米颗粒对梨形四膜虫是具有毒性的,但是其机制还需要更进一步的研究探索以及验证。关键词:梨形四膜虫;Al2O3纳米颗粒;细胞毒性机理Abstract:Amodelorganism,Tetrahymenapyriformis,wa

6、susedastheobjectinthisresearchtostudythetoxcityofnanomaterialstocells.TheimpactofAl2O3nanoparticlestothegrowthandreproduction,TchEactivity,SDHactivity,heatshockprotein70(HSP70)andmultidrugresistance(MDR1)geneexpressionactivityofTetrahymenapyriformiswerestud

7、ied.Theresultsshowedthat:(1)Al2O3nanoparticlesinhibitedthegrowthandreproduction,extendedthegenerationtimeandreducedthegenerationnumberofTetrahymenapyriformisapparently;(2)TheaffectiontendedtobethatlowconcentrationofAl2O3nanoparticlescouldactivateTChEactivit

8、y,andhighconcentrationinhibitedthetrend.Meanwhile,Al2O3nanoparticlesinhibitedSDHactivity.Thehighertheconcentrationthemoreobviouseffects,especiallyinthe500mg·L-1concentrationinhibitedsignificantly(p<0.0

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