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时间:2019-11-28
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1、【微生物】存在于自然界中一大群形体微小、结构简单、肉眼看不见,必须借助光学显微镜或电镜放大数百倍至数万倍才能观察到微小生物。【医学微生物学】研究与医学冇关病原微生物学的生物学特性、致病性与免疫性及特界性诊断与防治措施的一门学科,冃的是控制和消灭感染性疾病和与Z冇关的免疫性损你从而达到保障和提高人类健康水平。【正常菌群】定居在人类皮狀及粘膜上的各类微生物,在正常悄况下非但无害,而具冇拮抗外來病原微牛物和捉供营养物质的作用。【条件致病微生物】机体免疫力卜降、寄居部位改变和微卞态失调。【病原微生物】少数引起人与动植物致病的微牛物,影响人类健康,是医学微牛物研究主要对象。【临床微生物学概念地
2、位任务】1)属医学微生物学范畴,与临床医学密切结合,因侧重研究感染性疾病快速、准确诊断病原体策略与方法,为临床诊断提供依据。2)从事检出微生物和研究微生物与宿主相互作用的一门医学应川学科。3)任务①研究感染性疾病病原体特征②为临床提供快速准确病原学诊断③指导临床合理使川抗生素④对医院感染进行监控【临床微生物学进展与展望】1)感染性疾病现状决定了临床微生物学的深入发展①易感人群不断增加②新病原体不断出现和己控制与消灭的病原体死灰复燃③感染性因了在非感染性疾病中作川越來越明显2)开发快速诊断方法适应临床需要①对活菌检验冃标尽可能集中在快速诊断方面②非培养快速检验法3)侧重基因型方法进行微
3、牛物鉴定与分型①过去以表型为主转向现在结合基因型进行综合鉴定②病原微牛物基因纽计划先行4)计算机技术发展推动临床微牛物学进步5)展望:临床试验分筛查试验、鉴别试验和确诊性试齡,使临床微生物学检验逐步进入现代化、自动化、微量化、快速化和商品化。【感染性疾病实验诊断要求>①明确诊断对彖和要求②对诊断试验选择③选择常川诊断流程【临床标本的采集与处理】①标本采集:早期、无菌、根据检验冃的菌特性采用不同方法、采集适量标木、安全②标木处理:根据标木中细菌特点及时处理、送检和保存标本。【细菌形态学检查意义>①快速了解标本中冇无细菌及大致菌量②助于对病原菌初步认识和分类③进一步鉴定提供依据④对一些形
4、态特殊细菌初步诊断,早期诊治冇一定参考价值。【染料分类】①碱性:细菌,碱性复红、结晶紫、美兰②酸性:细胞浆染色,伊红、刚果红③复合(中性):瑞氏(伊红美兰)、姬姆萨(伊红天青);特殊染色④荧光;异硫氢酸荧光素、罗丹明,免疫学技术。【细菌染色标本的制作程序】涂片-干燥-固定【培养基】(culturemedium)人工方法配制,专供微生物生长繁殖使用混合营养物制品。【培养基成分】营养物质、凝固物质、抑菌剂和指示剂:【培养基分类】①物理性状:液体、半固体、固体②用途:棊础、营养、选择、鉴别、特殊。【细菌接种与分离技术】①平板划线分离:连续划线、分区划线②斜面接种③液体接种④半固体接种⑤倾注
5、平板⑥涂布⑦定量接种环。【细菌培养方法】①需氧培养②CO?培养:CO?培养箱、烛缸法、化学法③厌氧培养法:厌氧罐法、气袋法和厌氧手套箱法④微需氧培养:混合气体培养法、烛缸法、气袋法。【细菌生长情况及意义】①平板上:菌落,分离纯培养②斜面上:菌苔或菌落,增菌或保存菌种③半固体屮:迁徙生长(有动力)。观察动力和保种④液体屮:表而生长,均匀混浊生长和沉淀生长。增菌和鉴别细菌。【细菌毒素检测】1)内毒素检测①内毒素致热作用:诊断G菌感染;测注射用液和生物制品冇无内毒素污染。②蛍试验:判明病原菌的类型,利于合理用药和早期治疗。2)外毒素检测①体内毒力试验②体外毒力试验:Elek平板毒力试验、E
6、LTSA法【细菌生化反应鉴定】1)碳水化合物代谢试验①糖(醇、营)类发酵试验:授主要最棊本试验,肠杆菌科鉴定。②0/F试验:IIL培养棊。测代谢类型,鉴别细菌。肠杆菌科细菌为发酵型,衙萄球菌(发酵型)和微球菌(氧化型)。③0-半乳糖(ONPG)酶试验:迟缓发酵乳糖菌株快速鉴定(宋内志贺菌+)④七叶卄水解试验:D群链球菌(+)其它链球菌(-)鉴别。革兰阴性菌(-)和厌氧菌(+)o⑤甲基红试验(methylredtest):人肠埃希菌(+)和产气肠杆菌(-),肠杆菌科屮沙门菌属、志贺菌属、枸椽酸杆菌属、变形杆菌属均为阳性,肠杆菌屈和哈夫尼亚属均为阴性。⑥V-P试验(Voges-Prosk
7、auertest)2)蛋白质和氨基酸代谢试验①明胶液化试验:肠杆菌科鉴别。丿犬氧菌和假单胞菌+。②呵味试验(IndoleTest):肠杆菌科鉴别,大肠埃希菌(+),产气肠杆菌()。③硫化氢试验:肠杆菌科属和种的鉴别。④尿素分解试验:变形杆菌属的鉴定,雷氏普罗威登菌和莫根菌+。⑤苯丙皱酸脱竣酶试验:肠杆菌科鉴定。⑥氨基酸脱竣酶试验:肠杆菌科鉴定。3)碳源和氮源利丿IJ试验①枸椽酸盐利川试验(citratetest):肠杆菌科属间鉴定。沙门菌属、克雷伯菌属卜,
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