山东省西瓜细菌性果斑病的病原菌鉴定

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1、山东省西瓜细菌性果斑病的病原菌鉴定山东省西瓜细菌性果斑病的病原菌鉴定摘耍：近年来，在山东省临沐县、昌乐县、章丘县等地西瓜育苗基地的西瓜苗上发现了一种新病害一一西瓜细菌性果斑病。从病果和病叶片上分离到15个细菌菌株，选取8个菌株进行致病性测定，结果表明，该8个菌株均能侵染西瓜，发病症状和自然发病症状完全一致；从接种发病的病果上可重新分离到相同的细菌。对该8个菌株菌体形态、染色反应、培养性状及其生理生化特性等项目进行观察测定，确认供试菌株为燕麦食酸菌西瓜亚种(Acidovoraxavenaesubsp.

2、citrulliWillemsetal.,1992)。关键词：西瓜；细菌性果斑病；病原鉴定中图分类号：S432.4+2文献标识号：A文章编号：1001-4942(2014)03-0083-03AbstractInrecentyears,watermelonhadbeenattackedbyanewbacterialdiseasecalledbacterialfruitblotch(BFB)insomeplantingareasofShandongProvince,includingLinshu,Ch

3、angleandZhangqiu.Fifteenstrainswereisolatedfromdiseasedfruitsandleavesofwatermelon.Theinoculationtestswereconductedwith8strains,whichproducedthesamesymptomsasnaturallyinfecteclplants.Andthesamestrainswereisolatedfrominoculatedwatermelon・Basedonthemycel

4、ialmorphology,stainingreaction,culturalcharacteristicsandaseriesofphysiologicalandbiochemicalproperties,thepathogenswereidentifiedasAcidovoraxavenaesubsp.citrulliWillemsetal.,1992.KeywordsWatermelon；Bacterialfruitblotch；Pathogenidentification自2009年始，山东

5、省临沐县、昌乐县、章丘市等西瓜育苗基地西瓜普遍发纶一种细菌性病害，发病程度轻重不等，如临沐县西瓜育苗基地所育26万株西瓜苗全部封埋销毁，造成极大损失o2010-2013年笔者在章丘西瓜育苗基地抽检的西瓜苗上同样分离到该种细菌，根据病害症状推测是Acidovoraxavenaesubsp.citrulliWillems,Goor,Thieiemans,G订lis,Kersters&Ley。因此，有必要对该细菌性病害的病原菌进行系统鉴定来加以确认，为该病害的防治提供理论依据。1材料与方法1.1试验材料1

6、.1.1供试材料2009年从山东省临沐县大棚采集的双星、京欣、极品京欣西瓜病果。对照菌株为燕麦食酸菌西瓜亚种(Acidovoraxavenaesubsp・citrulliWillemsetal.,1992),由山东农业大学植保学院植物病理学系提供。1.1.2培养基NA培养基为分离培养基，KB培养基用于观察荧光反应⑶。1.2试验方法1.2.1病原菌分离、纯化取病组织，用灭菌剖解刀切取病健交界处组织，75%酒精消毒2s,移至0.1%升汞液消毒1〜2min,经灭菌水冲洗后置于小瓷皿中研磨，加无菌水浸20m

7、in,然后用移菌环蘸取组织液在NA培养基划线，28°C培养48h,长出单菌落后在NA培养基再划线，使细菌纯化。纯化后的各菌株编号保存冰箱中备用。1.2.2马铃薯软腐将马铃薯洗净用75%酒精表面消毒，切成5mm厚的薯片，在无菌操作下放在无菌培养皿中。将在NA培养基上培养24h的供试菌株用移菌环接在块茎上，28°C条件下培养48h后，观察马铃薯软腐情况。1.2.3病原菌的致病测定8个菌株与对照菌株在28°C条件下培养24h,配成3X108个/ml菌悬液，喷雾和刺伤接种于健康西瓜幼苗4〜6叶和果实，同时以

8、接清水为对照(CK)O在28°C下保湿48h,之后白天光照，晚上保湿，每天注意观察发病情况。1.2.4细菌学性状细菌的格兰氏染色、形态特征、培养性状、生理生化测定等，主要参照《植病研究方法》［3］、《一般细菌常用鉴定方法》［7］、《常见细菌系统鉴定手册》［2］等方法进行。2结果与分析2.1病害症状西瓜果斑病田间可危害西瓜幼苗子叶、定植后的西瓜叶片（子叶及真叶）和果实（幼果和成熟果）。定植前幼苗发病，叶尖或叶缘出现水渍状小斑点，逐渐向子叶基部扩展为条形或不规则形暗绿色水