环境工程微生物实验指导

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1、环境工程微生物实验指导实验一微生物形态观察一、实验目的1、认识细菌、放线菌、酵母菌和霉菌的基本形态特征。2、巩固显微镜的使用方法。3、学习微生物画图方法。二、实验原理1、细菌的基本形态细菌是单细胞的微生物，能够独立进行生活，它的种类繁多，但基本形状有四种：球状、杆状、螺旋状和丝状，分别称为：球菌、杆菌、螺旋菌和丝状菌。（1）球菌：细胞呈球形或椭圆形，根据它们相互联结的形式可以分为单球菌、双球菌、链球菌、四联球菌、八叠球菌、葡萄球菌等。如金黄色葡萄球菌。球菌大小以直径表示，一般为0.5-1um0（2）杆菌：细胞呈杆

2、状或圆柱形，大小以宽度X长度表示，各种杆菌的长度与直径比例差异很大，有的粗短，有的细长。如大肠杆菌就比较细而短、枯草杆菌粗而长。杆菌是细菌中种类最多的，工农业生产中所用的细菌大多是杆菌。（3）螺旋菌：细胞呈弯曲杆状，螺旋菌细胞壁坚韧较硬，常以单细胞分散存在。大小一般为（0.3~1・0）umX（1.0^50）Um,根据其弯曲情况可分为弧菌、螺菌、螺旋体。弧菌只有一弯曲，而螺菌有2~6个弯曲。其大小为0.3-1X1-50urm若菌体弯曲螺旋圈数较多者，无坚韧的细胞壁,比较柔软，能口由运动，通称为螺旋体。2、细菌的特殊

3、构造细菌细胞的特殊构造有荚膜、鞭毛、菌毛、芽砲等。（1）荚膜：是有些细菌生活在一定营养条件下，向细胞壁表面分泌的一种粘液状、胶质状的物质。用显微镜观察，中心部位是细菌菌体，在暗色背景下荚膜呈透明状环绕菌体。（2）鞭毛和菌毛：鞭毛是某些微生物细胞表烦着生的一根或数根细长、波曲、毛发状的丝状物。直径为0.1-0.2um,它是细菌的运动器官。在光学显微镜下不能直接观察到。经过特殊的鞭毛染色后，在光学显微镜下可以看到鞭毛。（3）芽泡：是某些细菌在其生长的一定阶段，在细胞内形成一个圆形、椭圆形、壁厚、含水量极低、抗逆性极强

4、的休眠体。芽胞形成的位置、形状、大小可因菌种而异。女口：枯草芽抱杆菌的芽胞位于菌体中间，呈卵圆形比菌体小；破伤风梭菌芽胞位于菌体一端呈圆形，比菌体大，使菌呈棒锤形。因此，能否形成芽范以及芽抱的形状、芽抱在芽抱囊中的位置、大小等特征是细菌鉴定的依据之一。3、真菌的特征结构菌丝：是真菌营养体的基本单位。菌丝是一种管状的细丝，用显微镜观察，像一个透明的管，直径一般3-10um,与酵母菌相似，比细菌和放线菌的细胞直径约粗几倍到几十倍。根据菌丝中是否存在隔膜，可以把真菌菌丝分成两种类型：有隔菌丝和无隔菌丝。无隔菌丝中无隔膜

5、，整个菌丝体就是一个细胞，其中含有多个细胞核，是低等真菌具有的菌丝类型。有隔菌丝有隔膜，菌丝体由多个细胞组成，每个细胞有1个或多个细胞核，是高等真菌具有的菌丝类型。4、放线菌的特征结构放线菌是主耍呈丝状生长、以抱子进行繁殖、革兰氏染色阳性的一类原核微牛物。放线菌的形态比细菌复杂些，但仍属于单细胞微牛物。在显微镜下，放线菌呈分枝丝状，我们把这些细丝一样的结构叫做菌丝，菌丝直径与细菌相似，小于lumo菌丝细胞的结构与细菌基本相同。根据菌丝形态和功能的不同，放线菌菌丝可分为基内菌丝、气生菌丝和抱子丝三种。链霉菌属是放线

6、菌中种类最多、分布最广、形态特征最典型的类群，如灰色链霉菌。三、实验用品1、器材（1）普通光学显微镜（2）细菌装片：金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽抱杆菌、破伤风梭菌（3）真菌装片：青霉、黑曲霉、产黄青霉（4）酵母菌装片：出芽酵母、酿酒酵母（5）放线菌装片：灰色链霉菌2、试剂和材料（1）擦镜纸，（2）香波油，（3）二甲苯。四、实验方法与步骤1、细菌基本形态观察（1）显微镜下观察细菌三型装片，金黄色葡萄球菌装片，注意菌体间的关系。（2）显微镜下观察枯草芽抱杆菌、大肠杆菌的装片。（3）显微镜下观察螺旋菌装片，注意菌体

7、的螺旋。2、细菌特殊构造观察（1）油镜下观察固氮菌装片：注意观察荚膜的位置、形态以及与菌体的关系；注意荚膜与菌体的染色差异，染色后，菌体呈黑色，荚膜无色。（2）油镜下观察大肠杆菌装片:注意鞭毛的染色位置数目形状和人小o（3）油镜下观察枯草芽抱杆菌及破伤风梭菌装片；注意芽抱和菌体染色的差别,芽砲的形态大小和位置。3、真菌的特征结构观察观察青霉、黑曲霉装片，注意观察它们的分牛砲子形状，组成等。4、酵母菌的形态观察观察出芽酵母形状和出芽方式。5、放线菌的形态观察五、思考题1、画一圆圈表示视野，选取一些有代表性的微生物画

8、图，注意特殊构造形状和排列方式。颜色深的可用点的密度来表示，不可涂抹，标注所观察的菌种名称，放大倍数和特殊结构。2、细菌、放线菌、酵母菌和霉菌的细胞大小细胞形态有何区别？实验二微生物染色一、实验目的1、学习微生物涂片、染色的基本技术，掌握细菌的单染色方法及无菌操作技术。2、巩固显微镜的使用方法。3、了解革兰氏染色的原理，学习并掌握革兰氏染色的方法。二、实验原理虽然各种类型