脂肪干细胞在皮下软组织充填中探究进展

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1、脂肪干细胞在皮下软组织充填中探究进展洪晓娅综述,徐靖宏审校-摘要]脂肪干细胞(Adipose-DerivedStemCellsADSCs)具有一般干细胞的特点,即多向分化潜能和稳定的体外多代增殖能力,其免疫相容性好,来源丰富,易于获得,可反复取材,无伦理学问题,作为组织工程的种子细胞有着非常重要的实际研究和应用价值。本文着重对脂肪干细胞在生物学特性、体外成脂诱导分化,以及与之相配的生物学载体支架方面的最新进展进行阐述。[关键词]脂肪干细胞;诱导分化;载体支架[中图分类号]R622[文献标识码]A[文章编号]1008-6455(2008)10-1540-03Applicationofa

2、diposetissue-derivedstemcellsinsubcutaneoussofttissuefillingHONGXiao-ya,XUJing-hong(DepartmentofPlasticSurgery,theFirstAffiliatedHospital,CollegeofMedicine,ZhejiangUniversity,Hangzhou310003,Zhejiang,China)Abstract:Adiposetissueisanabundant,accessible,andreplenishablesourceofaduItstemcells.Adipo

3、se-derivedstemcells(ADSCs)canbeisolatedfromliposuctionwastetissuebycollagenasedigestionanddifferentialcentrifugation.Theyaremultipotent,differentiatingalongtheadipocyte,chondrocyte,myocyte,neuronal,andosteoblastlineages・ADSCscellshavepotentialapplicationsforthefillingofsubcutaneoussofttissue・Ad

4、ditionalpre-clinicalsafetyandefficacystudieswillbeneededbeforethepromiseofthesecellscanbefullyrealized・Keywords:ADSCs;differentiate;support皮下软组织充填一直是整形外科常见的治疗手段,对于体表的皮下软组织欠丰满、凹陷、萎缩畸形目前常采用自体游离脂肪或各种人工材料进行充填。人工材料因存在排异、创伤大及安全性等问题难以满足临床需要,而自体游离脂肪的移植成活率仅为40%〜50%,这使得其临床应用受到很大限制。脂肪移植物被吸收的原因之一是成熟脂肪细胞对缺氧

5、、损伤的耐受力低,且不能增殖更新[1]。而脂肪干细胞(ADSCs)则具有强大的增殖分化潜力,对缺氧耐受力更强,且自体干细胞用于移植可避免排异反应,更加安全。2001年Zuk[2]等从脂肪细胞抽吸物中成功分离培养出具有骨、软骨、脂肪、肌肉等多向分化潜能的细胞,cronthos[3]等于同年也证实脂肪来源细胞中的确存在具有间充质干细胞特性的细胞。2002年Zuk[4]等又证实了人的脂肪组织是多能干细胞的一个来源,具有分化为所有中胚层起源细胞的能力,还可分化为部分内外胚层起源的细胞,自此脂肪干细胞(ASCs)以其来源丰富、易于获得、能在体外多代稳定增殖、具有多向分化潜能、免疫相容性好、取材

6、对患者损伤小等优点而日益成为研究热点。现将其成脂诱导及诱导后复合生物支架材料用于软组织填充修复研究现状综述如下。1取材、提取、体外扩增取材部位最好能配合患者身体塑形的需要,做到一举两得。平均每300ml脂肪组织可获得2X108〜6X108个干细胞,从不同个体的脂肪抽吸组织中提取的平均脂肪干细胞数目有所不同,但从同一个体不同部位的脂肪中所获得的干细胞数目却比较近似。患者年龄越大,成脂分化率越低,同一患者不同部位来源的脂肪抽吸组织中的脂肪干细胞在成脂诱导分化能力上存在差异[5]。目前常采用电动负压吸脂术或注射器手工抽脂术获取无菌脂肪组织,一般认为注射器手工抽取的脂肪损伤较小。利用分层纯化

7、法将脂肪混合物静置片刻,分别去除上下两层。将获得的脂肪用PBS缓冲液洗4次,以去除红细胞和细胞碎片。清洗后用适量的0.075%胶原酶I在振动器37匸下消化lh。胶原酶I活性用等量DMEM(含10%的胎牛血清)中和,后离心1200转(lOmin),细胞即被悬浮在DMEM中,用100目筛网过滤,离心lOmin以沉淀细胞,重新悬浮细胞加至培养瓶,在37°C.CO2孵箱中培养24h,更换培养液将未贴壁细胞和残渣被除掉。后每周换液2次,达到对数生长期后,用0.25胰

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