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1、沈阳药科大学成人高等教育毕业论文(急性子多糖的含量测定)学生姓名:李惊涛专业形式层次:中药专科学号(或准考证号):100660140指导教师:孙颖实习单位:成大方圆完成时间:2012年2月通讯地址:沈阳市长青街邮政编码:110011联系电话(手机):13940315411摘要21材料与方法32结果与讨论33小结与讨论6参考文献6致谢6急性子多糖的含量测定专题学生:李惊涛指导教师:孙颖摘要摘要:目的:利用响应面分析法对急性子多糖的提取工艺进行优化。方法:以提取温度、提取吋间、料液比为自变量,多糖得率为因变量,通过对自变量各水平的多
2、元线性冋归及二项式拟合,用星点设计-响应面法选取最佳工艺,并进行预测分析。结果:多糖得率最大值为3.73%,最优工艺条件为:料液比为1:25.8,提取温度为92.0°C,浸提吋间为120.5min,浸提2次;提取实际值与预测值偏差为-2.9%o结论:方法简便合理,稳定,可预测性较优。关键词:急性子;多糖;星点设计;响应面法急性子为凤仙花科植物凤仙花ImpatiensbalsaminaL.的干燥成熟种子,始载于《救荒本草》,为我国传统•药物之一;性温、味微苦,归肝、脾经;具有破血软坚、消积的功效,用于癥頫痞块、经闭、噎膈⑴。本品除
3、含脂肪油、挥发油外,述含多糖、蛋白质、皂营、黄酮类等化合物,木实验采用响应面分析法对急性子多糖的提取工艺进行了研究,该实验方法应用于中药材提取工艺研究报道较少,国内常用均匀设计和止交设计进行优化,但这两种方法实验精度不够,建立的数学模型预测性较差⑺,其回归结果多为线性模型,而星点设计实验所得的信息量大、直观、更适合于探索性试验研究,本研究可为急性子多糖类化学成分研究提供科学参考。1材料与方法1.1仪器与试剂紫外可见分光光度计(UV24802型),电子天平(上海天平仪器厂)。葡萄糖、浓硫酸、苯酚、95%乙醇皆为分析纯,水为重蒸水。
4、1.2材料急性子为凤仙花科植物凤仙花TmpatiensbalsaminaL.的干燥成熟种子,采自鞍山千山,经木校屮药鉴定教研室翟延君教授鉴定。1.3实验方法1.3.1提取方法精确称取急性子药材粉末5.0g,置250mL圆底烧瓶中,加80%乙醇100mL加热回流1.5h,过滤、挥干。干燥后的药材粉末用20倍量水在70°C水浴回流提取2h,残渣用适量水洗涤,滤液于250汕量瓶小定容。1.3.2标准曲线的制备精密称取干燥至恒重的葡萄糖粉末26.85mg,至于100mL容量瓶中,加水定容至刻度,摇匀,配得葡萄糖标准溶液。精密量取葡萄糖标
5、准溶液0、5、10、15、20、25讥稀释至100M量瓶中,取各浓度的标准液ImL分别置于试管中,并加5%苯酚溶液1.0mL,摇匀,再加入浓硫酸5.0mL,摇匀后,置40°C水浴中加热15min,取出,室温放置10min,在490nm处测定其吸光值。得回归方程0106.5A+3.797,相关系数r=0.9995o1.3.3急性子多糖的测定精密吸取样品溶液1mL置于25mL量瓶屮,加水定容。精密量取1mL,按1.3.2项显色测量。2结果与讨论2.1急性子多糖水提过程中单因索的影响研究2.1.1提取温度考察精密称取5・0g干燥至恒重
6、的药材粉末,按1・3.1项下方法操作,分别在40、50、60、70、80、90、100°C温度下提取,测定多糖含量。随着温度的升高,多糖溶出量逐渐增大且多糖溶液颜色加深,在90°C提取率达到最大值。高温可能对多糖结构和活性有一定影响,所以提取温度不宜超过100°C。结果见图1。2.1.2提取吋间考察精密称取5.0g干燥至恒重的药材粉末,按1.3.1项下方法操作,分别提取60、100、140、180、220、260min,测定多糖含量。当提取时间低于140min时,细胞壁的溶胀和破坏程度不够,多糖不能完全溶岀,捉取率较低。提取吋间
7、至1401材料与方法1.1仪器与试剂紫外可见分光光度计(UV24802型),电子天平(上海天平仪器厂)。葡萄糖、浓硫酸、苯酚、95%乙醇皆为分析纯,水为重蒸水。1.2材料急性子为凤仙花科植物凤仙花TmpatiensbalsaminaL.的干燥成熟种子,采自鞍山千山,经木校屮药鉴定教研室翟延君教授鉴定。1.3实验方法1.3.1提取方法精确称取急性子药材粉末5.0g,置250mL圆底烧瓶中,加80%乙醇100mL加热回流1.5h,过滤、挥干。干燥后的药材粉末用20倍量水在70°C水浴回流提取2h,残渣用适量水洗涤,滤液于250汕量瓶
8、小定容。1.3.2标准曲线的制备精密称取干燥至恒重的葡萄糖粉末26.85mg,至于100mL容量瓶中,加水定容至刻度,摇匀,配得葡萄糖标准溶液。精密量取葡萄糖标准溶液0、5、10、15、20、25讥稀释至100M量瓶中,取各浓度的标准液ImL分别置于试管中,并加