【精品】医学眼科论文

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1、氨基弧在兔视神经损伤后对视网膜神经节细胞的保护性作用研究AstudyoftheprotectiveeffectofAminogunidineonretinalganglioncellsafteropticnerveinjuryinrabbits中文摘要1英文摘要4英文缩写7研究论文氨基弧在兔视神经损伤后对视网膜神经节细胞的保护性作用研究前言8材料与方法10结果19讨论28小结36问题与展望37参考文献38附图41综述氨基弧对视神经损伤后视网膜神经节细胞保护性作用……45参考文献50致谢54个人简历55氨基肌在兔视神经损伤后对视网膜神经节细胞的保护性作用研究中文摘要目的视

2、神经损伤是眼科常见疾病,多并发于颅脑外伤,预后不良,常致患者失明。由于视神经损伤的发病机制尚未完全明了,所以迄今为止其治疗仍是国内外眼科界的一大难题。本试验通过建立兔眼视神经夹伤的动物模型,及伤后早期应用氨基弧治疗(iNOS抑制剂),动态观察视神经损伤后视网膜病理形态学改变,研究NO、iNOS、MDA、SOD含量变化及耳缘静脉注射氨基弧对其影响,力求探索一条治疗视神经损伤的新思路,为临床治疗提供实验依据,尽最大可能挽救患者视功能。材料与方法健康成年大耳白兔66只,3-4月龄,雌雄不限,休重2.5±0.2kg,检查双眼屈光间质清,瞳孔等大等圆,对光反射正常,眼底无异常。将

3、实验兔随机分为正常对照组、损伤治疗组、损伤对照组共3组。正常对照组(6只,12只眼八从66只兔中随机抽取6只。损伤治疗组:余60只兔用同一反向动脉夹于球后3mm处夹闭视神经20s制成视神经损伤的动物模型,然后随机抽取30只给了2%氨基弧(Aminogunidine,AG)80mg/kg耳缘静脉注射,每日1次;损伤对照组:另外30只耳缘静脉注射等量生理盐水。按照视神经损伤后Id、3d、7d、14d、21d又随机分为5组,每组兔(6只,12只眼).造模成功后分别于伤后Id、3d、7d、14d、21d处死动物,取岀眼球,其屮一部分眼球固定、石蜡包埋常规做视网膜切片,进行HE染

4、色及视网膜凋亡细胞(TUNEL)检测,光镜观察视网膜形态改变。另一部分眼球于冰盐水上小心剥下视网膜组织,匀浆,分光光度计检测一氧化氮(NO)、诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)的含量变化,结果进行图像分析,所得数据资料均用spss13.0软件包进行统计分析。结果1.视网膜HE染色:正常对照组视网膜内界膜平滑完整,三层细胞分界清楚,节细胞呈单层排列,按胞核大小分为两类:一类大核浅染;另一类小核深染,核内染色质分布均匀。内、外核层细胞均呈多层排列,其厚度、染色均匀,细胞排列整齐紧密。同一时间点损伤治疗组视网膜的病理改变(细胞间隙,组

5、织水肿,细胞减少),均较损伤对照组明显减轻。本实验结果提示视神经损伤后早期耳缘静脉注射AG能够及时挽救未受损的视网膜细胞,对维持视网膜的形态和功能起到了重要作用。2.TUNEL染色凋亡细胞计数和定位:视网膜切片屮显示TUNEL阳性细胞(凋亡细胞)不仅见于视网膜神经节细胞层,还见于内外核层。凋亡细胞胞核染色,呈棕黄色,部分可由于核固缩扭曲破裂而失去正常形态,并可见凋亡小体。正常对照组视网膜切片极少见到凋亡细胞。本实验仅计数节细胞层的凋亡情况进行比较研究。同一时间点损伤对照组和损伤治疗组比较,差异具有统计学意义(PvO.05)。说明此种治疗方法能够减少视神经损伤后RGCs的

6、凋亡。3.一氧化氮(NO)含量,诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活力测定:正常视网膜组织屮很少表达iNOS,但含有少量NO,在损伤后二者含量逐渐增高,同…时间点损伤对照组和损伤治疗组比较,NO含量和iNOS活性差异有统计学意义(P<0.05),提示AG通过抑制iNOS活力减少NO的产生,对视神经损伤后的RGCs起到保护作用。4.丙二醛(MDA)含量,超氧化物歧化酶(SOD)活力检测:正常视网膜组织匀浆中含一定量的MDA和SOD。同一时间点损伤对照组和损伤治疗组比较,MDA含量差异有统计学意义(P<0.05)o同一时间点损伤对照组和损伤治疗组比较,SOD活性差异有统计学意义

7、(P<0.05)o表明AG能明显提高超氧化物歧化酶的活性,降低脂质过氧化物的产生,从而降低视网膜受氧自由基损伤的程度。结论:1•视神经夹伤后,损伤治疗组各时间点视网膜的病理改变,均较损伤对照组明显减轻。提示伤后早期耳缘静脉注射AG进行干预治疗能够及时挽救未受损的视网膜细胞,对维持视网膜的形态和功能起到了重要作用。2.正常视网膜组织中很少表达iNOS,但含有少量NO,在损伤后二者含量逐渐增高,其结果与视神经损伤后RGCs的凋亡趋势相吻合,说明视神经损伤后NO、iNOS的大量生成是引起RGCs凋亡的一个因素。3.视神经夹伤后视网膜组织中的MD

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