2.2.1 动物细胞培养和核移植技术

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1、生活联系：生活联系：烧伤病人的治疗通常是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植，但对于大面积烧伤病人来讲，健康皮肤很有限，请同学们想一想如何来治疗该病人？最基础的是——动物细胞培养技术动物细胞工程常用的技术：动物细胞培养动物细胞核移植动物细胞融合单克隆抗体等2.2.1动物细胞培养和核移植技术自主阅读P44第5段，思考下列问题：1、什么叫动物细胞培养（animalcellculture)？2、动物细胞培养的原理是什么？一、动物细胞培养1、概念：从动物机体中取出相关组织，将它们分散成单个细胞，然后放在适宜的培养

2、基中，让这些细胞生长和增殖。原理：细胞增殖如何进行动物细胞培养?放入二氧化碳培养箱中培养动物细胞培养过程示意图结合问题，阅读书本，四人一组，讨论写出动物细胞培养的流程图。每组推选一位“小老师”，准备上台讲解（5min)学习活动一：合作学习（结合问题思考流程）1、为何动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞呢？2、如何将动物组织分散成单个的细胞？3、胰蛋白酶的作用是什么？由此可说明细胞间的物质主要是什么成分？4、培养瓶或培养皿的内表面为何要光滑、无毒？5、培养瓶中的细胞培养到什么时候就不再分裂、增殖？细胞贴

3、壁接触抑制(contactinhibition)原代培养：通常将直接从动物体内取出的动物组织消化后的初次培养称为原代培养。传代培养：原代培养的细胞出现接触抑制后，贴满瓶壁的细胞需要重新用胰蛋白酶等处理，然后分瓶继续培养，让细胞增殖。这样即为传代培养。分类：10代内的细胞；10-50代；50代以后。有关概念：1、选用组织时，一般用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做培养材料，而不用老龄动物的，这是为什么？因为幼龄组织或器官上的细胞增殖能力强，有丝分裂旺盛，容易培养。老龄动物的细胞则相反。学习活动二：寻根问底

4、，加深巩固2、胰蛋白酶处理组织时要注意什么问题？能够用胃蛋白酶代替吗？控制好消化时间，太长会消化细胞膜上的蛋白质不能，因为两者的最适PH不同，而正常组织细胞的生存环境与胰蛋白酶的最适PH较接近.学习活动二：寻根问底，加深巩固3、动物细胞培养能否最终培养成新个体？不能，动物细胞培养只能使细胞数目增多，不能发育成新的动物个体学习活动二：寻根问底，加深巩固动物胚胎或幼龄动物的组织、器官胰蛋白酶剪碎单个细胞加培养液制成细胞悬浮液原代培养动物细胞培养细胞增殖部分细胞无限传代去掉组织间蛋白动物细胞培养不能最终培养

5、成生物体传代培养多细胞动物和人体的细胞都生活在内环境中，根据你所学的知识，认为体外培养动物细胞应该模拟内环境的哪些条件呢？问题探讨：无菌、无毒全部的营养物质适宜的温度和PH值必要的气体条件3、动物细胞培养的条件动物细胞培养条件：1、无菌、无毒的环境（添加一定量的抗生素，定期更换培养液）2、营养（葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等。）3、温度和PH36.5+（-）0.5度,7.2-7.44、气体环境：O2和CO2（95%空气和5%CO2）保证细胞顺利的生长增殖①生物制品的生产②用于基因工程③用于

6、检测有毒物质④细胞的生理、病理、药理研究4、动物细胞培养技术的应用获得细胞细胞的全能性植物体培养结果或细胞产物快速繁殖、培育无病毒植株等培养目的葡萄糖、动物血清蔗糖、植物激素培养基特有成分液体培养基固体培养基培养基性质细胞增殖原理动物细胞培养植物组织培养比较项目植物细胞和动物细胞培养的比较细胞群体1．动物细胞工程常用的技术手段中，最基础的是A.动物细胞培养B.动物细胞融合C.单克隆抗体D.胚胎核移植练一练~~~Let'stry!2．贴壁细胞的分裂方式具体是A.无丝分裂B.有丝分裂C.减数分裂D.增殖3

7、．关于动物细胞培养的叙述，不正确的是A.动物细胞培养前要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶使细胞分散开来B.通常将动物组织消化后的初次培养称为原代培养C.动物细胞培养只能传50代左右，所培育的细胞全部衰老死亡D.用于培养的细胞大都取自胚胎或幼龄动物的器官或组织练一练~~~Let'stry!根据动物细胞核仍具有全能性的特点,怎样将动物细胞的全能性表达?再想一想利用动物体细胞核移植技术理论基础：动物的细胞核具有全能性二、动物体细胞核移植技术1、概念：将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重

8、组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称克隆动物二、动物体细胞核移植技术2、核移植的种类胚胎细胞核移植体细胞核移植（易）（难）学习活动三：思考探究1997年，美国威斯康星州的一个奶牛场有一头名叫卢辛达的奶牛，年产奶量为30.8t，创造了世界奶牛产奶量的最高记录。目前世界各国高产牛奶场的奶牛，平均每年产量为十几吨，而我国平均水平仅有3－4吨。你能想办法繁殖卢辛达的后代，使年产奶量为30.8t吗？供体细胞培养（MⅡ卵