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1、TMA的原理及应用中国医学科学院输血研究所刘鱼病毒感染的检测方法病毒分离培养血清学检测核酸检测(NAT)病毒Anti-HIV-1/2HIV-1Anti-HCVHCVHIV-1p24HBV优点:检测病毒专一性强,HBsAg不会出现假阳性优点:操作简便,成本低缺点:敏感性差、操作时间缺点:漏检长、操作复杂,必须在特定的原因:窗口期P3实验室中才能进行,且费用病毒变异较高,有些病毒还没找到合适免疫沉寂的培养体系MutationslocalizationintheMHRofHBsAg.Urumqi(W),Kunming(K),Luoyang(L),Miangyan
2、gbloodcenter(CD)andLiuzhoubloodcenter(GX)血清学检测和核酸检测的窗口期比较窗口期:从感染病毒开始,直至用某种检测方法能够检测到该病原存在为止的这一段时间病毒(核酸)>抗原>抗体HIV-1AbtoHIV-1ViralRNA,RNAAgorAbLevelp24Ag0102030405060708090HCVRNAViralRNAorAbAbtoHCVLevel0102030405060708090Dayspostinfection检测窗口期WindowPeriod病毒抗体抗原ID-核酸检测MP-核酸检测检测检测NATNA
3、TAbAg窗口缩短缩短窗口缩短缩短assayassay期WP天数%期WP天数%(d)(d)(d)reduc(d)reduced(d)ed(d)HBV4520255636920HCV72106286135982HIV2216715681111505临床检测和血筛的区别•1.定性和定量•2.灵敏度要求•3.自动化和通量•4.人群差异DistributionofHBVgenotypesinChineseblooddonorsandpatients﹡:BlooddonorsvsPatients,P<0.01﹟:theratioofC/Binblooddonorsv
4、sthatinPationts,P<0.001全球血液NAT检测应用情况CountryTechnologyPool/IDT•Germany德国(1997年起部分,•PCR•Pool1999年4月起,全部)•Netherlands荷兰(1997年起)•PCR•Pool•U.K.英国(2000年起)•PCR•Pool•Switzerland瑞士•PCR•Pool•Japan日本(1997年1月起对原料浆;•PCR•Pool1999年初起献血者)•Canada加拿大•PCR•pool•USA美国(1999年3月起)•TMA/PCR•pool/IDT•NewZea
5、land新西兰•TMA•IDT•Australia澳大利亚•TMA•pool/IDT•Singapore新加坡•TMA•IDT•Portugal葡萄牙•TMA•IDT•France法国(2000年起)•TMA/PCR•Pool/IDT•Spain西班牙•TMA/PCR•Pool•Italy意大利•TMA/PCR•Pool•HongKong香港•TMA•pool•台湾(准备中)•TMA/PCR•Pool•韩国(2005年1月起)•TMA/PCR•Pool8美国NAT检测结果(NATyieldinUSA)1999年开始检测HIV和HCV16人份或24人份混
6、合1999-2008:NAT+,抗体阴性NAT检出率HCV244/660000001/17万HIV32/660000001/200万Strameretal,Transfusion.2010Jul;50(7):1495-504.澳大利亚NAT检测结果(NATyieldinAustralia)5个NAT检测点,2个单人份检测,3个24人份检测TMA2000年6月7日-2004年11月14日检测donors总NAT总NAT阳NAT单NAT单独数阳性性率独检出检出率HCV4,489,5505121/877091/49.9万HIV4,489,550201/2
7、2.5万11/449.0万10意大利NAT检测结果•2001-2006NAT+,抗体或抗原阴性NAT检出率HIV14/7,932,4301/55.56万HBV197/3,405,497(8份为窗口1/1.73万期,189份为隐匿性感染)HCV27/10,776,2881/40万TRANSFUSION2008;48:2205-2213.法国NAT检测结果(NATyieldinFrance)(2001.7–2003.12)---TMA---8或16人份NAT+,血清学阴性NAT检出率HCV3/614万1/205万HIV2/614万1/307万---EuroSu
8、rveill.2005Feb1;10(2)[Epubaheadof