遗传实验报告唾腺染色体观察

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1、【实验目的】1.练习解剖果蝇幼虫的技术2.掌握果蝇唾腺染色体的制片方法3.了解果蝇唾腺染色体的形态结构特点【实验原理】果蝇为双翅目完全变态的昆虫，幼虫期分三龄。其幼虫期具有很大的唾腺细胞，其中的染色体是巨大的多线染色体。双翅口昆虫的整个消化管细胞发育至一定阶段后就停止有丝分裂，终止在分裂间期。但随着幼虫整体器官以及这些细胞本身体积的增大，唾液腺细胞核的染色体仍不断地进行自我复制而并不分开。经多次复制后，形成约1000-4000拷贝的染色体丝，比普通中期相染色体大得多（约100〜500倍），因此又称为多线染色体。X4z2L染色体比英他几对染色体相对狭窄一I

2、亠色中心3L黑腹果蝇染色体数2n=8,存在体联会。各染色体的着丝粒互相靠拢形成染色屮心，由染色体中心向外伸出5条很长的染色体臂和一条极短的染色体。（如右图）染色体I为端着丝粒染色体，所以它的一端在染色屮心上，另一端游离；II、III染色体为屮着丝粒染色体，他们从染色中心呈V字形向外伸展，所以分别能看到2L、2R、3L和3R4条长而宽的“带状物”；点状的第IV染色体很短小，为端着丝粒。因此可以见到5条很长的和一条仅靠染色中心的短小的染色体。在雄性幼虫中，唾腺染色体上不见Y染色体，他捕鱼X染色体联会，而R英着丝粒及其附近的异染色质参与染色屮心的形成。这可能

3、是雄性幼虫唾腺染色体屮的些的缘故。杲蝇唾腺染色体特点：巨大，是多线染色体；有丝分裂停在间期，DNA不断复制，着丝点不分开；同源染色体紧密配对一体细胞联会，染色体呈单倍数。整个唾腺染色体上分布着染色深浅不同、粗细各异的横纹，这意味着基因的排列。这些横纹的宽窄、疏密程度以及排列顺序和数目都具有物种的特界也黑腹果蝇的多线染色体具有大约5000条横纹。染色体各条臂的端部，即远离染色中心的游离端恒定的横纹特征，是准确识别各对染色体的重耍依据。在果蝇的特定发冇时期，横纹会出现不连续的膨胀，称为疏松区（puff）,目前认为这是该部分基因被激活的标志。【实验用具及材料】

4、材料：黑腹果蝇的三龄幼虫器材：双筒解剖镜、显微镜、解剖针（2支）试剂：生理盐水、1NHC1、改良苯酚品红染液【实验步骤】1•选取幼虫用解剖针取行动迟缓、肥大、爬上管壁的三龄幼虫，置于载玻片上，并滴加一滴生理盐水。于解剖镜下观察幼虫结构：具有一钝尾和带黑色口器的尖头端。2.腺体剖取取两支解剖针，一针压住幼虫身体的近中部，固定幼虫；另一-针压住幼虫头部，压点尽可能靠头部口器处。将解剖针平稳前移，使头部和身体拉开，体内各器官从切口拉出，一对唾腺也随之而出。唾腺为透明棒状腺体，外有白色脂肪组织。去除幼虫其他组织部分，并把唾腺周围的白色脂肪剥离干净。3.腺体解离加

5、一滴INHC1,浸2〜3min,使组织疏松，以便压片时细胞分散，染色休散开。用吸水纸吸去HC1,加蒸饰水轻轻冲洗两次。4.染色与压片滴加改良苯酚品红染液，染色20〜30min。染色完成后，盖上干净的盖片，并覆一层滤纸。将玻片放在实验台上，用大拇指均匀用力压片。5.观察标本先用低倍镜观察，找到染色体图像后移至视野中央，再用高倍镜观察。【实验结果】在光学显微镜下，口J观察到唾腺染色体的5条长臂，1条短臂以及染色体上排列的横纹。（根据各染色体特征进行分辨。图不是很清晰，对臂的辨认可能存在错误）【注意事项】1.取幼虫时尽量选取肥大、行动迟缓的幼虫。肥大的幼虫唾腺

6、才会发育良好，且较大的幼虫染色体复制次数多，唾腺染色体更粗；行动迟缓便于进行解剖。1.在解剖过程中务必加生理盐水，以免唾腺T：掉。但也不可加多，否则幼虫会漂浮且活跃。2.尽量将唾腺周围的脂肪组织剖离干净，以免影响染色观察。3.在用滤纸条吸净腺体周围的液休时，谨防腺休丢失。4.染色时间不可过长，否则背景也着色。5.压片时用力要均匀，不要使盖片滑动，可朝一个方向揉动。