胶体金免疫层析法对乙肝表面抗原测定的价值分析

《胶体金免疫层析法对乙肝表面抗原测定的价值分析》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、胶体金免疫层析法对乙肝表面抗原测定的价值分析马政旻(黑龙江省大庆市第四医院检验科163712)【中图分类号1R512.6+2【文献标识码】A【文章编号11672-5085(2013)25-0198-02【摘要】目的探讨胶体金免疫层析法(GICA)对乙肝表面抗原测定的临床价值。方法将88份选定的住院患者标木同时以GICA和ELISA两种方法检测，操作方法均按试剂盒说明书，并且对GICA法进行灵敏性、重复型、特异性分析。结果GICA和ELISA两种方法比较，阳性及阴性符合率均为99%以上，并HGICA试条只与HBsAg有特异性反应，与乙型肝

2、炎病毒核心抗原、e抗原等无交叉反应。结论胶体金免疫层析法操作简便快速，费用少，结果鲜明直观，灵敏度、重复性、特异性与ELISA相近，又不需特殊仪器设备，能满足临床急诊和基层医院的需求，其对乙肝表面抗原测定有很高的临床适用价值。【关键词】GICAELISAHBsAg我国是乙肝高发病区，乙肝病毒携带者达一亿以上，对人们的工作、学习、精神和社会交往都有严重的影响•而HBsAg是乙肝病毒感染和诊断最敏感的指标•临床上普遍采用ELISA-步法检测HBsAg,但因耗时较长，需反复洗涤和借助酶标仪等设备，不能满足临床急诊和基层医院需要;免疫层析法操作

3、简便，费用少，结果鲜明直观，灵敏度、特异性与ELISA相近，乂不需特殊仪器设备，恰好弥补了ELISA法等其他方法所存在的不足，更适合于临床的需要。1材料与方法1.188份标木，均来自我院住院患者。1.2试剂①ELISAHbsAg试剂盒(上海科华生物技术有限公司)；试剂②GICAHbsAg试验卡；lng/mk2ng/ml>HbsAg5ng/ml临界值参考品。1.3仪器GRIFOLS全自动酶免系统酶标仪，37°C恒温箱，振荡器。1.4方法将88份标木同时以ELISA和GICA两种方法检测，操作方法均按试剂盒说明书。结果判断：胶体金免疫层析法

4、,两条红色线为阳性，仅对照区一条红色线为阴性；强阳性标本lmin内可判断结果，弱阳性及阴性结果需在15min内判断。ELISA法仮应板孔显色为阳性.2结果2.1GICA法灵敏度：用卫生部临床检验中心提供的2ng/ml>5ng/ml临界参考品均能显示阳性结果。lng/ml及吸光度小于0.20的标本则不能显示阳性结果。2.2重复性：在检测88份标本吋，取弱阳性、阳性、阴性各三份标本置室温下采用快速胶体金免疫层析法每天测一次，连续三天，结果一样。胶体金免疫层析法重复性非常好。2.3特异性：取HBeAg、HBcAg阳性标本，均不与胶体金免疫层析

5、法HBsAg试验卡产生阳性反应，特异性好。2.488份标本的HBsAg采用两种方法进行检测结果（见附表）。附表GICA法与ELISA法检测88例标本的结果ELISA法GICA法阳性阴性合计阳性23124阴性16364合计246488从表上可以看出，两种方法同为阳性的有23例，阳性符合率为99.1%；同为阴性的有63例，阴性符合率为99.4%；两种方法结果不同的有2例，这2例标本中有2例标本GICA法阴性，而ELISA法则是弱阳性结果，但其吸光度值小于2ng/ml的吸光度值而大于lng/ml的吸光度值。3讨论GICA法是在免疫渗滤试验基础

6、上发展起来的一项新技术⑴。该试验卡的组成分为左右两半；卡左半部分下端粉红色垫上涂有以胶体金标记的针对HBsAg的特异性单克隆抗体；当样本加在该粉红色垫上时，样本中HBsAg将与金标抗体形成复合物。右半部分下端白色纤维膜上滴加试剂后，合起卡片，HBsAg与金一抗HBs结合物在试剂作用下，通过毛细管效应沿纤维薄膜迁移，在包被有另一个单克隆抗体的试验区形成“抗HBs・HbsAg-金抗标体”夹心物而成一条红色线，对照区另有一红色带作为实验对照。阳性标本将出现两条红色线，阴性标本则只有对照区一条红色线。该试验以胶体金代替酶标记抗HBs,减少了操作

7、步骤,可以直接观察结果［2］。GICA法从抽血到发报告lOmin内出结果，操作简便，无需洗涤，大大减少了污染机会和影响因素；且结果鲜明易判，试验特异性与敏感性与ELISA相近，可以单份也可以成批检测。本实验结果表明GICA法具有ELISA不可比拟的优点：简便快速、特异性与ELISA相近，灵敏度达2ng/ml(符合卫生部对临床HbsAg检测的要求)，不需任何仪器设备，随时随地都可检测，适用临床急诊和基层医院普遍应用，但在献血员筛选上，灵敏度上尚不够卫生部要求［3］。综上所述，GICA法对乙肝表面抗原测定有着极高的临床适用价值。参考文献⑴杨

8、守纯•提高病毒性肝炎感染标志检验水平的趋向•中华医学检验杂志，1995,18(1)：5〜7.⑵周继文，戒广亚，杨守纯•胶体金免役层析法检测乙型肝炎病毒表面抗原•中华医学检验杂志，1998,21(1)：30〜