基因工程基础复习题及答案

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1、基因工程基础复习题及答案一.填空题1.基因工程是20世纪70年代发展起来的遗传学的一个分支学科。基因工程技术的诞生使人们从简单地利用现存的生物资源进行诸如发酵、酿酒、制醋和酱油等传统的生物技术时代,走向按人们的需要定向地改造和创造具有新的遗传性品种的时代。2.Cohen等在1973年构建了第一个有功能的重组DNA分子。3.基因工程的两个基本特点是:(1)分子水平上的操作,(2)细胞水平上的表达。4.基因克隆中三个基本要点是:克隆基因的类型、受体的选择和载体的选择。5.克隆基因的主要目的有四个:①扩增DNA;②获得基因产物;③研究基因的表达调控;④改造生物的遗传特性。6•基因工程的基

2、本程序包括DNA制备.体外DNA重组.遗传转化>转化细胞的筛选等方面。7•基因工程又称重组DNA技术/基因操作技术/基因克隆/分子克隆/遗传修饰/新遗传学。8.克隆的进行依赖于各种参与DNA新陈代谢的酶的使用,它们主要是从原核细胞中分离的。限制性内切核酸酶能够将DNA切割成特定大小的片段。各种各样的DNA聚合酶也是克隆所必需的,包括将RNA转录出单链DNA的反转录酶。DNA连接酶用于连接限制性片段。克隆也需要来源于微生物的DNA序列,包括用来运载被被克隆DNA的克隆载体。质粒载体来源于天然细菌质粒,通常携带有抗生素抗性基因。其他载体来源于噬菌体,如入噬菌体,它们经过修饰后可以运输外

3、源DNA。要想克隆一个感兴趣的真核生物的基因就必须先制作一个能与该基因杂交的探针。人们已经发展了很多有效而精细的技术来分析克隆的DNA。例如,极微量的DNA片段可以通过PCR得到扩增。在感兴趣基因的启动子上连接,如GT或LacZ之类的报告基因能够定量检测基因的活性。二、选项题(单选或多选)1.因研究重组DNA技术而获得诺贝尔奖的科学家是(C)。2.A.KornbergAB.GilbertWC.BergPD.McClintock第一个用于构建重组体的限制性内切核酸酶是(A)。A.EcoRIB.EcoBC.EccCD.EcoRII3.靶(目的)基因通常是指(A)A、拟进行研究或利用的基

4、因B.人工合成的基因C、载体DNA分子D、具有编码序列的DNA分子三.判断题1.利用噬菌体或动物病毒作为载体转化细胞的过程称为转移。错误,为转染,质粒DNA为转化1.BergP的创造性的工作是在体外构建了重组DNA分子,所用的载体是一种具有复制能力的细胞质质粒。错误,用的是动物病毒DNA(猿猴病毒SV40)2.克隆即无性繁殖的意思。通过克隆可以在无性的条件下获得遗传结构和表型完全相同的一群个体。错误,不严谨,对分子可以,对细胞或个体不一定3.催生基因工程技术诞生的关键技术是DNA转化技术的突破。错误,II型酶的分离纯化!1!问答题1.为什么说基因工程是在上世纪70年代初起发展起来的

5、?答:这是因为:①1967年发现了连接酶;②大肠杆菌的转化技术于1970年获得突破;③限制性内切核酸酶的分离始于1970年;④Berg在1972年构建了第一个重组的DNA分子。2.基因工程操作的基本步骤是什么?①施工材料的准备,即目的基因.载体、工具酶和受体细胞(宿主)的准备。用限制性内切酶分别将外源DNA和载体分子切开。(切)②目的基因与载体DNA的体外重组,形成重组DNA分子。(接)①把重组的DNA分子引入受体细胞,并建立起无性繁殖系。(转和扩)②筛选出所需要的无性繁殖系,并保证外源基因在受体细胞中稳定正确表达。(检)1.如何理解基因工程的两个特点?答:基因工程的两个基本特点是

6、分子水平的操作和细胞水平的表达。分子水平的操作包括DNA分离、切割和连接(还有其他一些DNA的修饰等)。由于体外重组DNA的最终目的是要改变生物的遗传性,所以分子水平的操作和细胞水平的表达是基因工程的两个最基本的特点。2.什么是动物乳腺生物反应器?答:能够分泌乳汁的转基因动物生产其他来源的基因产品,并通过乳腺分泌出来。3.基因克隆是如何使含有单个基因的DNA片段得到纯化的?答:大分子质量的DNA会含有许多特殊限制性内切核酸酶的限制位点,因此用一种限制酶处理一完整染色体或整个基因组会产生许多不同的DNA片段,每一个片段带有基因组的一个不同的基因或一个不同的小片段。当全部片段与用同种限

7、制酶处理过的载体分子混合时(如图所示),每个片段将插入一个不同的载体分子(如一个质粒)。同样地,当用这些质粒转化宿主细胞时,每个宿主细胞将只接收一个质粒DNA分子,而筛选出的含重组质粒的每个菌落实际上会含有某一特异的供体DNA片段的多个拷贝。一旦带有待研究的特定基因的克隆被确认了,此重组DNA分子可从宿主细胞中提取出来进行纯化。1.比较遗传工程.基因工程和生物技术。答:遗传工程是遗传学和工程学相结合的一门技术科学。借用工程技术上的设计思想,在离体条件下,对生物细胞、细

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