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时间:2019-08-06
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1、第十、十一章DNA与RNA的生物合成一、知识要点在细胞分裂过程中通过DNA的复制把遗传信息由亲代传递给子代,在子代的个体发育过程中遗传信息由DNA传递到RNA,最后翻译成特异的蛋白质;在RNA病毒中RNA具有自我复制的能力,并同时作为mRNA,指导病毒蛋白质的生物合成;在致癌RNA病毒中,RNA还以逆转录的方式将遗传信息传递给DNA分子。这种遗传信息的流向称为中心法则。复制是指以原来DNA分子为模板,合成出相同DNA分子的过程;转录是在DNA(或RNA)分子上合成出与其核苷酸顺序相对应的RNA(或DNA)的过程;翻译是在以rRNA和蛋白质组成的
2、核糖核蛋白体上,以mRNA为模板,根据每三个相邻核苷酸决定一种氨基酸的三联体密码规则,由tRNA运送氨基酸,合成出具有特定氨基酸顺序的蛋白质肽链的过程。(一)DNA的生物合成在DNA复制时,亲代DNA的双螺旋先行解旋和分开,然后以每条链为模板,按照碱基配对原则,在这两条链上各形成一条互补链,这样从亲代DNA的分子可以精确地复制成2个子代DNA分子。每个子代DNA分子中,有一条链是从亲代DNA来的,另一条则是新形成1415的,这叫做半保留复制。通过N和N标记大肠杆菌实验证实了半保留复制。1.复制的起始点与方向DNA分子复制时,在亲代分子一个特定区
3、域内双链打开,随之以两股链为模板复制生成两个子代DNA双链分子。开始时复制起始点呈现一叉形(或Y形),称之为复制叉。DNA复制要从DNA分子的特定部位开始,此特定部位称为复制起始点(originofreplication),可以用ori表示。在原核生物中复制起始点常位于染色体的一个特定部位,即只有一个起始点。真核生物的染色体是在几个特定部位上进行DNA复制的,有多个复制起始点。酵母基因组与真核生物基因组相同,具有多个复制起始点。复制的方向可以有三种不同的机制。其一是从两个起始点开始,各以相反的单一方向生长出一条新链,形成两个复制叉。其二是从一个
4、起始点开始,以同一方向生长出两条链,形成一个复制叉。其三是从一个起始点开始,沿两个相反的方向各生长出两条链,形成两个复制叉。2.DNA聚合反应有关的酶及相关蛋白因子DNA的合成是以四种脱氧核糖核苷三磷酸为底物的聚合反应,该过程除了需要酶的催化之外,还需要适量的DNA为模板,RNA(或DNA)作为引物和镁离子的参与。催化这个反应的酶也有多种:DNA聚合酶、RNA引物合成酶(即引发酶)、DNA连接酶、拓扑异构酶、解螺旋酶,此外还需要多种蛋白质因子参与。3.DNA的复制过程DNA的复制按一定的规律进行,双螺旋的DNA是边解开原有的螺旋边合成新链的。复
5、制从特定位点开始,可以单向或双向进行,但是以双向复制为主。由于DNA双链合成的延伸方向均为5′→3′,因此复制是以半不连续的方式进行,即其中一条链相对地连续合成,称为前导链,另一条链的合成是不连续的,称为后随链(或滞后链)。在DNA复制叉上进行的基本活动包括:双链的解开、RNA引物的合成、DNA链的延长、RNA引物的切除,缺口的填补,相邻DNA片段的连接。(二)逆向转录在逆转录酶作用下,以RNA为模板,按照RNA中的核苷酸顺序合成DNA,这与通常转录过程中遗传信息流从DNA到RNA的方向相反,故称为逆向转录。逆转录酶需要以RNA(或DNA)为模
6、板,以四种dNTP为原料,要求短链RNA(或DNA)作为引物,此外还需要适当2+2+浓度的二价阳离子Mg和Mn,沿5′→3′方向合成DNA,形成RNA-DNA杂交分子(或DNA双链分子)。逆转录酶是一种多功能酶,它除了具有以RNA为模板的DNA聚合酶和以DNA为模板的DNA聚合酶活性外还兼有RNaseH、DNA内切酶、DNA拓扑异构酶、DNA解链酶和tRNA结合酶的活性。几乎所有真核生物的mRNA分子的3′末端都有一段多聚腺苷酸。当加入寡聚dT作引物时,mRNA就可以成为逆转录酶的模板,在体外合成与其互补的DNA,称为cDNA。(三)DNA突变
7、DNA突变是指DNA的碱基顺序发生突然而永久性的变化,从而影响DNA的复制,并使DNA的转录和翻译也随之发生改变,表现出异常的遗传特征。DNA的突变可以有几种形式:(1)一个或几个碱基对被置换;(2)插入一个或几个碱基对;(3)一个或多个碱基对缺失。置换和插入的变化是可逆的,缺失则是不可逆的。最常见的突变形式是碱基对的置换。嘌呤碱之间或嘧啶碱之间的置换称为转换,嘌呤和嘧啶之间的置换称为颠换。突变有自发突变和9诱发突变。在DNA的合成中,自发突变的机率很低,大约每10个碱基对发生一次突变;各种RNA肿瘤病毒具有很高的自发突变频率。诱发突变可以由物
8、理因素或化学因素引起,物理因素如电离辐射和紫外线照射等均可以诱发突变。化学因素的诱变,如脱氨剂和烷化剂均可诱发突变。亚硝酸为强脱氨剂,可使腺嘌呤转变为
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