《ⅱ微生物发酵产酶》ppt课件

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1、Ⅱ微生物发酵产酶一生产工艺流程1.收集筛选菌种:2.菌种保藏：3.细胞活化：4.根据菌种选培养基扩大培养:5.发酵管理:发酵※工艺流程：收集筛选菌种→菌种保藏→细胞活化→扩大培养→发酵管理扩大培养收集筛选菌种发酵管理：条件与控制菌种保藏细胞活化※收集、筛选菌种1.用钱购买菌种2.收集土样筛选菌种⑴收集土样⑵初筛：单菌落培养，用透明圈法选出产目的酶的微生物（使用鉴定培养基）⑶复筛：单菌落培养，选出符合优良菌种要求的菌落（使用选择培养基）单菌落培养优良菌种要求与常用菌种透明圈法※菌种保藏菌种保藏方法

2、：(1)斜面培养法(2)(3)(4)(5)(6)※细胞活化保藏的菌种通常以芽孢形式存在（保藏时营养缺乏），需放入营养充足的营养环境中活化：芽孢→营养细胞※扩大培养1.定义：根据菌种特点配制培养基，使菌种大量繁殖用于发酵2.方法：种子罐培养；实验室培养（工业生产）（实验室）3.目的：使菌种大量繁殖，用于发酵※培养基配制：碳源、氮源、生长因子、无机盐、水※C／N：碳源：糖→加碳源加C/N→酸性→利于菌种保存（作保存培养基）氮源：有机、无机→加氮源减C/N→碱性→利于酶制剂生产（产酶需N元素）※产酶微

3、生物1.菌种要求：繁殖力强(繁殖周期短)产酶稳定，产酶能力强安全(不用病菌)利于发酵管理(易于发酵)2.常用产酶微生物：略※单菌落培养法：稀释涂平板，长单菌落，易于分离※透明圈法：例如:明胶作培养基可鉴别出产蛋白酶的菌落(明胶是蛋白质,蛋白酶可分解明胶)CaCO3作培养基可鉴别出产酸菌落(产生的酸可分解CaCO3,形成透明圈)※发酵管理1.温度、PH：最适生长温度、PH与最适产酶温度、PH不同,要实时监控、调节温度、PH温度：0-10oC;PH:酶活力范围内，防酶变性※调PH方法：CaCO3（备

4、用碱）磷酸缓冲液：维持PH稳定调C/N：只工业上适用，C/N↑→酸，C/N↓→碱2.增大溶氧量：(1)搅拌，使大气泡变为很多小气泡(2)加大通入氧气量3.气泡：⑴产生：搅拌发酵液增大溶氧量⑵危害：①阻碍CO2排出，使PH减小，使发酵液变酸，影响微生物生长、产酶②气泡过多会使菌液漫出，造成菌种污染⑶消除方法：机械消泡、化学试剂消泡、表面活性剂消泡4.湿度⑴开始：低⑵后来：高5.提高酶产量的方法①加诱导物②减阻遏物③转基因（获得产酶能力强的微生物去产酶）④加表面活性剂⑤加产酶促进剂微生物生长与产酶模

5、式※微生物生长与产酶模式微生物生长模式：调整期、对数期、平衡期、衰亡期产酶模式：1.同步合成型：调整期始产酶，平衡期始停产2.中期合成型：对数期始产酶，平衡期始停产3.滞后合成型：平衡期始产酶，衰退期始停产4.延续合成型：调整期始产酶，衰退期始停产※提高产酶能力的方法（变为延续合成型）1.非调整期始产酶（中期、滞后）：有营养物阻遏效应，减少营养阻遏物浓度2.平衡期始停产（同步、中期）：mRNA不稳水解，降温使mRNA稳