直抗阳性和免疫溶贫

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1、直接抗人球蛋白实验阳性和免疫溶血性贫血抗球蛋白试验-检测IgG通过抗人球蛋白抗体的特异性桥连作用，促进红细胞的凝集。可分为直接和间接抗球蛋白试验。直接抗球蛋白试验检查受检者红细胞在机体内是否被抗体致敏产生直抗阳性的条件自身免疫溶血性贫血溶血性输血反应新生儿溶血病间接抗球蛋白试验证实红细胞在体外被抗体结合的试验是检查血清中IgG抗体特异性或红细胞抗原的重要手段可用于未知抗体的检出与确认交叉配合试验确认抗原间接抗球蛋白试验步骤1：致敏步骤2：洗涤步骤3：加入抗人球蛋白试剂（AHG）增强介质可以增强反应性和减少孵育时间LISS电解质增加溶液的介电常数，减弱

2、了抗原抗体的静电作用。降低离子强度可以显著增加抗原抗体结合率Polybrene碱性高分子物质，有效中和红细胞表面负电荷，降低zeta电位，缩短红细胞之间的距离PeG极强的亲水性，减少红细胞与抗体周围的水分22％BovinealbuminEnzymes增强介质柱凝集（Columnagglutination）固相技术（Solid-phasetechnology）RedbloodcellspanelPlasmaorserumScreenDiluentNanoLysAnti-HumanGlobulin(AHG)复合方法抗体筛选方法1.DispensingH1

3、H2H3ScreenNanoLysDiluent60µlof12µlof60µlof15µlofScreenserumorNanoLysHemascreenDiluentplasmaScreenLys1,2,32.Incubation20’at37°C3.ShakeandMagnetizeinthesametime抗体筛选方法MAGNETMAGNETMAGNETMAGNETDAT阳性血液标本的收集EDTA抗凝血提供红细胞DAT测定，定型，洗脱，自身吸收不抗凝血提供血清抗体筛选，抗体鉴定DAT阳性血清学研究多特异性抗球蛋白，抗IgG，抗C3测定附着在红

4、细胞上的免疫球蛋白的类型血清抗体筛选与鉴定自身抗体，同种抗体自身＋同种抗体放散试验确认附着抗体的特异性直抗（IgG）阳性，而血清与洗脱液皆无反应需进一步研究：药物处理细胞，A和B细胞，酶处理细胞红细胞鉴定定型ABO/Rh，磷酸氯奎放散，收集网织红细胞DATIgG，C3•放散阴性：A和B细胞，酶处理，药物处理细胞阳性：同种抗体，自身抗体，同种＋自身自身吸收血清抗体鉴定阳性自身抗体温抗体，冷抗体同种抗体特异性鉴定自身吸收鉴定同种抗体阴性IgG抗A，抗B抗体酶处理细胞药物依赖抗体抗体放散方法方法用途要点Luifreeze-thawABOHDFN快速；红细胞

5、用量少；其它抗体难放散Heat(560C)ABOHDFN；容易；IgG同种和自身IgM凝集抗体抗体难放散酸放散试剂盒温自身和同种抗体容易；当高效价的抗体存在时放散液有假阳性洋地黄皂苷酸温自身和同种抗体洗涤消耗时间乙醚放散温自身和同种抗体红细胞疾病红细胞增多红细胞减少红细胞生成减少红细胞破坏过多（溶血性贫血）红细胞丢失过多溶血性贫血红细胞内在缺陷遗传性红细胞增多症红细胞酶缺乏的贫血珠蛋白生成障碍性贫血异常血红蛋白病阵发性睡眠性血红蛋白尿症红细胞外来因素免疫溶血性贫血机械性溶血性贫血其它因素引起的溶血性贫血免疫溶血性贫血的分类自身免疫溶血性贫血（AIHA

6、）WarmAIHA(WAIHA)ColdAgglutininSyndrone(CAS)Mixed-typeAIHAParoxysmalColdHemoglobinura(PCH)DAT-negativeAIHA同种免疫溶血性贫血HemolyticTransfusionReactionHemolyticDiseaseoftheFetusandNewborn(HDFN)药物诱发的免疫溶血性贫血Drug-dependentDrug-independent自身免疫溶血性贫血的血清学特征WAIHACASMixed-PCHtypeAIHADATIgGC3only

7、IgG+C3C3onlyIgG+C3C3C3免疫抗体IgGIgMIgG,IgMIgG类型放散液IgG抗体没有反应IgG抗体没有反应IAT；在20C，IgM凝集抗体，IgGIAT-反应在DLT试验中血清35%未凝集4C效价>1000抗体和IgM凝集IgG双相溶血(60%)抗体广范围反应；多通常为抗I通常未知抗P特异性种特异性报道温抗体型自身免疫溶血性贫血(WAIHA)发病率1/80000，女性比男性高，年龄多数>40病因分类网状内皮细胞肿瘤慢性淋巴瘤;霍奇金病;非霍奇金淋巴瘤病胶原病系统性红斑狼疮;类风湿性关节炎等免疫性疾病免疫缺陷综合症;低球蛋白血症

8、等胃肠道疾病某些良性肿瘤WAIHA发病机制免疫调节紊乱•免疫器官对自身红细胞失去识别能力•红细胞膜损伤，改变