日生化需氧量的测定B

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1、实验六五日生化需氧量的测定——BOD5一、目的和要求了解BOD5测定的意义及稀释与接种法测BOD5的基本原理。掌握本方法操作技能，如稀释水的制备、稀释倍数选择、稀释水的校核和溶解氧的测定等。二、原理生化需氧量是指在好氧条件下，微生物分解存在水中的有机物质的生物化学过程中所需的溶解氧量。根据参加反应的物质和最终生成的物质，可用下列的反应式来概括生物化学反应过程：酶6C6H12O6+16O2+4NH34C5H7O2N+16CO2+28H2O微生物有机污染物CO2+H2O+NH3O2微生物分解有机物是一个缓慢的过程，要把可分解的有机物全部分

2、解掉常需要20d以上的时间，微生物的活动与温度有关，所以测定生化需氧量时，常以20℃作为测定的标准温度。一般来说，在第5天消耗的氧量大约是总需氧量的70%，为便于测定，目前国内外普遍采用20℃培养5d所需溶解氧含量作为指标，单位以的mg/L表示，简称BOD5。水体发生生物化学过程必须具备：水体中存在能降解有机物的好氧微生物。对易降解的有机物，如碳水化合物、脂肪酸、油脂等，一般微生物均能将其降解，如硝基或硫酸取代芳烃等，则必须进行生物菌种驯化。有足够的溶解氧。为此，实验用的稀释水要充分曝气以达到氧的饱和或接近饱和。稀释还可以降低水中有机

3、污染物的浓度，使整个分解过程在有足够的溶解氧的条件下进行。有微生物生长所需的营养物质。本实验加入了一定量的无机营养物物质，如磷盐酸、钙盐、镁盐和铁盐等。稀释法测定BOD5是将水样经过适当稀释后，使其中含有足够的溶解氧供微生物5d生化需氧的要求，将此水样分成两份。一份测定培养前的溶解氧；另一份放入20℃恒温箱内培养5d后测定溶解氧，两者的差值即为BOD5。水中有机污染物的含量越高，水中溶解氧消耗愈多，BOD5值也愈高，水质愈差。BOD5是一种量度水中可被生物降解部分有机物（包括某些无机物）的综合指标，常用来评价水体有机物的污染程度，并已

4、成为污水处理过程中的一项基本指标。三、仪器与试剂恒温培养箱[（20+1）℃]。20L细口玻璃瓶。1000～2000mL量筒。特制搅拌棒，在玻璃下端安装一个2mm厚，大小和量筒相匹配的有孔橡皮片。250~300mL碘量瓶，带有磨口玻璃塞并具有供水封用的钟形口。虹吸管，供分取水样和添加稀释水用。氯化钙溶液。称取27.5g无水氯化钙，溶于水中，稀释至1000mL。三氯化铁溶液。称取0.25g三氯化铁（FeCl3·6H2O），溶于水中，稀释至1000mL。硫酸镁溶液。称取22.5g硫酸镁（MgSO4·7H2O）,溶于水中，稀释至1000mL。

5、磷酸盐溶液。称取8.5g磷酸二氢钾（KH2PO4）、21.75g磷酸氢二钾（K2HPO4）、33.4g磷酸氢二钠（NaHPO4·7H2O）和1.7g氯化氨（NH4Cl），溶于约500mL水中，稀释至1000mL并混合均匀，此缓冲溶液的pH应为7.2。葡萄糖-谷氨酸溶液。分别称取150mg葡萄糖和谷氨酸（均于130℃烘过1h），溶于水中，稀释至1000mL。盐酸溶液，0.5mol/L。氢氧化钠溶液，0.5mol/L。稀释水。在20L玻璃瓶内加入18L水，控制水温在20℃左右，用抽气或无油压缩机通入清洁空气2~8h，使水中溶解氧饱和或接近

6、饱和（20℃时溶解氧大于8mg/L）。使用前，每升水中加入氯化钙溶液、三氯化铁溶液、硫酸镁溶液和磷酸盐溶液各1mL，混合均匀。稀释水pH值应为7.2，其BOD5值应小于0.2mg/L。接种稀释水。取适量生活污水于20℃放置24~36h，上层清液即为接种液，每升稀释水中加入1~3mL接种液即为接种稀释水。接种稀释水pH值应为7.2，其BOD5值以在0.3～1.0mg/L之间为宜，接种稀释水配制后应立即使用。对某些特殊工业废水最好加入专门培养驯化过的菌种。其他溶液。与碘量法测定溶解氧实验相同的硫酸锰溶液、碱性碘化钾溶液、（1+5）硫酸、0

7、.025mol硫代硫酸钠标准溶液和1%的淀粉溶液（详见实验四“水中溶解氧的测定”）。四、实验步骤1、水样的采集、存储和预处理采集水样于适当大小的玻璃瓶中（根据水质情况而定），用玻璃塞塞紧，且不留气泡。采样后，需在2h内测定；否则，应在4℃或4℃以下保存，且应在采集后10h内测定。用1mol/L氢氧化钠溶液或1mol/L盐酸溶液调节pH值接近7。游离氯大于0.10mg/L的水样，加亚硫酸钠或硫代硫酸钠除去[见注意事项1]。确定稀释倍数[见注意事项2]。2、水样的稀释根据确定的稀释倍数，用虹吸法把一定量的污水引入1000mL量筒中，再沿壁

8、慢慢加入所需稀释水（接种稀释水），用特制搅拌棒在水面以下慢慢搅匀（不应产生气泡），然后沿瓶壁慢慢倾入两个预先编号、体积相同的(250mL)的碘量瓶中，直到充满后溢出少许为止。盖严并水封，注意瓶内不有气泡。用同样方法配置另