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时间:2019-07-08
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1、实验二、细菌的制片和染色实验报告存在问题实验结果画图:菌体空心,不规范实验目的:1、复习显微镜油镜的使用;2、掌握细菌制片和单染色方法;3、了解革兰氏染色法的基本原理和掌握细菌的革兰氏染色法涂片干燥固定细菌的制片和单染色过程问题在细菌制片时是否可以不干燥而直接固定?干燥了是否仍然还必须固定?涂片干燥固定细菌的制片和单染色过程染色1~2min水洗、干燥镜检结晶紫番红细菌的革兰氏染色革兰染色法(Gramstain)是细菌学上最经典的、使用最广泛的一种染色方法。由丹麦细菌学家革兰(ChristianGram)于
2、1884年创立。主要由于细菌细胞壁的结构和组成不同,将绝大多数的细菌分成革兰氏阳性菌(G+)和革兰氏阴性菌(G-)一种复染色的方法结晶紫初染碘液媒染酒精洗脱复红复染革兰氏染色的主要过程肽聚糖革兰氏染色原理操作步骤沙黄或石炭酸复红1min结晶紫1minI-KI1min95%乙醇脱色5~20s镜检制片水洗、稍干水洗、稍干水洗、稍干水洗、干燥无色初染媒染脱色复染结果革兰氏染色注意事项涂片务求均匀,切忌太厚染料必须覆盖所有涂片区域,染料不要干枯脱色时间要把握好必须选用适龄菌体设置对照实验内容1、对大肠杆菌(0.5
3、μm×2μm)进行制片和单染色,用油镜观察其形态2、对大肠杆菌、苏云金芽孢杆菌进行革兰氏染色(混合涂片、单独涂片),通过油镜观察染色结果实验报告1、图示大肠杆菌显微镜观察结果。2、用文字说明两种细菌革兰氏染色结果,并进行分析讨论。3、思考题:影响革兰氏染色结果的因素有哪些?如何保证革兰氏染色结果的可靠性。
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