实验二气孔状态观察

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1、1.实验材料准备不足，影响了实验完成。2.怀疑铝盒在烘干前有水分，为何不称一下烘干后的铝盒重量呢？可以换算出来正确的鲜重和干重。3.试管的刻度不准确，应该用移液管来统一量取。4.结合含水量和水势进行比较分析。实验一环境因素对植物水分状态的影响存在问题：实验二气孔运动的调节（Ⅰ）气孔密度的观察（Ⅱ）钾离子对气孔开度的影响肾形（双子叶植物）哑铃形（单子叶植物）气孔密度：单位叶片面积上的气孔数（显微镜视野面积内观测到的气孔数）气孔开度：保卫细胞内壁间跨距开度不同植物气孔的数目和大小掌握测定气孔密度和开度的方法；学会分析影响

2、因素对气孔运动的调节；学会利用显微镜物镜测微尺（物尺）标定目镜测微尺（目尺）的方法。1.实验目的2.1印迹法以有机物质的溶胶（火棉胶、牛皮胶、醋酸纤维素胶、指甲油等）涂在植物的表面,胶体风干后凝成薄膜，这层膜上印有表皮组织各细胞的界迹边痕，从而显示出气孔的开闭情况。将印膜撕下，供观察和测量。除用来观察气孔状况外，还可用于观测植物表皮上的细胞、茸毛、蜜腺、蜜盘、刺、鳞片等。优点:非破坏性取样；方便快捷。缺陷:界迹边痕不明显的样品印迹模糊；凹陷气孔难以取到印迹；清晰薄膜制作有难度。2.实验原理2.2固定法优点:镜下观察较

3、印迹法的醒目；植物材料可长期保存；凹陷气孔仍可观察。缺陷:破坏性取样；不适用于下表皮难于剥离的样品观察。无水乙醇能使植物细胞迅速脱水、死亡，因而细胞壁硬化、细胞形状固定，气孔也得以保持原形，有利于以后镜检研究。2.3K+对气孔开度的影响气孔运动的机制（4种假说）:淀粉与糖转化学说K+积累学说苹果酸代谢学说玉米黄素假说在光下，保卫细胞中的叶绿体通过光合磷酸化生成ATP，ATP驱动质膜上的K+-H+泵，使保卫细胞能逆浓度梯度从周围表皮细胞吸收K+，或从外界溶液中吸收K+，从而降低其渗透势，促进保卫细胞吸水，气孔开放。K+

4、在保卫细胞的积累，可以促进气孔开放。Na+可以代替K+，使气孔开放，但效果如何？K+积累学说蚕豆叶片，竹叶菜（Commelinabenghalensis）载玻片、盖玻片、显微镜、测微尺、培养皿印迹法：火棉胶、棉花球、镊子、刀片；固定法：无水酒精、镊子0.5%KNO3、NaNO3溶液光源（生长箱或自然光）3.材料、仪器设备与试剂目镜测微尺(目尺)：是一块可放在目镜内隔板上的圆形小玻片，其中央有精确的等分刻度，有等分为50小格和100小格两种。用以测量经显微镜放大后的物像大小。刻度大小随放大倍数变化而改变。物镜测微尺(物

5、尺)：是中央部分刻有精确等分线的载玻片，一般是将1mm等分为100格，每格长10μm。实际长度不受放大倍数影响。专用于校正目镜测微尺(目尺)每格的相对长度。目镜测微尺物镜测微尺4.实验步骤1）计算显微镜视野直径和面积（40×，物尺）物尺放在视野直径线计算直径，视野面积S=π(d/2)2。2）用物尺标定目尺（40×）由于不同显微镜镜筒长度不同，或不同的目镜和物镜组合放大倍数不同，目尺每小格所代表的实际长度也不一样。因此，用目尺测量物体大小时，必须先用物尺校正，以计算出在一定放大倍数目镜和物镜下目尺所代表的实际长度，然后

6、才能用来测量物体大小。低倍镜下找到物尺，并移至视野中部，高倍镜下标定目尺。目尺每格＝10×20/29（μm）目尺物尺每格10μm目尺29格对物尺20格视野10格目尺r=?计算气孔密度17格目尺对应6格物尺目尺每格＝6×10/17（um）测气孔大小目尺17格物尺6格计算气孔开度？μm将火棉胶均匀涂抹于叶片下表皮表面，风干2min，用镊子揭开一层薄膜；将薄膜平铺在稍有湿润(哈气)的载玻片上，压上盖玻片，镜检；低倍镜下选视野，高倍镜下观察记数，观察3个视野的气孔数目。3）印记法观察气孔密度4）固定法观察气孔密度用镊子撕剥叶

7、片下表皮（用刀片切一小口以利于撕取或直接将镊尖插入下表皮后侧拉），迅速（愈快愈好）放入无水乙醇中固定2～3min，把固定好的表皮平放在载玻片上，加几滴无水乙醇，压上盖玻片，镜检，低倍镜下选视野，高倍镜下观察记数，观察3个视野的气孔数目。5）K+、Na+对气孔开度的影响3个培养皿中分别放0.5%KNO3、0.5%NaNO3溶液和蒸馏水各15ml；每个培养皿放2~3张从相似叶位/相近大小的叶片上取下的下表皮；25℃下，光照处理60min；依次制片和镜下观察气孔开度，记录与开度相应的目尺格数。每个处理随机观察5个气孔。实验

8、步骤1）计算显微镜视野直径和面积（40×，物尺）2）用物尺标定目尺（40×）3）印记法观察气孔密度：将火棉胶均匀涂抹于叶片下表皮表面，风干2min，用镊子揭开一层薄膜；将薄膜平铺在稍有湿润(哈气)的载玻片上，压上盖玻片，镜检，观察3个视野的气孔数目。4）固定法观察气孔密度：用镊子撕剥叶片下表皮，迅速放入无水乙醇中固定2～3min，把固定好的表皮