福建福州三月质检

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1、福建福州三月质检将PVY病毒外壳蛋白基因(PVY-CP)导入马铃薯，并使之表达即可获得抗PVY病毒马铃薯。图示是获得抗病毒马铃薯的部分操作，PVY-CP可以从质粒A中获取；质粒B是选用的运载体，另已知部分限制酶识别序列和切割位点：BamHⅠHindⅢBglⅡSmaⅠG↓GATCCCCTAG↑GA↓AGCTTTTCGA↑AA↓GATCTTCTAG↑ACCC↓GGGGGG↑CCC请结合图像，运用所学知识回答问题：(1)含有PVY-CP的质粒A保存在某细菌群体中，各个细菌含有相关不同的基因，这样的细菌群体称为_____________。(2)关于步骤②中Ⅺeno

2、w酶的猜测，合理的是_____________。A．催化合成的片段起引物作用B．可以将DNA片段的粘性末端变成平末端C．能催化DNA链的合成D．与DNA连接酶的功能相同(3)步骤④中应该使用的限制酶是________。(4)利用农杆菌转化法进行转化，首先需要将质粒C导入________中，进而转化马铃薯薯片，然后通过________技术获得抗PVY病毒马铃薯苗，最后进行相关的鉴定。（1）基因文库（部分基因组文库、基因组文库给分）。（2）BC（3）BglⅡ、SmaⅠ(仅答出一种酶给1分)（4）农杆菌植物组织培养湖北襄阳五中（1）目的基因主要是指的基因，也可以

3、是一些具有的因子。（2）是基因工程的核心，cDNA文库属于基因文库，（3）PCR是一项利用原理在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术，其需要的酶是。（4）从分子水平检测目的基因是否翻译可以用方法，若有出现，表明目的基因已形成蛋白质产品。（1）编码蛋白质调控作用（2）基因表达载体的构建部分（3）DNA（双链）复制热稳定DNA聚合酶（Taq酶）（1分）（4）抗原-抗体杂交杂交带湖北襄阳五中普通番茄细胞中含多聚半乳糖醛酸酶基因（用A表示），控制细胞产生多聚半乳糖醛酸酶，该酶能破坏细胞壁，使番茄易软化，不耐储藏。抗多聚半乳糖醛酸酶基因可以使番茄不再产生多聚半乳

4、糖醛酸酶，从而使番茄长时间抗软化，容易储存和运输。下图是通过基因工程培育抗软化耐储藏番茄的过程及原理。请分析回答下列问题：（1）普通番茄（AA）也可以通过__________育种的方法，最终获得基因型为aa（不能合成多聚半乳糖醛酸酶）的抗软化、耐储存的番茄。（2）利用基因工程将目的基因导入植物细胞，目前采用最多的方法是__________，该方法中用到的目的基因载体是__________，目的基因需插入到该基因载体的__________上。（3）图1中获得导入抗多聚半乳糖醛酸酶基因的番茄细胞，需要经过__________技术获得转基因番茄，细胞先经脱分化形

5、成__________，再形成丛芽和根。（4）根据图2分析抗多聚半乳糖醛酸酶基因能使番茄抗软化的原理是两个基因分别转录出的mRNA__________，从而阻断了__________过程。（1）诱变（1分）（2）农杆菌转化法Ti质粒T-DNA（3）植物组织培养愈伤组织（4）结合形成双链RNA基因的表达福建福州五月质检为了提高乙肝疫苗的预防效果，科学家们对于该疫苗的研发过程做如下的改进：提取乙肝病毒（HBV）基因重组后，与β-半乳糖苷酶基因结合，形成重组质粒BPT（如图1），随后的操作如图2，请回答下列问题：重组质粒BPT大肠杆菌融合蛋白P-BPT实验小鼠体

6、内特异性免疫应答HBV重组基因BAβ-半乳糖苷酶基因图一图二（1）在图一中_____（A/B）插入终止子。构建重组质粒BPT必须使用__________作为工具酶。（2）从大肠杆菌中提取融合蛋白P-BPT仍需进一步修饰、纯化。其主要原因是因为大肠杆菌不具备__________（细胞器）。（3）实验中抽取小鼠脾的淋巴细胞进行细胞培养，在培养基中需要添加_______防止杂菌生长。从分子水平上使用__________对特异性免疫应答结果进行检测。（1）B（2分）限制酶，DNA连接酶（2分）（2）内质网，高尔基体（2分）（3）抗生素（2分）抗原-抗体杂交（2分）

7、河北名师俱乐部右图是基因工程的模式图，请据图回答下列问题：（1）常用的获取目的基因的方法有从基因文库中获取和；从基因文库中提取的目的基因通过PCR进行扩增时，需使用一种特殊的酶是。（2）构建基因表达载体的目的是使目的基因在受体细胞中，且能够表达和发挥作用。它的组成中的启动子、终止子的化学实质为。（3）将表达载体导人动物的受精卵中，一般采用技术。在抗虫农作物的培育过程中，将Bt毒蛋白基因导入农作物受体细胞时，常用的方法是。将目的基因导入大肠杆菌时，需用Ca2+处理，使其成为一种细胞。（4）检测细菌的目的基因是否转录出mRNA时，需要作探针，再与相应的物质杂交

8、。（1）人工合成（1分）热稳定的DNA聚合酶（或Taq酶）（2分）