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1、饲料原料中非蛋白氮(NPN)的鉴别山东六和集团技术部郭吉原一.目前NPN的种类A铵盐(NH4HCO3、(NH4)2SO4、NH4Cl)、尿素B尿素的衍生物:缩二脲、磷酸脲、淀粉糊化尿素、脲醛聚合物(蛋白精)、糠醛尿素、糖基化尿素C叠氮化钙CaN6D三聚氰胺C3N6H6◆脲醛聚合物和三聚氰胺是目前最常用的NPN脲醛聚合物(蛋白精)(CP=10元),三聚氰胺(CP=20元)二.NPN的鉴别(1)---尿素试剂:1.生黄豆粉。将大豆磨成粉末（注意；切勿加热升温)2.酚红：１g/L。称取酚红（苯酚红）0.1g溶于100ml乙醇中。步骤：取约0.5-2g样品，于5
2、0ml比色管内，再加约0.1-0.2g生黄豆粉，3－5滴酚红，40ml水，塞好塞子，摇动30秒，静止，如溶液变成红色，则样品中掺入尿素二.NPN的鉴别(1)---尿素定量分析:称样1-3g于碘量瓶内,加生豆粉约1克,准确加入100ml水,在30°C摇动1h,过滤,取滤液50ml于蛋白仪内,加NaOH(30%)10ml,用硼酸吸收,再用盐酸滴定,同时做样品和生豆粉空白.CP=(V-V0-V01)xCx0.014x6.25mx50/100x100二.NPN的鉴别(2)---铵盐◆试剂氢氧化钠溶液３０％,３０g氢氧化钠加７０ml水。PH试纸◆步骤：取样品3-5
3、g于100ml烧杯内，表皿内侧沾一条湿的PH试纸，向烧杯内加约5-10ml氢氧化钠，将表皿迅速盖上，如试纸迅速变蓝，打开表皿有很浓的氨味则含铵盐。二.NPN的鉴别(3)---脲醛聚合物(蛋白精◆试剂：变色酸2g/L硫酸溶液称取0.2g变色酸于干燥的烧杯内，加入100ml浓硫酸，电炉上加热到约70-80℃，待溶解后，降温，移入120ml棕色的滴瓶内。◆步骤：将可疑物从显微镜下夹出数粒于干燥的小烧杯内，滴加约1ml变色酸，电炉上加热到刚刚产生微烟，取下，加入约30ml水，若溶液变成稳定的紫色，则样品中有蛋白精。二.NPN的鉴别(3)---脲醛聚合物(蛋白精1
4、.鱼粉肉骨粉除去伪装方法：任何掺假的鱼粉均要做一番伪装，如直接将经伪装过鱼粉放在显微镜下看很难发现真实情况，因此镜检前应首先要除去伪装，最有效的方法就是脱脂，具体做法如下：鱼粉肉骨粉除去伪装方法(1)(1)将少许鱼粉（3-5g）用定性滤纸包好，放入索氏脂肪抽提器内，以石油醚作提取剂，脱脂约30分钟，至石油醚中看不到黄色为止，将纸包取出，水浴上烘干（70-80℃）。(2)将少许鱼粉（3-5g）放入烧杯内，加入50ml石油醚，搅拌2分钟，过滤，将滤渣放回烧杯，加50ml石油醚，搅拌2分钟，过滤。将滤渣烘干（70-80℃）。鱼粉肉骨粉除去伪装方法(2)(3)将
5、少许鱼粉（3-5g）放入烧杯内，加丙酮50ml搅拌2分钟，静止5分钟，将上清液弃去，再加50ml石油醚搅拌2分钟，静止5分钟，弃去上清液，将下部分的鱼粉烘干（70-80℃）。(4)将少许鱼粉（约3g）放入烧杯内,加3gKOH(NaOH),再150ml水搅拌后在放电炉煮沸2分钟,静止5分钟,倒掉上清液,用水洗残渣3-4次,再用丙酮50ml洗残渣2-3次,残渣用于蛋白精和含大量粗纤维类物质(如锯末、稻草、麦芽根)的检测鱼粉肉骨粉除去伪装方法(3)(5)将少许鱼粉（约3-5g）放入分液漏斗中,加四氯化碳50-80ml,轻轻摇动后静止5分钟,把分液漏斗活拴打开将
6、沉淀物放到一小烧杯内,之后将小烧杯内沉淀物过滤出来,此残渣用于蛋白精的检测.请注意：乙醚、丙酮、石油醚均为易燃品，请在通风的条件下操作，严禁烟火。三.其它定性检查的方法A.掺入植物类物质（如小麦麸、稻谷壳、粉丝蛋白粉）试剂：碘-碘化钾溶液称1g的碘及5g碘化钾于烧杯内，加100ml水搅拌2分钟，待溶解后将其移入120ml棕色的滴瓶内。◆步骤：取约5g样品放在烧杯内，加约70ml水，在电炉上煮沸，取下静止2分钟，滴加碘－碘化钾试剂１-2ml，如溶液变成蓝色则掺入植物性的物质三.其它定性检查的方法B.掺入植物性物质（含大量粗纤维类物质：如锯末、稻草、麦芽根）
7、试剂：1.间苯三酚20g/L称间苯三酚2g加100ml95%乙醇，溶解后放入棕色滴瓶2.浓盐酸36%分析纯步骤：称1-2g鱼粉于培养皿内，滴加间苯三酚使样品湿润，放置5-10分钟后，滴加浓盐酸约0.5ml，放置2-3分钟，如样品显现深红色，则样品中含木质素，在显微镜下进一步确认为何物。三.其它定性检查的方法C.掺入皮革粉试剂:1.稀硫酸2mol/L将取10ml浓硫酸慢慢加入到90ml水中。2.二苯基卡巴腙2g/L称0.2g二苯基卡巴腙，加入100ml95%乙醇，溶解后，移入棕色滴瓶内。步骤：取1-3g鱼粉于坩埚内，在电炉上炭化，再放在马弗炉内于550-6
8、00℃下灰化2小时，取出，降温后，加入稀硫酸10ml搅拌，加二苯基卡巴腙5-10
