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时间:2019-06-24
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1、糖皮质激素对胃分泌物的影响小组成员:实验内容:实验目的实验原理实验材料实验器材、药品实验方法预期结果可能出现的问题注意事项实验目的:了解糖皮质激素对胃分泌物的影响,即对胃酸(游离酸、结合酸)、胃蛋白酶、黏液分泌的影响。通过学习胃分泌物的作用机制,了解短期和长期服用糖皮质激素的患者(如:哮喘)可能会出现的药物产生的胃部问题。实验原理:糖皮质激素作用很广泛,不仅调节糖代谢,还参与机体多种生理功能的调节。如糖皮质激素可作用于消化系统,促进胃液,胃蛋白酶等的分泌,并抑制胃黏液的分泌,降低胃黏膜的抵抗力。胃黏膜有许多腺体,
2、胃底和胃体黏膜的腺体分泌胃蛋白酶和胃酸。在一般情况下,胃液的分泌受神经和体液调节。其长期大量应用(如:哮喘)可诱发消化性溃疡,糖皮质激素也能掩盖溃疡的初期症状,以致出现突发出血和穿孔等严重并发症。实验材料:大白鼠(禁食24小时)实验器材、药品:器材:哺乳类动物手术器械,鼠板,直径2mm长20cm的细塑料管,纱布,试管若干支,碱式滴定管,2ml和5ml注射器,分光光度仪,胃插管,ph试纸,离心机,锥形瓶。药品:1%戊巴比妥钠、生理盐水、糖皮质激素、柠檬酸—磷酸缓冲液(PH5.8)、1%阿新蓝、0.2%HCL、若干块纤
3、维蛋白、0.1%胃蛋白酶、1%NaHCO3。实验方法:麻醉大白鼠:用1%戊巴比妥钠(30—50mg∕kg)腹腔麻醉。a.备皮:颈部及上腹正中剑突处。b.颈部手术:在颈部作长约1.5cm的皮肤切口,分离肌肉,暴露气管,分离气侧的食管,将插管经食管插入胃内,环线结扎以固定插管。(2)手术:c.腹部手术:在上腹正中剑突下作一切口,打开腹腔,用温热的生理盐水纱布将胃轻轻拉出腹腔置于腹外,上下均用湿纱布覆盖,并在胃与十二指肠交界处做一插管。用注射器将大量温热的生理盐水冲洗胃,是残留食物由胃插管流出体外,流出的生理盐水澄清时即
4、表示胃被洗净,然后将胃放回腹腔。将大白鼠固定站立在固定架上,固定好后把腹腔合拢,使插管游离在腹腔外。并用台灯照射以维持动物体温。d.固定:(3)实验项目:a、30min后将5ml的生理盐水由食管插管射入,同时在腹腔插管下端用试管收集由幽门端流出的液体2min,连续冲洗3次,收集3个胃液样品,分别标记为A、B、C管,作为对照。b、用注射器将大量生理盐水射入食管端插管冲洗胃。静脉注射4ml糖皮质激素并由食管端注入5ml生理盐水,同时在腹腔插管下端用试管收集由幽门端流出的液体2min,连续冲洗3次,收集3个胃液样品,分别
5、标记为D、E、F管,做为实验项。c、胃液中各种分泌物的测定:(1)、胃酸的测定:吸取2ml胃液于锥形瓶中,加入1滴1%酚酞作为指示剂,用0.1mol/LNaOH滴定,当出现红橙色(PH为7)时所消耗的碱量(ml)乘以2,即为胃液中游离酸的含量。(2)、总酸的测定:继续以0.1mol/LNaOH滴定,使溶液完全的柠檬黄后,再滴定至浅红色为止,所消耗碱的量(包括滴定游离酸耗用的量)乘以2,即为胃液的总酸量。(3)、胃蛋白酶的测定:标号实验项试管一0.2%HCL1ml+一块纤维蛋白试管二0.1%胃蛋白酶1ml+一块纤维蛋
6、白试管三0.1%胃蛋白酶+1ml1%NaHCO3+一块纤维蛋白试管四0.1%胃蛋白酶1ml煮沸冷却+一块纤维蛋白试管五胃液1ml+一块纤维蛋白5支试管均放入37℃的恒温水中经0.5—1小时后取出并观察变化按照上述表格内容对A、B、C、D、E、F管中分泌物均作胃蛋白酶的测定。(4)、胃黏液的测定:试管一试管二胃液1ml——0.2%HCL1ml——1%阿新蓝0.1ml柠檬酸—磷酸缓冲液(PH5.8)3.3ml均加蒸馏水至5ml,混匀于室温放置24小时,2500r/min离心10分钟,取上清液测定615nm波长的吸光度。
7、两管的吸光度差值即为阿新蓝与胃液中黏液的结合量,用阿新蓝毫克数表示黏液含量。预期结果:静脉注射糖皮质激后,测定的胃液,胃蛋白酶量增加,胃黏液量减少。可能出现的问题:由于糖皮质激素的用量无法准确把握,可能会影响实验结果。可能由于个体差异,出现对糖皮质激素的过敏现象或其他反应,导致影响实验结果。注意事项:为保证胃液分泌,大白鼠不宜麻醉太深。实验对象大白鼠,在对其进行实验前24小时禁食,但不能禁水。手术操作要仔细,尽量减少损伤和出血,插管时不得刺破胃壁。课题总结:糖皮质激素可促进胃液,胃蛋白酶分泌,抑制胃黏液分泌。参考文
8、献:张才乔,曾卫东主编.动物生理学实验教程.浙江:浙江大学出版社,2004解景田,赵静主编.生理学实验.北京:高等教育出版社,2002谢谢
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