《疫学检测实验》PPT课件

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1、一、抗原抗体的检测（一）检测原理抗原与相应抗体可发生特异性结合，并在外界条件影响下出现肉眼可见或借助仪器可检测的各种现象，如凝集或沉淀。借此可用已知抗体（或抗原）检测未知抗原（或抗体），因所采用的抗体常存在于血清中，故称为血清学反应。AgAgAgAgAgAgAgAg(二)抗原抗体反应的特点1、特异性2、Ag-Ab结合的带现象与可见性3、可逆性AgV区抗原决定基postzoneprozone前带现象后带现象4、反应的阶段性（三）影响抗原抗体反应的因素抗原抗体结合过程可分为两个阶段：一是特异性结合阶段，二是可见反应阶段。1、电解质2、温度3、酸碱度

2、第二反应阶段易受三方面影响。中性或弱碱性370CPH6-8正常人体内环境（四）抗原抗体反应的基本检测方法1、凝集反应细菌、红细胞等颗粒性抗原与相应抗体结合后形成凝集团块，此类反应称为凝集反应。+红细胞抗红细胞抗体（IgM）凝集根据抗原的性质、出现结果的现象、参与反应的成分的不同，抗原抗体的反应可分为凝集反应、沉淀反应、免疫标记技术等。（1）直接凝集红细胞抗红细胞抗体（IgG）+凝集用于：ABO血型测定细菌鉴定（肥达试验）（2）间接凝集激素抗体激素分子不凝集+激素抗体激素包被的乳胶颗粒+凝集常用载体：绵羊红细胞、聚苯乙烯乳胶等。用于：钩端螺旋体病

3、、血吸虫病、类风湿关节炎的辅助诊断。间接血凝（3）间接凝集抑制试验用于：早孕的检测++激素分子不凝集（4）协同凝集实验2、沉淀反应可溶性抗原与相应抗体在有适量电解质存在下，出现肉眼可见的沉淀现象，称为沉淀反应。该反应多用半固体琼脂凝胶作为介质进行琼脂扩散或免疫扩散，即可溶性抗原与抗体在凝胶中扩散，在比例合适处相遇形成可见的白色沉淀现象。（1）单向免疫扩散（2）双向免疫扩散（3）对流免疫电泳（4）免疫比浊（1）单向免疫扩散Ab待测血清（Ag）不同浓度的标准血清浓度直径（对数）d’c’d’火箭电泳（2）双向免疫扩散AgAb将抗原与抗体分别加入琼脂凝

4、胶的小孔中，抗原抗体会自由地向四周扩散，在它们相遇的位置形成一条沉淀线。是一种定性检测法。Ag1Ag1Ab1Ag1Ag2Ab1、2Ag1Ab1、2Ag1、2（3）免疫电泳（4）免疫比浊待测AgAb槽已知Ag+-Ag2Ag3Ag1Ag’根据不同量抗原抗体反应所形成的浊度不同判断样品中未抗原的含量。3.补体结合试验ComplementFixationAgmixedwithtestserumtobeassayedforAbStandardamountofcomplementisaddedErythrocytescoatedwithAbsisadded

5、AmountoferythrocytelysisisdeterminedAgPatient’sserumAgNoAgAgMethodology3、免疫标记技术免疫标记技术是用荧光素、酶、放射性核素、胶体金或化学发光等标记抗体或抗原，利用标记技术的高度敏感性进行抗原抗体检测。可见AgAgAgAgAgAgAgAgAgAgAg优点:灵敏度高、快速、可定性、定量、定位。分类：根据标记物的不同免疫标记技术可分为免疫荧光技术、免疫酶技术、放射免疫技术、胶体金和化学发光技术。胶体金标记技术检测抗原免疫标记技术检测抗体思考题抗原与抗体反应的特点是什么？抗原与抗

6、体反应有哪些基本类型？设计实验方案：市场有一生物制剂有免疫增强作用，请设计实验方案从淋巴细胞数目及活性、淋巴细胞功能（淋巴细胞转化、淋巴细胞分泌细胞因子）等角度证实（分组提交）。