地衣芽孢杆菌营养要求的研究

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1、第17卷第4期河北省科学院学报Vol.17No.42000年11月JournaloftheHebeiAcademyofSciencesNov.2000文章编号:10019383(2000)04022404u地衣芽孢杆菌营养要求的研究胡尚勤,刘天贵(重庆师范学院生物系,重庆400047)摘要本文报道了地衣芽孢杆菌的营养要求,结果表明,以葡萄糖为碳源,多种氨基酸为氮源,地衣芽孢杆菌的最佳C/N为4~4.5!1。满足该菌对维生素H和必须氨基酸的需要以及主要无机7盐的需要时,其菌数最高为(3.55~6.7)

2、∀10/ml,可使菌数是对照的2.1~3.5倍。关键词地衣芽孢杆菌,营养要求中图分类号Q935文献标识码AThestudyofthenutritionRequirementofBacilluslicheniformisHUShangqin,LIUTiangui(DeptofBiology,ChongqingTeachersCollege,Chongqing400047China)AbstractNutritionrequirementofBacilluslicheniformisisreported.T

3、heresultsdemonstratethatoptimumC/Nis4~4.5!1,whenglucoseisusedascarbonsourceandaminoacidsareusedasnitrogensource.Iftheneedofthebacteria,inbothvarietyandquantity,forvitaminsHandneces7saryaminoacidsismet,thenumberofthebacteriacanbeincreasedto3.55~6.7∀10/mlandis2.1~3.5

4、timesasmanyasthatofthecontrast.KeywordsBacilluslicheniformis,Nutritionrequirement地衣芽孢杆菌是我国20世纪90年代从正常待产妇阴道拭子分离来出一株用于生产#整肠生∃微生态制剂的无毒菌株。据国内外资料检索,尚无该菌营养要求的研究,目前对该菌的%1&一些初步研究仅限于临床应用。本研究旨在对该菌的最佳C/N、矿质元素以及生长因子的种类和数量需要进行系统的基础研究。以弄清该菌的最佳营养要求,为厂家对该菌的应用生产提供了可靠的科学依据。1材料和方法1.

5、1菌种和培养基1.1.1菌种地衣芽孢杆菌(Bacilluslicheniformis)由重庆师范学院应用微生物研究室提供。%2&1.1.2培养基和药品∋牛肉膏,蛋白胨培养基;(合成培养基组成:分别以2.12g葡萄糖,乳糖1.06g,蔗糖1.06g为碳源,氨基酸为氮源(L脯氨酸0.099mg,L谷氨酸0.1mg,DL天冬酰胺0.107mg,赖氨酸0.107mg,精氨酸、丝氨酸、苯丙氨酸、组氨酸、蛋氨酸各0.1mg,亮氨酸0.091mg,天门冬氨酸0.104mg,苏氨酸0.099mg等各种氨基酸)并加入维生素B1,

6、B2,2+2+2+1+1+2+B3,B5,B6,B11和矿物质Mn,Mg,Cu,Na,K,Ca,各0.2mg,水100ml。1.2方法u收稿日期:20000714第4期胡尚勤等:地衣芽孢杆菌营养要求的研究2251.2.1菌量测定在每批组培养过程中和培养结束时,定时取样用10倍稀释法稀释后,准确%3&取样培养,菌落形成后,用光电自动菌落计数器法计数活菌数。1.2.2代谢产物的测定由于乳酸和丁二醇是该菌的主要代谢产物,所以根据产物与菌量的%4&关系亦可判断C/N是否适合。因此,用对羟基联苯72

7、1分光光度计法测定产物乳酸(La)量。2结果与讨论2.1地衣芽孢杆菌生长最适C/N的研究采用合成培养基(配方2)先选出最适碳源葡萄糖后,以葡萄糖为碳源进行试验。根据碳源和氮源的比例要求,精确计算和准确称量,配成葡萄糖为碳源,甘氨酸为氮源,其C/N为2.+2+2+2+1+2+0~6.5!1,C的间隔为0.5,K、Ca、Mg、Fe、Na、Mn、VB1、VB2、VB3、VB5、VB6、VB11各2mg/L。维生素和氨基酸分别用过滤除菌后加入用121)灭菌30min的无机盐溶液7中,分别配成液体培养基。在各组液体培养基中每100m

8、l中分别接种3.8∀10个地衣芽孢杆菌(蛋白胨培养基上活化培养18h)。然后36~37)摇床培养24h(摇床转速为120转/分),根据测定的菌数量找出最佳C/N。结果见表1。表1不同C/N对地衣芽孢杆菌增殖的影响活菌数La活菌数LaC/NC/N77(∀10个/ml)(g/

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