如何使用SpectraMax 微孔读板机进行快速定量检测DNA和RNA

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1、如何使用SpectraMax微孔读板机进行快速定量检测DNA&RNA岳兵ProductManagerBing.yue@moldev.com18501662168©2012Forresearchuseonly.Notforuseindiagnosticprocedures.TrademarksmentionedhereinarepropertyofMolecularDevices,LLCortheirrespectiveowners.内容概览•光吸收原理•比色皿、微孔板和超微量•在SpectraMax读板机上快速

2、检测DNA&RNA•在SpectraDrop上进行高通量超微量DNA&RNA检测©2012Forresearchuseonly.Notforuseindiagnosticprocedures.TrademarksmentionedhereinarepropertyofMolecularDevices,LLCortheirrespectiveowners.光吸收检测技术原理•透射率和吸光度I0=Ia+It+Ir入射光强度为I0，吸收光强度为Ia，透过光强度为It，反射光强度为Ir因为反射光强度Ir由微孔板材料决定

3、I0=Ia+It透射率吸收值•朗伯比尔定律K摩尔吸光系数、a吸光系数,根据C单位决定©2012Forresearchuseonly.Notforuseindiagnosticprocedures.TrademarksmentionedhereinarepropertyofMolecularDevices,LLCortheirrespectiveowners.光吸收应用(Absorbance)直接定量和显色反应做标准曲线测定浓度核酸和蛋白质定量酶联免疫检测（ELISA）1.41.2酶动力学分析1细菌内毒素

4、检测0.80.6乙酰胆碱脂酶检测0.4Series10.2细胞活性检测（MTT）0环境监测-0.2-0.4等等-0.6©2012Forresearchuseonly.Notforuseindiagnosticprocedures.TrademarksmentionedhereinarepropertyofMolecularDevices,LLCortheirrespectiveowners.DNA、RNA或蛋白浓度检测DNA双螺旋中碱基蛋白质酪氨酸、色氨酸、苯丙氨酸成分含量A=a*c*la=物质消光系数

5、c=浓度l=光径（0.5mm或者1mm）决定上样体积SMP软件自动给出DNA浓度：OD260=1表示50g/ml双链DNA(dsDNA)DNA纯度：纯度计算(OD260/OD280)DNA纯品:OD260/OD280=1.8©2012Forresearchuseonly.Notforuseindiagnosticprocedures.TrademarksmentionedhereinarepropertyofMolecularDevices,LLCortheirrespectiveowners.PathChe

6、ck光路校正技术（专利）为什么我们需要PathCheck?p•比色皿1cm•光径固定•通常为1cm•微孔板•光径不同，与加液体积有关p©2012Forresearchuseonly.Notforuseindiagnosticprocedures.TrademarksmentionedhereinarepropertyofMolecularDevices,LLCortheirrespectiveowners.微孔板DrugDiscovery将大量测试管中的实验集中于一个载体上样品和化学试剂加入孔中一块板完成快速大

7、量的检测在孔中发生反应©2012Forresearchuseonly.Notforuseindiagnosticprocedures.TrademarksmentionedhereinarepropertyofMolecularDevices,LLCortheirrespectiveowners.超微量板SpectraDrop2©2012Forresearchuseonly.Notforuseindiagnosticprocedures.Trademarksmentionedhereinarepropertyo

8、fMolecularDevices,LLCortheirrespectiveowners.比色皿适配器SpectraCuvette™Adapter©2012Forresearchuseonly.Notforuseindiagnosticprocedures.TrademarksmentionedhereinarepropertyofMolecularDevices,LLCortheir