丹参酮IIA磺酸钠对心肌细胞凋亡和血管平滑肌细胞增殖与迁移的作用研究

《丹参酮IIA磺酸钠对心肌细胞凋亡和血管平滑肌细胞增殖与迁移的作用研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、悬叁酮兰兰△磁酸勉盟!坠皿细胞逦圭塑鱼笸垩澧题细胞增蕉生迁整数佳旦巫究博士学位申请人：吴文玉导师：王逸平研究员中国科学院上海药物研究所2013年5月EffectsofSodiumTanshinoneIIAsilateoncardiomvocyte●■■■■■●■■■■●●●■■■●■●■■●■■■■■●■■■■■■■■■■■●■■●■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■●●■■■■●■■■●■■■■■●■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■●■■■■_-··-____-___-_-_____II__

2、___一aDoDtosisandVSMCproliferationandmigration●■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■■●■■■●■■●■●●_I-——-------------------__--_-_--■■■■■■■■■■■■■■■■■■■●■■●●■■■●■●■●■●■■■一Ph．D．Candidate：WenyuWuSupervisor：Prof．YipingWangADissertationSubmittedtoUniversityofChines

3、eAcademyofSciencesInpartialfulfillmentoftherequirementForthedegreeofDoctorofpharmacologyShanghaiinstituteofMateriaMedicaChineseAcademyofScienceMay,2013Ⅲ5Ⅲ3咖6mmIⅢ8洲3㈣Z川Y目录目录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．1摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．

4、3Abstract．．．．．．⋯．．⋯．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．⋯．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．⋯．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．⋯．．．．⋯．．．⋯．．．6缩略词表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯10第一章：丹酸酮IIA磺酸钠对缺糖缺氧／复糖复氧(OGD／R)诱导的心肌细胞凋亡的作用及其机制研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯13前言⋯

5、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯131．材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．151．1试剂与仪器⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．151．2实验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．171．2．1细胞培养与处理⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．171．2．2用荧光显微镜检测细胞内凋亡小体⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．171．2．3用AnnexinV-FITC．PI双染法检测细胞凋

6、亡⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．181．2．4检测细胞内的ROS⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．191．2．5RT-PCR．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．⋯．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．⋯．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．⋯．．．．．．191．2．6Caspase．3和caspase．8的活性测定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯201。2．7线粒体膜电位的测定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．201．2．8检测培养液

7、中TNF．a的浓度⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯2l1．2．9细胞浆蛋白和细胞核蛋白的分离⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．2l1．2．10Westernblot检测凋亡相关蛋白以及信号通路蛋白⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯211．2．1l凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA)检测NF．r,B的活性⋯⋯⋯⋯．．221．3统计学分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯242．实验结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．242．1STS抑制OGD瓜诱导的心肌细胞凋亡⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

8、⋯⋯⋯242．2STS调节OGD瓜引起的凋亡相关蛋白的变化⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯262．3STS抑制NF．1cB的激活，进一步抑制TNF．0【的表达，从而抑制细胞凋亡⋯．272．4STS抑制．n师．u诱导的心肌细胞凋亡⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯302．5STS调节TNF．a诱导的凋亡相关蛋白的变化⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯322．6S