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时间:2019-05-10
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1、第十二章细胞增殖及其调控细胞增殖(cellproliferation)的意义◆细胞增殖(cellproliferation)是细胞生命活动的重要特征之一,是生物繁育的基础。◆单细胞生物细胞增殖导致生物个体数量的增加。◆多细胞生物由一个单细胞(受精卵)分裂发育而来,细胞增殖是多细胞生物繁殖基础。◆成体生物仍然需要细胞增殖,主要取代衰老死亡的细胞,维持个体细胞数量的相对平衡和机体的正常功能。◆机体创伤愈合、组织再生、病理组织修复等,都要依赖细胞增殖。第一节细胞周期概述一、什么是细胞周期细胞周期指由细胞分裂结束到下一次细胞分裂结束所
2、经历的过程,所需的时间叫细胞周期时间。其间细胞遗传物质和其他内含物分配给子细胞。可分为四个阶段(图13-1):①G1期(gap1),指从有丝分裂完成到期DNA复制之前的间隙时间;②S期(synthesisphase),指DNA复制的时期,只有在这一时期H3-TDR才能掺入新合成的DNA中;③G2期(gap2),指DNA复制完成到有丝分裂开始之前的一段时间;④M期又称D期(mitosisordivision),细胞分裂开始到结束。细胞周期可划分为四个阶段细胞周期时间·不同细胞的细胞周期时间差异很大·S+G2+M的时间变化较小,细
3、胞周期时间长短主要差别在G1期·有些分裂增殖的细胞缺乏G1、G2期从增殖的角度来看,可将高等动物的细胞分为三类:①连续分裂细胞,在细胞周期中连续运转因而又称为周期细胞,如表皮生发层细胞、部分骨髓细胞。②休眠细胞暂不分裂,这类细胞可长期停留在G1早期而不越过R点,处于增殖静止状态。它们合成具有特殊功能的RNA和蛋白质,使细胞的结构和功能发生分化,但这类细胞并未丧失增殖能力,在一定条件下可以恢复其增殖状态,但需要经过较长的恢复时间,称G0期细胞,如淋巴细胞、肝、肾细胞等。③不分裂细胞,指不可逆地脱离细胞周期,不再分裂的细胞,又称终
4、端细胞,如神经、肌肉、多形核细胞等等。二、细胞周期时间的测定标记有丝分裂百分率法(percentagelabeledmitoses,PLM)是一种常用的测定细胞周期时间的方法。其原理是对测定细胞进行脉冲标记、定时取材、利用放射自显影技术显示标记细胞,通过统计标记有丝分裂细胞百分数的办法来测定细胞周期。有关名词:TG1:G1期的持续时间TG2:G2期的持续时间TS:S期的持续时间TM:M期的持续时间TC:一个细胞周期的持续时间PLM:标记的有丝分裂细胞所占的比例TDR:胸腺嘧啶核苷,是DNA的特异前体,能被S期细胞摄入,而掺进D
5、NA中。通常使用的是3H或者14C标记的TDR。测定原理(图13-2):①待测细胞经3H-TDR标记后,所有S期细胞均被标记。②S期细胞经G2期才进入M期,所以一段时间内PLM=0。③开始出现标记M期细胞时,表示处于S期最后阶段的细胞,已渡过G2期,所以从PLM=0到出现PLM的时间间隔为TG2。④S期细胞逐渐进入M期,PLM上升,到达到最高点的时候说明来自处于S最后阶段的细胞,已完成M,进入G1期。所以从开始出现M到PLM达到最高点(≈100%)的时间间隔就是TM。⑤当PLM开始下降时,表明处于S期最初阶段的细胞也已进入M期
6、,所以出现PLM到PLM又开始下降的一段时间等于TS。⑥从PLM出现到下一次PLM出现的时间间隔就等于TC,根据TC=TG1+TS+TG2+TM即可求出的TG1长度。细胞周期各阶段的时间与PLM的关系◆流式细胞仪测定法(FlowCytometry)DNA的含量随细胞周期(G1,S,G2,M)的各个时期呈现出周期性的变化:G1期,是细胞RNA和蛋白质的合成期,即DNA合成前期,此时细胞核内DNA含量保持二倍体;进入S期后,DNA开始合成,即DNA合成期,细胞核内DNA的含量介于二倍体至四倍体之间;细胞进入G2期,即细胞分裂前期,
7、DNA含量为四倍体,直到进入M期,即细胞分裂期,细胞分成两个子细胞,M期结束进入下一个细胞周期。G1期:DNA的含量为二倍体S期:DNA的含量为二倍体至四倍体混合G2,M期:DNA的含量为四倍体三、细胞同步化细胞同步化(synchronization)是指在自然过程中发生或经人为处理造成的细胞周期同步化,前者称自然同步化,后者称为人工同步化。(一)自然同步化1.多核体如粘菌只进行核分裂,而不发生胞质分裂,形成多核体。数量众多的核处于同一细胞质中,进行同步化分裂,使细胞核达108,体积达5~6cm。疟原虫也具有类似的情况。2.某
8、些水生动物的受精卵如海胆卵可以同时授精,最初的3次细胞分裂是同步的,再如大量海参卵受精后,前9次细胞分裂都是同步化进行的。3.增殖抑制解除后的同步分裂如真菌的休眠孢子移入适宜环境后,它们一起发芽,同步分裂。(二)人工同步化1.选择同步化1)有丝分裂选择法:使单层培养的细胞处于
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