2019高考生物复习第40讲微生物的培养与应用讲练结合学案

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1、第40讲　微生物的培养与应用[考纲明细]　1.微生物的分离和培养　2.某种微生物数量的测定　3.培养基对微生物的选择作用　4.利用微生物发酵来生产特定的产物以及微生物在其他方面的应用板块一　知识·自主梳理一、微生物的实验室培养1．培养基(1)概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。(2)营养成分：水、碳源、氮源、无机盐四类营养物质，另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。(3)培养基的分类①按物理状态分类②按功能分类2．无菌技术3．纯化大肠杆菌及菌种的保藏(1)制备牛肉

2、膏蛋白胨固体培养基①步骤：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。②倒平板的过程a．在火焰旁右手拿锥形瓶，左手拔出棉塞。b．右手拿锥形瓶，使锥形瓶的瓶口迅速通过火焰。c．左手将培养皿打开一条缝隙，右手将培养基倒入培养皿，左手立刻盖上培养皿的皿盖。d．待平板冷却凝固后，将平板倒过来放置，使皿盖在下、皿底在上。(2)纯化大肠杆菌①平板划线法(图中A)：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。②稀释涂布平板法(图中B)：将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培

3、养基的表面，进行培养。当稀释倍数足够高时，即可获得单个细菌形成的菌落。(3)菌种的保藏①对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏法。②对于需要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏法。二、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数1．筛选菌株(1)自然界中目的菌株筛选的依据：根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。(2)实验室中微生物筛选的原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时抑制或阻止其他微生物生长。(3)选择培养基：允许特定种类的微生物生长，同时抑制和阻止其他种类微生物生长的培养基。2．统计菌落数目

4、(1)常用方法：稀释涂布平板法。(2)统计依据当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。(3)活菌计算方法：每克样品中的菌株数＝(C÷V)×M[其中C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)，M代表稀释倍数]。(4)其他方法：还可利用显微镜直接计数。3．设置对照设置对照的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度，例如为了排除培养基被杂菌污染的可能性，需以未

5、接种细菌的培养基培养作为空白对照。4．实验设计三、分解纤维素的微生物的分离1．纤维素酶(1)纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶三种组分。2．纤维素分解菌的筛选(1)方法：刚果红染色法。(3)培养基：以纤维素为唯一碳源的选择培养基。(4)实验流程◆　深入思考1．配制培养基时平板冷凝后，为什么要将平板倒置？提示　平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。2．为什么选择培养能够“浓缩

6、”所需的微生物？提示　在选择培养的条件下，可以使那些能够适应这种营养条件的微生物得到迅速繁殖，而那些不适应这种营养条件的微生物的繁殖被抑制，因此可以起到“浓缩”的作用。◆　自查诊断1．培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。(　　)答案　√2．为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落。(　　)答案　×3．用稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时，只要稀释度足够高，就能在培养基表面形成单个菌落。(　　)答案　√4．对细菌进行计数只能采用稀释涂布平板法，而不能用平板划线法。(　　)答案　×5．刚果红可以与纤维素形成透明复合物

7、，所以可通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。(　　)答案　×板块二　考点·题型突破考点1培养基及微生物的纯化培养技术题型一　培养基　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　1．下表为某培养基的配方，下列叙述正确的是(　　)A．从物理性质看该培养基为液体培养基，从用途看该培养基为选择培养基B．该培养基中属于碳源的物质主要是葡萄糖，属于氮源的物质是蛋白胨C．该培养基缺少提供生长因子的物质D．该培养基调节合适的pH后就可以接种使用答案　B解析　从用途看该培养基属于鉴别培养基，A错误；微生物的营养物质主要包括氮源、碳源、

8、水和无机盐等，培养基中属于碳源的物质主要是葡萄糖，属于氮源的物质是蛋白胨，B正确；生长因子主要包括维生素、氨基酸和碱基等，它们一般是酶和核酸的组成成分，蛋白胨可以提供生长因子，C错误；该培养基调节合适的pH后经灭菌后才可以接种使用，D错误。2．关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述错误的是(　　)A．操作顺序为计算、称