基于多功能适配体探针检测镉和银的新原理新方法研究

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时间:2019-03-17

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1、涕爹振耀終麵'.、分类寻舊:级,^.43?典.姨酵鄉^^-UniversityOFSOUTHci^,‘-',-^麟‘。-’,/鴻暫―,,衣蠢據命4?卢,巧诗木,羊位):.解,繁藥,緣""I,,?<::;;础相I接奉屬基于多功能适配体探针检测锅和银,的新原理新方法研究|^^^^1W藻與护細.可职称;王永生觀■*■’心业;公共卫生与预防医学V勒:.专.-.Sf.换P蒙^;磬》.新方自:馬既^,?誤;室凑扁-专'筹:记?。,聲泌毯;:*镶冷繼么曰篇餐孝'錫苗麟夠項义戀?義考掌UN1V巨

2、RSITYOFSOUTHCHINA论文题目泉于多功能适配体探针检测編和银的新原理新方法研究论文作者签名:指导教师签名:來勺、论文评阅人1;如命1/苗评阅人2;考旅评阅人3:答辩委员会主席:所巧入舉1委员:族古禾 ̄委贵2;《喪珠■委员3:颗喝委员4;诚云扛委员5:委员6;>答辩日期;V!1)年t月日南华大学学位论文原创性声明本人声明,所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的。研究成果,除了论文中特别加标注和致谢的地方外尽我所

3、知I论文中不包含位其他或人证已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得南华大学或其他单位的学书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。"作者签名;1)年I月^^日南华大学学位论文版权使用授权书本学位论文是本人在南华大学攻读(博学位期间在导师指导下完成的学位论文。本论文的硏究成果归南华大学所有,本论文的研究内容不得W其它单位的名义发表。本人同意南华大学有关保留、使用学位论文的规定,即:全学校有权保留学位论文,允许学位论文被查阅和借阅;学校可布

4、学位论文的家或部湖或部分内容,可til采用复印、缩印或其它手段保留学位论文;学校可根据国学位论文南全省文有关数部据口规定送交学位论文。同意学校将论文加入《中国优秀博硕±规定库》,并按《中国优秀博硕±学位论文全文数据库出版章程》享受相关权益。同意授权中国科学信息技术研究所将本学位论文收录到《中位国学位论文全文数据库》,并通过网络向社会公众提供信息服务。对于涉密的学论文,解密后适用该授权。作者签名;月7^日导师签名:知(月/曰)基于多功能适配体探针检测镉和银的新原理新方法研究摘要:镉和银是环境中极为常见的有毒重金属污染物,他们

5、对人体健康的危害已经引起了人们的广泛关注。现行检测镉和银的方法,有些需使用昂贵的仪器和熟练的操作者,或者需要繁琐、费时的样品预处理程序。因此,建立简便、灵敏、特异的检测镉和银的新技术和新方法,对于保护生态环境、促进人们身体健康具有重要意义。基于核酸适配体探针、建立重金属生物传感方法是近年来新兴的研究领域。有报道镉适配体(Cd–4)能与镉离子特异性结合。我们发现,这个适配体经适当修饰、构建的多功能适配体探针,既能用于镉的灵敏检测,又能用作银的特异性识别元件,还能充当信号报告分子。据此,建立了基于特异的、多功能的核酸适配体探针检测镉和银的两种荧光生物传感方法。本

6、文第一章绪论部分阐述了镉和银对人类的危害和主要检测方法及其进展,介绍了核酸适配体在金属离子检测中的应用和本课题拟研究的主要内容。本文第二章基于镉的特异性、多功能适配体探针(cadmiumandsilverspecificaptamerprobe,CSAP),建立了检测镉的新型荧光生物传感方法。在HEPES缓冲溶液(pH7.3)中,Cd2+的加入能够引起CSAP发生构象转换并猝灭荧光,根据体系荧光值的变化可定量检测Cd2+。利用圆二色谱、荧光和紫外等光谱技术证实了CSAP探针发生构象转换的机制。Cd2+的浓度在7.19×10−9mol·L−1~5.00×10−

7、6mol·L−1范围内I与体系的荧光强度改变值呈良好的线性关系;Cd2+的检出限达到了2.15×10−9mol·L−1,大大低于已经报道的方法。该方法已成功应用于环境样品中镉的检测。与传统检测方法比较,新建方法具有灵敏度高、特异性好和成本低廉等优点,为生物医学、毒理学和环境科学研究提供了新思路、新技术和新方法。本文第三章基于银离子诱导的多功能适配体探针(CSAP)构象改变,建立了一种新颖的、荧光猝灭法检测银离子的新方法。在HEPES缓冲液中,Ag+能特异性的诱导CSAP发生分子内的折叠,形成稳定的茎环结构,促使5’端修饰的四个鸟嘌呤(G4)碱基靠近3’端的荧

8、光基团6–FAM,发生光诱导的电子转移,引起体系的荧

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