水稻oscte3耐冷功能分析及冷胁迫响应ossadmc功能标记的研究

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1、分类号：单位代码：１３６４０密级１２７２００２２：学号；名後參必义ｆ学位论文水稻化耐冷功能分析及冷胁迫响应０诚乂ＤＭＣ功能标记的研究Ｆｕｎｃｔｉｏｎ乂ｎａｌｙｓｉｓｏｆａｎｄＲｅｓｅａｒｃｈｏｆａＦｕｎｃｔｉｏｎａｌＭａｒｋｅｒｆｔ）ｒＣｏｌｄｓｔｒｅｓｓＲｅｓｐｏｎｓｉｖｅｇｅｎｅ化Ｒｉｃｅ研究生：胡晚晨指导教师：石巧杂副教榜合作指导教师：傅彬巧研巧员申请学位口类级别：农学硕女．专业名称；作物货传育种研究方向；水稻优良某因发掘与分子设计育种所在学院；农学院答

2、辩委员会主席；如Ａ２０１５年６月DisserationfortheMasterDegreeinAgronomyFunctionAnalysisofOsCTE3andResearchofaFunctionalMarkerforColdstressResponsivegeneOsSADMCinRiceCandidate:HuXiaochenSupervisor:DrShiYingyao:DrFuBinyingAcademicDegreeAppliedfor:MasterofAgronomySpeciality:CropGeneticsandBreedingAnhuiAgricuLtu

3、ralUniversityJune,2015独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加Ｗ标注和致谢的地方外，抢文中不包含其他业大学或其它教育机构人己经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得安徽农一的学位或证书而使用过的材料。与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示了谢意。：时间：年月研究生签名｜日（｜关于论文使用授权的说明＇本人完全了解安徴农业大学有关保留、使用学位论文的规定，目Ｐ；学校有权、保留送交论文的复印件和磁盘，缩印或，允许论文被查阅和借阅可Ｗ采

4、用影印扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意安徽农业大学可Ｗ用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。保密的学位论义在解密后应遵守此协议（）研究生签名：时间：年月日一导师巧时间一第：年月曰（主＾／／摘要水稻是一种喜温作物，对温度变化反应敏感，在低于15-20℃时就会对其正常生长产生不利影响。现在低温冷害已成为影响我国水稻的品质、高产及稳产的主要限制因素之一。水稻作为主要的粮食作物，提高其抗逆性尤为重要，因此发掘改善水稻抵抗非生物胁迫能力的基因，鉴定耐冷水稻种质资源、克隆耐冷基因、开发耐冷功能标记，并通过分子标记辅助育种的策略培育耐冷水稻新品种是目前

5、解决冷害对水稻产生不利影响的重要途径。本研究选择泛素连接酶(E3，Ubiquitin-proteinligase)家族中的一个基因OsCTE3作为耐冷候选基因，对其进行初步的功能分析，得到如下结果：1.对OsCTE3蛋白进行了序列分析，发现其具有能特异识别底物的保守位点锌指环结构域，并通过对OsCTE3启动子上顺式元件进行分析发现调控区域存在与冷胁迫相关的顺式元件，推测其可能参与水稻的低温胁迫途径。2.对OsCTE3进行响应外界环境胁迫表达模式分析，激素处理（ABA、6BA和ACC）和胁迫条件（20%PEG渗透胁迫、盐胁迫和冷胁迫）下都可以诱导OsCTE3的表达。3.构建了OsCTE3的

6、GFP融合表达载体，并进行亚细胞定位，发现OsCTE3定位于细胞核内；同时构建OsCTE3的过表达载体并进行遗传转化，获得8个OsCTE3的过表达转基因株系；并通过Southernblot检测，从结果中可以看到OsCTE3已被整合到水稻基因组中。4.对获得的转基因株系进行耐冷表型鉴定，发现过表达OsCTE3可以提高水稻的耐冷性。在低温处理后，对OsCTE3过表达株系的SOD、POD、CAT的酶活和可溶性糖进行检测，结果发现过表达转基因株系中三种酶的活性比野生型强，并且可溶性糖的含量也较高。本研究选择OsSADMC基因作为功能标记基因，对其进行功能标记的开发和利用，得到下列结果：1.对95

7、份水稻种质资源进行苗期耐冷性鉴定，鉴定出10份苗期耐冷（存活率≥60%）和9份敏感的材料（存活率为零）。2.S-腺苷甲硫氨酸脱羧酶(SAMDC，S-Adenosylmethioninedecarboxylase)是植物中调控多胺合成代谢过程的关键酶，也是催化腺苷甲硫氨（SAM，S-Adenosylmethionine）形成脱羧S-腺苷甲硫氨（dcSAMDC，decarboxylatedS-adenosylmethionine）的关键