金黄色葡萄球菌的分子特征分析及其对莫匹罗星的耐药机制研究

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1、复旦大学硕士学位论文万方数据金黄色葡萄球菌的分子特征分析及其对莫匹罗星的耐药机制研究MolecularcharacterizationofStaphylococcusaureusandthemechanismn●o·ormuolroclnresistance院系：华山医院专业：临床检验诊断学姓名：宋燕指导老师：李敏研究员导师小组成员：林勇副主任技师蒋晓飞副研究员关明研究员万方数据目录√P11]lllJ111]I11]lillIIl}Y2703233英文缩略词表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯l中文摘要⋯·：⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

2、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·4-英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯8第一部分：金黄色葡萄球菌的分子特征分析弓【言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯12弓I青⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯lZ材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯19结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯28讨{仑⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯31第二部分：金黄色葡萄球菌对莫匹罗星的耐药表型特征和耐药机制研究材料与方法⋯⋯⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯40结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯46讨{仑⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯48总结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·j⋯·⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4-9参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯56综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯68致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯69附录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯76万方数据万方数据复旦大学硕

4、士学位论文金黄色葡萄球菌的分子特征分析及其对莫匹罗星的耐药机制研究研究背景摘要金黄色葡萄球菌是一种非常普遍的人类病原微生物，可以引起多种感染性疾病，包括：皮肤软组织感染、心内膜炎、骨髓炎、菌血症和致死性肺炎等。临床上从不同感染组织分离的金黄色葡萄球菌在流行病学上具有多态性的特点，可以分为不同的克隆株。不同的克隆株其耐药基因以及毒力因子的携带情况是否具有差别，以及金黄色葡萄球菌的表型和分子特征是否具有相关性等。对金黄色葡萄球菌的分子特征分析可以帮助我们解决这些问题，从而为设计有效的预防和感染措施来对抗金黄色葡萄球菌引起的医院感染提供依据，监控物种进化的过程

5、，并为后续的机制研究提供资料。金黄色葡萄球菌的分子特征分析结果显示其对莫匹罗星的耐药基因mupA的阳性率较高。在临床上莫匹罗星主要用于清除医护人员和医院住院患者金黄色葡萄球菌引起的鼻腔定植。医院住院患者金黄色葡萄球菌的鼻腔定植会大大增加院内金黄色葡萄球菌血液感染、透析相关感染及手术部位感染的风险。因此对莫匹罗星耐药率的监测及耐药机制的研究意义重大。第一部分金黄色葡萄球菌的分子特征分析目的：分析上海华山医院2005到2010年分离自病人不同感染组织的金黄色葡萄球菌的克隆分型特点，包括其随时间的变化趋势及表型与克隆型的联系，不同克隆株耐药和毒力基因携带情况及

6、其与克隆分型之间的联系。方法：收集上海华山医院2005年到2010年从病人不同感染组织中分离鉴定的金黄色葡萄球菌610株，运用药敏纸片法对所有的菌株进行药物敏感实验；按照国际通用的多位点保守基因序列分型(MLST)以及葡萄球菌A蛋白(spa)序列分析方法进行克隆株的鉴定分析；用多重PCR方法对所有耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)菌株进行SCCmec分型；采用PCR方法对其中108株细菌的耐药以及毒力基因携带情况进行分析。结果：610株金黄色葡萄球菌的克隆分型结果显示：共鉴定出20种STs(主要克隆型是：ST239，ST5，ST7，STl88和ST39

7、8)和52种spa型(流行株是t002，t037，t030和t601)。共分离出444株MRSA(72．8％)和116株(27．2％)甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)。ST239一MRSA—III—spat037和ST5一MRSA—II—spat002是MRSA菌株，万方数据复旦大学硕士学位论文的两株流行株。2005到2010年，spat002和spat037和他们相应的STs(ST5和ST239)是610株金黄色葡萄球菌的流行克隆型，并且对多种抗生素表型耐药。不同克隆型的耐药率不同，但并未检测出对万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺耐药的菌株。不同毒力和

8、耐药基因在不同克隆株的分布不同。ST239和ST5对庆大霉素、头孢西丁、青霉素、