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1、内蒙古医学院学报2007年10月第29卷第5期·373··综述·胶体金免疫电镜技术及其应用123萨仁高娃,其木格,吴岩(1.内蒙古医学院组织胚胎学教研室,内蒙古呼和浩特010059;2.电镜中心)摘要:免疫胶体金技术是继三大标记技术后对免疫标记技术的又一大贡献,近年来发展迅速,应用范围较广。胶体金免疫电镜技术是研究细菌、病毒、肿瘤和自身免疫疾病的主要方法之一。本文综述了胶体金免疫电镜技术的原理、特点、应用及研究进展。关键词:胶体金免疫电镜技术;肿瘤;病毒中图分类号:Q-336文献标识码:A文章编号:1004-2113(2007)05-0373-05COL
2、LOIDALGOLDIMMUNOELECTRONMICROSCOPYTECHNIQUEANDITSAPPLICATIONSarengaowa,Qimuge,WUYan(DepartmentofHistologyandEmbryology,InnerMongoliaMedicalCollege,Hohhot010059China)Abstract:Immunecolloidalgoldtechniquehasgreatcontributiontoimmunolabellingtechnique,whichdevelopsquicklyandappliesc
3、omprehensivelyinrecentyears.Colloidalgoldimmunoelectronmi2croscopytechniqueisoneofstudiesonbacterium,principle,advantagesandapplicationvirus,tumorandautoimmunediseases.Thispapersummarizedthedevelopmentofresearchofthecolloidalgoldim2munoelectronmicroscopytechnique,principle,advant
4、agesandapplication.Theprospectsofcolloidalgoldimmunoelectronmicroscopytechniquewerediscussedinthispaper.Keywords:colloidalgoldimmunoelectronmicroscopytechnique;tumor;virus20世纪人们将电镜技术与免疫学方法相结体金标记技术得到进一步发展,已广泛应用于免疫合,逐步形成了免疫电镜检查术。1971年,Faulk转印、流式细胞术、液相免疫测定、固相斑点金/银、[1]和Taylor首次用胶体金标记
5、抗体,取得了较满意斑点金免疫渗滤及免疫层析。胶体金标记抗体技[2]的结果。1983年,Holgate等加以改进,将免疫术的引入无疑是免疫电镜发展过程中的又一个里金染色与银显影技术相结合,建立了免疫金银染色程碑。法(immunogoldsilverstaining,IGSS)。近年来,胶收稿日期:2007-03-25修回日期:2007-09-15基金项目:内蒙古自治区人才开发基金(2005);内蒙古自治区自然科学基金(200408020927)作者简介:萨仁高娃(1981-),女,蒙古族,内蒙古医学院2006级在读硕士研究生。通讯作者:吴岩,教授,博士,硕
6、士研究生导师,E-mail:yanw007@sina.com内蒙古医学院组织胚胎学教研室010059·374·ActaAcadMedNeiMongolOct.2007Vol.29No.5果可长期保存。1免疫胶体金技术的基本原理及特点2免疫金探针的制备、纯化和鉴定胶体金是表面带负电荷的疏水性颗粒,颗粒之间的静电排斥力使它们在水溶液中保持溶胶状态。胶体金的制备一般采用化学还原法,可以方便胶体金溶液呈红葡萄酒颜色,大颗粒胶体金溶液呈地从氯金酸溶液中制备不同粒径(5~150nm)的胶紫红色。氯金酸(HAuCl4)在还原剂作用下,可聚体金颗粒。胶体金的粒径不同会呈
7、现不同的颜色。合成一定大小的金颗粒,形成带负电的疏水胶溶常用的制备方法有白磷还原法、抗坏血酸还原法、液。由于静电作用而成为稳定的胶体状态,故称胶柠檬酸三钠还原法、鞣酸-柠檬酸三钠还原法、乙体金。胶体金标记,实质上是蛋白质等高分子被吸醇超声波还原法和硼氢化钠还原法等。其中,以鞣附到胶体金颗粒表面的包被过程。吸附机理可能酸-柠檬酸三钠还原法最为常用,它可根据需要制是胶体金颗粒表面负电荷,与蛋白质的正电荷基团备出多种不同直径的胶体金颗粒,适用于多重标因静电吸附而形成牢固结合。用还原法可以方便记。胶体金可用于标记许多生物大分子,如免疫球地从氯金酸制备各种不同粒径
8、、也就是不同颜色的蛋白、卵白素、植物血凝素、脂蛋白、糖蛋白等。用胶体金颗粒。这种