盐地碱蓬sshkt1基因在拟南芥sas2-1突变体中表达的研究

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1、山东师范大学硕士学位论文盐地碱蓬SsHKT1基因在拟南芥sas2-1突变体中表达的研究姓名：赵畅申请学位级别：硕士专业：发育生物学指导教师：邵群20070410独创声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得(注：如没有其他需要特别声明的，本栏可空)或其他教育机构的学位或证书使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：冬吻学位论文版权使用授权书翩替谬旧

2、本学位论文作者完全了解堂控有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权堂控可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)学位论文作者签名：乞曲勿导师签字：露F宅亨签字臼期：岬年莎月7日签字日期：≯叼年，月7日山东师范大学硕士学位论文盐地碱蓬SsHKTl基因在拟南芥sas2-1突变体中表达的研究赵畅(山东师范大学生命科学学院，济南，250014)摘要离子的吸收与转运对植物营养、信号转导、生

3、长发育等都起到重要作用。其中10和Na+由于其重要的生理功能而受到广泛的关注。K+是植物细胞中含量最丰富的无机离子，是一种重要的营养元素，而Na+是盐胁迫条件下最主要的毒性离子，植物的耐盐往往要求植株尤其是地上部分保持低Nr、高K+的状态。植物阳离子转运载体t-IKT家族，最初被认为参与植物在外部低钾条件下吸收钾离子，后来发现其功能为K+-Na?共转运载体或Na+转运载体。近年研究表明，HKT蛋白在提高植物耐盐性方面起到重要作用。拟南芥AtHKTl可能参与根Na+内流，将N矿从地上部分再循环至根，控制Na+的木质部卸载，或调节K+、Na+平衡。SsHKT

4、l基因是从盐地碱蓬根中克隆到的阳离子转运载体基因，SsHKTl在低钾条件下能够互补酵母吸钾缺失突变体，表现为高亲和钾载体的特征，但在酵母中没有发现有明显的转运N矿的功能。本实验利用植物表达载体pROKII和农杆菌Gv3101将SsHKTl基因在拟南芥：sas2．J突变体中表达，以研究该蛋白的功能。在含40mglL卡那霉素的培养基上筛选获得＆鼠融!，的纯合转化子，并对其进行了分子鉴定和分析，其结果如下：1．提取转基因株系基因组DNA，PCR结果扩增出约1．65kb的特异性条带，表明SsHKTl已整合J扯as2．J基因组中。’2．提取转基因株系总RNA，RT

5、-PCR结果扩增出约1．65kb的特异性条带，表明插入拟南芥中的船删已经正常转录。3．测量正常MS培养基上和高K+浓度处理后野生型、sas2．J和转SsHKTl基因植株地上部分和根的K+含量，结果表明转基因植株地上部分和根中的K+含量均高于sas2．J。4．测量不同浓度NaCl(O，50，75，100mmol／L)处理后野生型、sas2．J和转山东师范大学硕士学位论文SsHKTl基因植株的Na+含量，转基因植株和sas2-1地上部分和根中的Na+含量相差不大，地上部分都高于野生型，根中低于野生型。5．LiCI耐性分析表明，随时间延长，转基因和sas2．J

6、植株存活率都低于野生型植株。转基因与sas2一，植株存活率差异不大。以上结果表明，SsHKTI基因在sas2-1中表达，在正常和高钾条件下都提高了转基因植株的K+含量，进一步确认了SsHKTl的K+转运功能。转基因植株不论在正常和盐胁迫条件下，地上部分都过量积累N矿，尤其在盐胁迫条件下最明显，盐胁迫下根中的Na+含量与sas2．j相差不大，转基因植株没有提高其LiCI耐性，说明SsHKTl对转基因植株的Na+含量影响不大。没有发现SsHKTl具有地上部分Na+再循环或木质部卸载功能的证据。关键词：盐生植物，阳离子转运载体，SsHKTl基因，拟南芥sas2

7、．』突变体分类号：Q782山东师范大学硕士学位论文StudyaboutSsHKTlGenebyexpressinginmutantofArabidopsisthalianasas2-1ZhaoChang(CollegeofLifeScience，ShandongNormalUniversity,Jinan，250014)AbstractUptakeandtranslocationofcationsplayessentialrolesinplantnutrition,signalu翟nsduction,growth,anddevelopmenLAmongt

8、hem,potassium∽andsodium科a1havebeenthefoc