pcv2与ppv共感染对猪外周血单个核细胞细胞因子转录时相影响研究

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1、河南农业大学硕士学位论文PCV2与PPV共感染对猪外周血单个核细胞细胞因子转录时相影响研究姓名：郭东辉申请学位级别：硕士专业：预防兽医学指导教师：魏战勇；崔保安201206河南农业大学2012届硕士学位论文摘要猪细小病毒(Porcineparvovirus，．PPV)和猪圆环病毒2型(Porcine．circovirustype2，PCV2)引起初产母猪产出死胎、畸形胎、木乃伊胎以及母猪的繁殖障碍。PCV2还可以引起新生仔猪肺炎、生长迟缓等，也是导致感染猪发生免疫抑制的主要病原，且这2种病普遍存在于国内外的养殖场，严重影响和制约着

2、养猪业的发展。本研究通过分析PPV与PCV2共感染猪体外周血单个核细胞中免疫相关细胞因子tuRN．A．转录的动态变化，以揭示PPV与P．CV2共感染对猪免疫功能的影响及其致病机理。‘l采用Real-timePCR技术对PPV、PCV2．单感染和PPV／PCV2共感染猪PBMCs后l、3、12、24、48和72h中PPV、PCV2的DNA含量进行检测。结果显示：PPV、PCV2在感染后lh能检测到病毒核酸j且PPV／PCV2共感染组中PCV2含量高于P．PV、PCV2单感染．组。由此说明：PPV与PCV2共感染对PCV，2在PBMC

3、s内的增殖具有促进作用。2采用Real-timePCR技术对PPV、PC、r2单感染与PPV／PCV2共感染猪PBMCs后1、3、12、24、48和72h中PPV、PCV2的DNA含量及白细胞介素细胞因子(IL．113、IL．6、IL．8、IL．12p35、IL．12I)40、IL-13、IL．17、IL．18)mRNA转录水平进行检测。结果显示，IL．1B、IL．6、IL-13、IL-8和IL．17细胞因子在病毒感染后其转录水平均较高，并且共感染比PPV、PCV2单感染组高，而ILl2p35、IL．12I)40和IL．18细胞因

4、子在病毒感染后其转录水平均较低或受到抑制。由此表明：PPV／PCV2共感染组比PPV、PCV2．单感染组更能刺激·．+炎症的发生，同时共感染对细胞的免疫抑制具有加重作甩。．●3采用Real．timePCR技术对PPV、PCV2单感染和PPV／PCV2共感染猪PBMCs后1、3、12、24、48和72h干扰素相关因子(IFN一13、lFN-丫、IFNAR-1、IFNAR-2、MXI、2’5’OAS、RNaseL、IRF．3)mRNA转录水平进行检测。结果显示：病毒感染猪PBMCs后IFN．B和IFN-TmRNA转录水平在多个时间点转

5、录水平高于单感染，但是lFN吖mRNAPPV／PCV2共感染组低于对照组。病毒组的IFNAR-ImRNA转录水平均有多个时间点低于对照组；PPV／PCV2共感染组IFNAR．2mRNA感染后期IFNAR．2mRNA转录水平低于PPV、PCV2单感染组。病毒在感染PBMCs后PPV／PCV2共感染组IRF．3mRNA感染初期高于PPV、PCV2单感染组，感染后期低于PPV、PCV2单感染组，但与对照组变化不显著。由此表明：干扰素因子的转率水平整体较低，且在初期发挥作川，而后期处丁抑制作刚，PPWPCV2共感染对细胞的免疫抑制具有加重

6、作用。对干扰素的效应分子的分析认为，MXl、2’5’OAS／RNaseL2个效应系统都参与了PPV的抗病毒反应，而PPV／PCV2共感染组和PCV2的抗病毒效应分子主要是MXI蛋白。4采用Real-timePCR技术对PPV、PCV2单感染和PPV／PCV2共感染猪PBMCs后lh、3h、12h、24h、48h、72h抗病毒相关冈子(MIP一1n、TGF-B1、NF-KB、MURRl)mRNA转录水平进行检测。结果显示：病毒感染后期MIP．1Q、TGF．131、NF．1cB、MURRlmRNA上调。且PCV2单感染组高于PPV／P

7、CV2共感染，提示可共感染对机体的免疫抑制具有加河南农业大学2012届硕士学位论文重作用。关键词：猪细小病毒；猪圆环病毒2．型；共感染：免疫抑制：荧光定量PCR：细胞因子；外周血单个核细胞2河南农业大学2012届硕士学位论文THESTUDYONINFLUENCEoFTRANSCRIPTIoNALPRoFILESOFPORCINEnU册ⅥRUSANDPoRC矾ECIRCoⅧ之USTYPE2Co—D咿ECTIONoNCYTOKINEmRNAEX：PRESSIONINPERIPHERALBLooDMONoNUCLEARCELLSoFPO

8、RCn嘎’．．Supervis01r：Prof．WeiZhanyong●Mastercandidate：GuoDonghui‘ABSTRACTPorcineparvovirus(PPV)andporcinecircovimstype2(PCV2)a