多倍体鲫鲂的分子生物学特性研究

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1、分类号密级——学号2Ql!Q21垒12墨垒多倍体鲫鲂的分子生物学特性研究StudiesontheMolecularBiologicalCharacteristicsofthePolyploidyHybridsofRedCrucianCarp(CarassiusauratusredV以r)(早)×BluntSnoutBream(Megalobramaamblycephala)(艿)研究生姓名指导教师姓名、职称学科专业研究方向戴缝型尘芏丝撞塞直生塑堂垄生丝盗边堑鳘堕鱼直鲎湖南师范大学学位评定委员会办公室二零一四年四月中文摘要远缘杂交是指种间或种

2、间以上的杂交。它是一种有效的遗传育种的方法，可以改变后代的遗传组成和外形特征。红鲫(2n=100)和团头鲂(2n=48)属于不同亚科且染色体数目也不同，在红鲫(早)×团头鲂(d)的杂交Fl代中获得了两性可育的天然雌核发育红鲫(2n=100)，不育的异源三倍体鲫鲂(3n=124)和两性可育的异源四倍体鲫鲂(4n=148)。本研究对这些鲫鲂杂交后代的遗传组成和变异、生殖特征等重要生物学特性进行分析，主要研究内容如下：1、以红鲫特有重复序列(序列号JQ086761)为FSIH(Fluorescenceinsituhybridization)杂交探

3、针能有效的区分红鲫鱼和团头鲂的染色体。利用该探针对鲫鲂Fl中的不同倍性后代的遗传组成进行了分析，证明了天然雌核发育后代的染色体全部来源于红鲫，即拥有2套红鲫染色体；异源三倍体鲫鱼的124条染色体中有100条来源于红鲫，即拥有2套红鲫染色体和l套团头鲂染色体；异源四倍体鲫鱼的148条染色体中有100条来源于红鲫，即拥有2套红鲫染色体和2套团头鲂染色体。本研究首次在分子水平上证明了鲫鲂F，中的不同倍性后代的遗传组成。2、对鲫鲂Fl中的不同倍性后代及其亲本的5SrDNA位点进行了研究。以红鲫的5SrDNA序列(340bpGQ485556)为探针进

4、行FISH杂交，在红鲫的分裂相中有2个强信号和2个弱信号，团头鲂的染色体分裂相中没有发现任何信号；异源四倍体鲫鲂和异源三倍体鲫鲂均拥有2套红鲫染色体，其分裂相中也发现了2个强信号和2个弱信号，说明它们稳定的继承了母本红鲫的5SrDNA位点；天然雌核发育红鲫拥有2套红鲫染色体，染色体分裂相中只发现1个强信号和2个弱信号，有1个强信号明显丢失，这说明5SrDNA位点在天然雌核发育后代中出现了明显的重组。3、在繁殖季节，用扫描电镜对异源四倍体鲫鲂(4n=148)产生的配子进行观察，发现其雌、雄个体分别能产生大小不同的卵子和精子，说明异源四倍体鲫鲂

5、能产生具有不同遗传组成的配子。为了进一步揭示这些配子的遗传组成，我们制备了异源四倍体鲫鲂的雌核发育后代，并通过染色体数目、DNA含量和FISH杂交揭示这些后代的遗传组成。最终证明了，4nFl能产生异源四倍体配子(2套红鲫染色体和2套团头鲂染色体)、同源三倍体配子(2套红鲫染色体)、同源二倍体配子(2套红鲫染色体)。本研究首次揭示了异源四倍体鱼在减数分裂过程的异常染色体行为。关键词：远缘杂交，异源多倍体，5SrDNA，荧光原位杂交ABSTRACTDistanthybridizationreferstotheprocessofcombining

6、differentvarietiesoforganisms．Itisaneffectivewayingeneticbreeding，whichcanchangethegeneticcompositionandfeaturesofthehybrids，ormakethehybridoffspringchromosomelevelchangesandtheformationofdiploid，tfiploidortetraploidoffspring．Throughdistanthybridization，bisexualgynogenetic

7、redcruciancarps(2n=100)，triploidhybrids(3n=124)andtetraploidhybrids(4n=148)ofredcruciancarp(Carassiusauratusredvar．，早)xbluntsnoutbream(Megalobramaamblycephala)(艿)wereproducedsuccessfully．Inaddition，studiesofthesedifferentploidy。levelhybridoffspringongeneticcomposition，gene

8、ticvariationandcharacteristicsofreproductivewereperformed，andthedetailcontentsshowasfollo