as2o3对大鼠睾丸支持细胞结构和功能的影响

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1、遵义医学院硕士学位论文As203对大鼠睾丸支持细胞结构和功能的影响．^上．·J一刖茜砷是一种类金属元素，在自然界中广泛存在，其毒性由小到大依次为砷化合物、五价砷、砷酸盐、亚砷酸盐(无机)、氧化砷(三价)。人体摄入砷的途径主要是饮水和饮食，食物中包含无机砷和有机砷，而饮水中的砷主要以无机砷的形式存在Ⅲ。地壳中的砷矿通过与地下水接触，很容易释放出来导致地下水被污染，导致某些地区天然水含砷量过高。长期居住在这种高砷环境中的人们不可避免的摄入过量的砷而引起地方性砷中毒。其中地方性砷中毒最严重的国家是中国、孟加拉国和印度。中国地方性砷中毒病区主要是山西、内蒙古、贵州等十省，其中山西、内蒙古以

2、饮水型砷中毒为最严重，贵州以燃煤型砷中毒最严重心1。除上述高砷地区外，日常生活中也经常接触到砷化合物，冯江西3通过测定中草药微量元素发现，大部分中草药都含砷，少部分含砷较高，根据我国食品中砷含量允许标准H’，许多中药的含砷量均超标。这种情况下，多种常用含砷中草药、中成药的服用中，人们常擅自加大剂量和延长用药时间，导致超剂量服用所致砷急、慢性中毒均有报道睛1，其所致不良反应及中毒现象主要表现为心功能紊乱、血糖血钾过低、呼吸衰竭、白细胞增多、皮肤干瘁着色、呕吐腹泻，末梢神经反应，骨关节疼痛，肝功能损害等№1。本教研室前期实验发现，慢性接触As203可导致大鼠睾丸组织明显病理性损害和每日

3、精子生成量下降，且损害程度呈剂量依赖性；慢性接触As203可诱导大鼠生精细胞凋亡增加，二者存在剂量．效应关系，生精细胞凋亡增加可能是导致大鼠精子数量减少的原因之一订1。支持细胞是睾丸内唯一与各级生精细胞直接、紧密相贴细胞，在生精过程中起到至关重要的调控作用。支持细胞参与了精子发生所需的物质转运，为生精细胞提供各种营养物质。通过收缩微管、微丝使生精细胞向生精小管管腔移动，促使精子细胞释放入生精小管管腔。支持细胞是生精细胞的支架，对生精细胞起到支持作用。能合成和分泌多种蛋白，其中雄激素结合蛋白能够维持生精小管内的雄激素在一个较高的水遵义医学院硕士学位论文As203对大鼠睾丸支持细胞结构

4、和功能的影响曼曼曼曼曼曼曼曼曼曼曼舅I一一一II；．一．一一；IIII_IIII甍平，以促进精子的发生，支持细胞合成和分泌抑制素，抑制垂体前叶合成和分泌卵泡刺激素。支持细胞还能吞噬和清除凋亡的生殖细胞以及精子成熟过程中脱落下来的残余胞质以维持内环境的稳定呻1，吞噬的残余胞质富含脂肪，能够作为类固醇激素合成的原料。支持细胞间通过紧密连接形成血睾屏障，阻止大分子物质通过血睾屏障，为生精细胞的健康发育提供有利的微环境。通过给予雄性大鼠睾丸组织一定量的甘油后观察发现，生精功能受影响。但对细胞类固醇激素的产生，血清卵泡刺激素、黄体生成素和睾酮的水平以及第二性征的作用并不明显，通过荧光共聚焦显

5、微镜观察发现经甘油处理后的大鼠支持细胞中肌动蛋白、闭锁蛋白、微管微丝构成的网络被破坏四1，表明甘油的作用目标是这些分子。用秋水仙素破坏支持细胞的微管后，支持细胞遭到破坏、精子数量减少、畸形率增加，说明微管在精子发生过程中起到很重要的作用n引。抑制素B主要由睾丸支持细胞产生，可以负反馈调节卵泡刺激素的合成与分泌，抑制素B水平与卵泡刺激素水平呈负相关，与精子形态呈正相关。研究发现，抑制素B能较好的反映隐睾患者的生精功能⋯1，目前已将抑制素B作为评价睾丸生精功能的常规指标。三氧化二砷也可以造成生殖系统的损伤，但查阅文献未发现三氧化二砷影响睾丸支持细胞结构和功能报道，三氧化二砷能否通过改变

6、支持细胞结构、功能来影响生殖过程?本项目拟通过检测三氧化二砷对支持细胞结构和功能的影响，探讨三氧化二砷对生殖功能损伤的作用机制。9遵义医学院硕士学位论文As203对大鼠睾丸支持细胞结构和功能的影响1材料与方法1．1主要实验材料健康雄性Sprague—Dawley大鼠，清洁级，24只，体重2009±109，购于第三军医大学野战外科研究所动物中心，许可证号：SCXK(渝)2007．0005。1．2主要实验试剂1．2．1主要药品As203美国Sigma公司水合氯醛生工生物工程(上海)有限公司DEPC美国Sigma公司Chloralhydrate睾酮(T)放免试剂盒天津九鼎生物制品有限公司

7、大鼠抑制素B(INH-B)E1isa试剂盒美国R＆D公司多聚甲醛成都科龙试剂公司无水乙醇成都市科龙化工试剂厂1．2．2主要仪器H-7650型透射电子显微镜日本HitachiBSl10S型电子天平北京赛多利斯仪器系统有限公司Perkin-Elmer3110型原子吸收光谱仪美国PerkinElmer公司光明牌101型电热鼓风干燥箱北京永光明医疗仪器厂GC．1200r放射免疫计数器中国科技大学中佳公司Leica-RM2135型切片机德国Leica公司DB型不锈钢电热板常州市