霍山石斛试管丛生芽与原球茎继代增殖措施的分析

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1、4.2.1栽种方式对原球茎继代增殖的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯244.2.2植物激素及其配比对原球茎继代增殖的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯.244.3试管苗驯化移栽⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯265结论与讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.305.1结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.305.1.1霍山石斛试管丛生芽继代增殖最佳培养基⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯305.1.2霍山石斛原球茎继代增殖培养中的栽种方式及最佳培养基⋯⋯.305.1.3霍山石斛试管苗驯化移栽⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..305.2讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.305.2.1

2、霍山石斛组织培养一次性成苗⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.305.2.2组培继代苗的玻璃化⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯305.2.3诱导组培苗试管开花⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯305.2.4后续研究计划⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯31参考文献⋯⋯⋯⋯..⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯32致谢⋯.⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯35作者简介⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..36在读期间发表的学术论文⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯36附表、附图⋯.⋯⋯...⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..37Ⅵ1文献综述霍山石斛属兰科石斛属多年生附生草本

3、植物,又名霍石斛、霍斛、米斛、大别山石斛,系安徽省名贵中药材,属药用石斛珍品,有“中华仙革之最"的美誉n1。清·赵学敏《本草纲目拾遗》记载:“霍石斛,出江淮霍山,形似钗斛细小色黄,而形曲不直,有成毽者,彼土人以代茶茗,云极解暑醒脾,止渴利水,益人气力,或取熬膏饷客,初未有行之者,近年江南北盛行之,有不给。霍石斛嚼之微有浆、黏齿、味甘、微咸,形缩为真嘲。一霍山属安徽省六安市境内,素有“金山药岭名茶地,竹海桑园水电乡”之美誉,当地产霍山石斛是中药石斛中的上品口1,为“国家野生药材二级保护品种”。从20世纪70年代起,国内外有关机构便开始了霍山石斛的研发

4、工作,尤其在霍山石斛的组织培养技术方面进行了大量研究,现就这方面的研究进展作~综述,以期为进一步开发利用霍山石斛资源提供参考。1.1兰科植物组织培养的研究概况兰科植物的传统繁殖方法主要是靠种子传播和自然分蘖繁殖。由于兰花种子极小且胚发育不完全,因此不易发芽,须借助共生的菌类供给养料才能萌发。分株繁殖既简便易行,又能保存品种特性,但这种繁殖法速度慢。1904年Hanning首次进行胚培养获得成功,但需要在培养基中既接兰花种子又接共生菌才能使种子萌发。1922年,美国康奈尔大学植物生理专家LewisKnudson首次成功进行了兰花种子的真正无菌播种“】

5、.1960年法国人Morel利用虎头兰茎尖组织培养无病毒完整植株,建立了无性繁殖系。自此兰科植物组织培养逐步走向深入化,迄今约有70属数百种兰花植物已成功进行组织培养快速繁殖呖’。我国兰科植物组织培养研究起步较晚,直到1973年上海植物生理研究所才建立了建兰和秋兰的无性繁殖体系,并实现了试管内开花。1982年,云南植物研究所对蕙兰属10个种的种子进行无菌播种技术的研究。1987年,四川省农业科学院原子能应用研究所报道了中国兰45个品种的组织培养繁殖研究,成功诱导了20个品种。20世纪90年代后期,我国兴起了“兰花工业一发展热潮,目前,蝴蝶兰、文心兰

6、、卡特兰、石斛兰、大花蕙兰等洋兰和一些建兰、墨兰等国兰品种已实现了组织培养规模化生产嘲。近年来,兰科植物组织培养的最佳条件,包括光照、温度、pH以及如何选用外植体,选用激素等取得长足进展,并利用组培技术研究种子萌发过程中的生理生化变化等,还获得了转基因植株。1.2药用石斛组织培养的历史和研究现状石斛属中有很多植物为名贵中药材,药用价值较高的有霍山石斛、铁皮石斛、、铜皮石斛、金钗石斛等。现代医学研究表明:药用石斛由于含有多种生物碱、多糖、氨基酸、酚类物质而具有益胃生津、滋阴清热的功能,治热病伤津、口干烦渴、病后虚热、目暗不明等,具有抗衰老、增强机体免

7、疫力、抗肿瘤、降低血糖的作用,同时在胃肠道疾病和白内障方面有一定的延缓和治疗作用瞄】。石斛除了可以代茶品茗,也是许多成品中药的重要成分,如“石斛夜光丸"、“清睛粉"、“脉络宁”注射液、“清咽宁”和“益胃汤’’等等。国内供作药用的主要石斛种类及其产地如表1-1所示:表1-1我国主要药用石斛名称及其主要产地Table1-1China’$majorNameandproducingmedicinalofmedicinalDendrobium由于药用石斛是多年生草本植物,生长周期长,而且由于几百年来人们只采不育,致使其资源稀缺,难以满足目前市场上的巨大需求.

8、利用药用石斛植物器官(组织)离体培养,不仅可以避免自然条件下的各种病虫危害,而且供给植物需要的各种养分及生长激素,从而提高

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