cd4t细胞亚群在子痫前期患者外周血中的表达改变及其临床意义

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1、CD4+T细胞亚群在子痫前期患者外周血中的表达改变及其临床意义蔡鹏威徐如梅吴文冰陈雯(福建省立医院检验科福建福州350001)【摘要】R的:探讨外周血CD4+T细胞亚群表达变化在子痫前期患者发病中的作用。方法：选取在福建省立医院进行产前检查的子痫前期患者25例及正常晚孕妇女27例，育龄期健康未孕妇女20例。利用流式细胞术检测3组研究对象外周血中Thl、Th2、Th17CD4+CD25highCD127low调节性T细胞比例,比较其在子痫前期与正常妊娠时的变化。结果:(1)正常妊娠组与正常未孕组相比，

2、Th2和Treg细胞的表达明显升高(P<0.05)；⑵子痫前期组与正常未孕组相比，Thl、Th2、Thl7和调节性T细胞的表达明显升高(PV0.05)⑶子痫前期组与正常妊娠组相比，Thl和Thl7的表达明显升高(P<0.05)o结论：正常妊娠可能依赖于Thl>Th2、Thl7及Treg这4种细胞间的平衡,妊娠的成功倾向于Th2和Treg细胞的保护性免疫状态，而Thl、Thl7细胞过度表达则可能导致子痫前期的发生。【关键词】CD4+T细胞亚群子痫前期免疫平衡失调【屮图分类号】R446【文献标识码】A【

3、文章编号】2095-1752(2014)01-0109-02子痫前期是妊娠期常见的并发症，在我国的发病率约为9.4%,该病严重危害母婴健康，其发病原因尚不清楚，可能涉及母体、胎盘和胎儿等多种因素，包括有滋养细胞侵袭异常、免疫调节功能异常、内皮细胞损伤、遗传因素和营养因素。本研究通过流式细胞术检测外周血CD4+T细胞亚群表达，了解子痫前期患者免疫调节功能变化的异常。1对象与方法1.1研究对象收集2012年4月到2013年2月在福建省立医院进行产前检查的子痫前期患者25例为子痫前期组，年龄25〜34岁；

4、同期分娩的正常晚期妊娠患者27例为正常妊娠组，年龄23〜33岁；同时选取育龄期健康未孕妇女20例为正常未孕组，年龄23〜34岁。3组研究对象均为中国汉族人群，既往均无心、肝、肾等主要脏器功能损伤，无糖尿病、慢性高血压及自身免疫性疾病史，无感染及近期用药史。两组孕妇均为单胎妊娠，均未临产且无胎膜早破等合并症。1.2检测仪器及试剂单克隆抗体IFN-γAPC>IL・4PE、MouselgG2aAPC>MouseIgGlPE>CD8FITC、CD3PerCP>IL-17PE>CD4PerCP、C

5、D25FITC>CD127・PE购于美国BD公司，FACSCalibur流式细胞仪为美国BD公司生产。1.3样本采集及处理研究对象采集标本前均未服用影响免疫功能的药物，取肘正中静脉血4ml并用肝素钠抗凝在8h内用流式细胞仪检测。1.4流式细胞仪分析1.4.1外周血中Thl、Th2和Thl7细胞的百分比检测等量的肝素钠抗凝全血和RPMI1640混匀后，加入刺激剂，37°C5%CO2培养箱中孵育5h,通过破膜剂处理后，分别按CD3/CD8/IFN-γ/IL-4、CD3/CD8/IL-17进行

6、多色荧光抗体标记，CD3/CD8/MouselgG2a/MouseIgGl作为阴性对照，在散点图上用CD3-CD8设门，CD3+CD8■确定出CD4+T淋巴细胞的分布位置，计算出Thl、Th2和Thl7细胞占CD4+T淋巴细胞的百分比，每份标本分析10,000个细胞。1.4.2外周血中Treg细胞的数量的百分比检测取充分混匀的100μl抗凝全血，CD4/CD25/CD127进行多色荧光抗体标记，CD4/MouselgG2a/MouseIgGl作为阴性对照，在散点图上用CD4-SS设门确定出CD

7、4+T淋巴细胞的分布位置，计算出CD4+CD25highCD127low调节性T细胞占CD4+T淋巴细胞的百分比，每份标本分析10,000个细胞。1.5统计学方法实验数据均以x■±s表示,釆用SPSS13.0软件进行统计分析,使用t检验进行数据统计。以P<0.05为差异有统计学意义。2结果从表1可见，正常妊娠组与对照组比较，Th2细胞和Treg细胞比例显著升高(P<0.05),Thl/Th2比值下降;子痫前期组与与对照组比较，Thl>Th2、Thl7和Treg细胞比例均显著升高(

8、P<0.05),Thl/Th2比值和Thl7/Treg比值升高；子痫前期组与正常妊娠组比较，Thl和Thl7比例均显著升高(P<0.05),Thl/Th2比值和Thl7/Treg比值升高。3讨论妊娠是一种半同种异体移植现象，母体免疫系统对其表现出免疫营养和免疫防护而非免疫攻击，一旦这种母胎免疫耐受遭到破坏，可导致病理妊娠。以往的研究表明Thl/Th2的平衡在母胎免疫耐受中发挥重要的作用，但是，随着CD4+T细胞家族的新成员Thl7细胞与介导免疫耐受的调节性