有机肥料对土壤微生物多样性影响研究进展

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1、冇机肥料对土壤微生物多样性影响研究进展何康摘要：主要介绍了传统法、BIOLOG法、磷脂脂肪酸（PLFA）法、PCR分析法进行十•壤微生物多样性分析的优缺点，阐述了有机吧概念，综述了有机吧对土壤微住物多样性的影响。指出施用有机肥对微生物多样性的不同影响，合理配施有机肥对丁土壤微生物数量、结构和组成都有影响，有助于降低作物发病率，同时能够有效提高作物产量和产值。文章还针対当前研究的方法和探索的方向进行了归纳和总结，对今后有机肥关于微牛•物的研究方向进行了展望。关键词：冇机肥；微生物；多样性土壤微生物是土壤有机质和养分转化、循环的动力，是土壤具有生命力的标店性特征,与土壤健康和肥力冇着密

2、切关系，对周围环境的变化做出迅速反应，在土壤不断的形成、发育、能量传递和物质转换过程屮发挥着非常重要的作川，是日前评价土壤质量的重要指标,对自然元素循环具有重要意义⑴。随着近年來，人口的急速增加、口然环境和资源的过度开发使用、环境问题的加剧和外来生物物种的入侵，使得土壤微生物多样性受到了强烈的影响和干扰［2・4］。多层次的深入研究土壤微生物多样性能有助于了解十•壤日前的状况，并以此为基础制定生态环境保护、自然资源合理利用的措施。随曹研究技术的更新和完善，微生物多样性研究方法和层次都得到了人幅度提升和改善，有关土壤微牛物多样性的研究方向和角度愈发深入［5-6］文在前人研究的基础上重点

3、探讨了目前较为常见的几种土壤微生物多样性的研究方法，以及施用冇机肥对土壤微生物多样性影响的研究进展。1土壤微生物多样性主要分析方法传统微生物多样性的研究分析方法的原理是根据已知的目标微生物特性來选择合适的培养基进行实验培养，然后通过对各种微生物在培养期间的生理生化特征和外观形态不同的变化进行区分鉴定。利于衡量小型微生物群体的多样性，其优点是简便快捷。但是由于技术条件的限定，常导致微生物富集牛长，且反映的微生物信息有限，误差大［7-9］oBIOLOG系统是研究土壤微生物功能多样性和群落结果的方法。所运用的原理是接种经过稀释的土壤菌悬液后，根据土壤中不同的微生物对单一碳源底物的利川所呈

4、现出的能力差异，让氧化反应指示四哇类显色物质呈现出不同程度的紫色，构成该微牛物的特定指纹。运用特有的排列显型技术通过配套的BIOLOG软件进行比较分析土壤微牛:物的代谢特征指纹图谱，与标准菌种的数据库比较Z后反映不同环境条件引起的土壤微生物酬落变化［10］。与传统的平板培养法相比，BIOLOG碳源利用法有固定碳源，无需配置微生物培养基，方便、高效、分辨力强、灵敏度高、易于测定等优点，但是山于培养环境的改变和标准数据库的不健全，所以存在课差和有些种类不能鉴定的问题［libPLFA分析法是一种通过磷脂脂肪酸含量和组成，表征土壤微纶物在数量上具有优势的群落，并凡可以快速冇效的重现土壤微生

5、物群落结构，分析微生物多样性的方法。其原理是利用死亡的细胞在降解分离时所形成的不同磷脂脂肪酸的比例、组成和种类，进而判断微生物种类，确定微牛物群落多样性［12］o相対于传统微牛物学方法，PLFA法直接提取原位上所需要测定的土壤微生物群落细胞中磷脂脂肪酸，避免了传统微生物学方法直接通过培养和计数方法所引起的实验课差，测定土壤微生物的生物量更准确有效，能精准快速的处理人量土壤样品。PLFA图谱可用于研究微牝物的群落结构和微生物代谢条件。PLFA法可测定土壤微生物总量和特殊功能的菌群生物量，比传统法的检测范围更广。当然，该方法在应用中也有不足之处：首先，土样中的生物特征脂肪酸尚未建设完全

6、；其次PLFA法尚不能在菌种和菌株水平上鉴定出微牛物的种类；笫三，PLFA的捉取过程易受外界水热光照等因素的干扰；第四，由于不饱和脂肪酸会与氧气反应发生自氧化作用而挥发，导致被分析样品不易保存［13］。PCR(PolymeraseChainReaction)技术反应类型是聚合链式反应，是一种细胞在体外通过扩增核酸序列从1何可以得到多个核酸的技术，在分析扩增土壤微生物DNA常用这种技术，并且可以对土壤微生物DNA进行有效的数据定量或定性的分析。目前实验所常采用的PCR分析处理方法主要有：变性梯度凝胶电泳(DGGE)、克隆文库法、核糖体基因I'可区分析(RISA)、限制性片段长度多态性

7、技术(RFLP)、末端限制性片段长度多态技术(T-RFLP)和温度梯度凝胶电泳(TGGE)等。PCR法优点：不受环境的影响和基因是否表达的限制；无需其他特殊材料，所测得的等位位点变异水平比具表型更为丰富；测得的数量很大，儿乎遍及所有的基因组；标记的多数分了表现为共显性，能够很准确的分辨几乎所有的基因型。综合以上优点，PCR法在土壤微生物研究得到广泛的运用。但PCR法多适用于原核生物；实验条件要求高，技术分析所需要的成本高、分析费吋。在土壤微生物的总DNA提取过程当中，